干细胞移植治疗神经遗传疾病中HLA配合的几率分析

为了探讨干细胞移植(Stem Cell Transplantation)对神经系统中预后不良的单基因遗传性疾病之一DMD(假肥大型肌营养不良症)的临床可行性，采用PCR反向序列特异性寡核苷酸杂交技术(polymerase chain reactionreverse sequence specific oligonucleotide，PCR—RSSO)对30例DMD患者进行HLA—ABDR基因分型，并与广东省脐血干细胞库668份和中国造血干细胞捐献者库34910份分别进行HLA—ABDR基因频率比较和无关供者干细胞的配合性分析。结果表明：DMD疾病组的HLA基因呈正态遗传，DMD患者HLA基因表达与广东健康人群无统计学上显著差异；DMD患者中1／4寻找到合适用于移植的干细胞，其中在广东脐血库寻找到≥5个HLA—ABDR基因配合的几率为50％，在中国造血干细胞库寻找到6个HLA—ABDR基因配合的几率为26％。结论：对DMD患者进行非亲缘异基因脐带血/外周血移植治疗具有HLA配合供者高选择几率的可行性基础；干细胞移植不仅将使致死性神经肌肉疾病患者获得临床症状改善，并且为难治性神经系统疾病受益于干细胞移植治疗打造技术平台。     

肾小球疾病HLA易感基因研究报告

目的：探讨肾小球疾病发生及发展与HLA等位基因的关系，寻找肾小球疾病HLA易感基因。方法：采用序列特异性引物-聚合酶链反应方法对肾小球疾病患儿的HLA等位基因进行分析，并分析了肾小球疾病患儿存在HLADRB1^*15的不同临床表现。结果：肾小球疾病患儿HLADRB1^*15基因频率为16.25％，明显高于正常对照组；HLADRB1^*15基因在肾病综合征和急性肾小球肾炎患儿中的分布无明显差异；HLADRB1^*15型急性肾小球肾炎和肾病综合征患儿临床症状表现重。结论：肾小球疾病的发生、发展与HLA基因型有关；探讨肾小球疾病的HLA基因型对于判断病情有重要意义。     

HLA基因多态性与哮喘的发病

目前认为哮喘是一种以气道超敏反应性、气道水肿伴有粘液产生及炎症反应为特征的疾病。哮喘的发病机制复杂 ,环境和遗传因素共同作用。随着分子生物学技术的发展 ,人们越来越多地重视哮喘的分子遗传性研究。近些年来多数研究表明哮喘是一种具有遗传易感性的疾病 ,而HLA具有高度多态性 ,在免疫反应中起着重要的作用。因此HLA各个位点上的不同基因型可能与哮喘发病的易感性存在着相关性 ,目前研究认为关系密切的主要是HLA -Ⅱ类基因 --一组免疫应答基因 ,HLA -Ⅱ类基因上的易感等位基因对许多有免疫倾向的疾病存在易感性。[1] 现综合近期…     

广东地区汉族正常人群HLA-E基因多态性研究

为了检测广东地区汉族正常人群HLA—E基N的多态性，并分析HLA—E与典型HLA—Ⅰ类(Ia)位点之间的连锁关系，采用PCR—SSP方法检测广东地区150个无血缘相关的正常人的HLA—E基N型，同时用NIH标准微量淋巴细胞毒方法检测其中106人HLA—A，一B基N型，对HLA—E与HLA—A，-B位点之间作连锁分析。结果发现，在广东地区汉族正常人群中共检出3个HLA—E等位基N：HLA—E*0101，HLA—E*01031，HLA—E*01032，其基N频率分别为45．33％，32．33％，22．33％。未检出E*0102和E*0104。HLA—E与HLA—A，-B位点之间B15／*E01032及A2／E*01032存在连锁不平衡，除此之外其他任何两位点之间不存在连锁不平衡。结论：HLA—E高度保守的多态性提示其生物学特性可能有别于HLA—Ia分子。     

汉族人强直性脊柱炎致病基因多态性的研究

目的：①探讨汉族人HLA-B27亚型基因结构特点。②合成HLA-B27基因检测试剂。方法：采用聚合酶链式反应、顺序特异性引物法和核苷酸探针杂交技术。对120例健康人和46例强直性脊柱炎患者的HLA—B27基因进行了分析。结果：采用本项目合成的HLA—B27DNA检测试剂，在120例正常人中进行了检测，有6例出现HLA—B27扩增带，HLA—B27基因携带者占5％；而65例疑为AS患者中有46例出现HLA-B27扩增带，占70．3％，(RR=46，P&;lt;0．01)；制备的HLA—B27基因检测试剂，具有快速简便、准确性高和特异性强等优点。结论：①在中国汉族人中至少存在2种HLA—B27亚型基因，分别是B*2704和B*2705，同时B*2704和B*2705也是汉族人HLA—B27主要的亚型；HLA—B27的B*2704和B*2705是强直性脊柱炎的主要致病基因。②DNA分型检测HLA—B27基因完全可以取代目前的血清学方法，具有很大的应用价值。     

再生障碍性贫血患儿HLA-DRBl＊15表达及其与免疫抑制治疗疗效的关系

本研究探讨再生障碍性贫血（AA）患儿HLA—DR基因表达情况及其与免疫抑制治疗疗效的关系，评价HLA—DRB1＊15基因型检测的临床意义。采用SSP—PCR方法对40例（特发性33例，继发性7例）获得性AA儿童和107名正常对照人群进行HLA—DR位点基因检测，其中32例AA患儿接受了免疫抑制治疗（其中强化免疫抑制治疗24例，单纯CsA治疗8例），比较AA患儿和健康人群HLA—DR基因表达差异，观察AA儿童HLA—DRBl＊15表达与免疫抑制治疗疗效、疾病复发的关系。结果显示，特发性AA患儿HLA—DRBl＊15（＋）率为5l、5％（17／33），较正常对照人群（20．6％）显著增高（P〈0．01），7例继发性AA患儿均为}玎LA—DRBl＊15（-）。HLA—DRBl＊15（＋）组AA患儿经免疫抑制治疗后6个月有效率和完全缓解（CR）率分别为93．8％、87、5％，而在HLA—DRBl＊15（-）组分别为56．3％和31．3％，两组比较差异均具有极显著意义（P〈0．01）。5例复发患儿均为HLA—DRBl＊15（＋）。结论：AA患儿HLA—DRBl＊15基因表达频率较正常人群显著增高，HLA—DRBl＊15（＋）AA患儿对免疫抑制治疗反应好，疾病完全缓解率高。     

HLA不合的血缘关系供者异基因造血干细胞移植

造血干细胞移植（HSCT）是治疗血液恶性和部分非恶性疾病有效乃至惟一根治手段。目前非血缘关系志愿供者库在世界各地得到建立。HSCT找到HLA—A、B、DR完全相合供者的概率随骨髓库、民族及受者HLA基因及其在人群分布频度而有差异，同时由于骨髓库不可能无限扩大，因此，不能为所有患者找到HLA—A、B、DR完全相合非血缘关系供者；另一方面，非血缘关系志愿供者查找平均需3～4个月，而有些患者病情又不允许等待，因此，限制了非血缘患者供者的应用。     

HLA基因分型方法的进展

1概述人类白细胞抗原(HLA)基因位于第6号染色体短臂6P21.3区,是已知人类基因组中基因最丰富的一个区域,至少包括239个基因座[1]。HLA分型已用于组织配型,器官移植、疾病相关性研究、人类学和法医学等领域。HLA分型过去主要采用血清学和细     

非血缘关系异基因造血干细胞移植

异基因造血干细胞移植是多种血液系统恶性疾病和遗传性疾病的有效治疗方法。寻找HLA相合的供者是进行异基因造血干细胞移植的前提，由于我国独生子女家庭的日益增多，能寻找到血缘关系供者的概率甚少，供者的缺乏是影响其发展的主要因素。从无关人群中寻找HLA相合的非血缘关系异基因供者是解决问题的有效途径。     

小儿支气管肺炎与HLA的相关性研究

目的 探讨反复支气管肺炎的患儿与HIA的相关性。方法 采用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP／PCR）对86例反复患支气管肺炎小儿和81例随机挑选来院体检的健康儿童HLA—DRB1的19个等位基因进行分析，计算各个位点的基因分布频率和相对危险性RR值；并进行卡方检验，筛选有意义基因。结果 反复支气管肺炎患儿HLA-DRB1＊9和HLA—DRB1＊12的分布频率明显高于健康儿童，观察组与对照组比较P〈0.05，有显著性差异。其它各位的位点无显著性差异。疾病组与正常组之间进行逐个等位基因的比较，以相对危险性RR值计算，HLA-DRB1＊9的ILR值为2．46，HLA—DRB1＊12的RR值为2．23。结论 HLA-DRB1＊9和HLA-DRB1＊12可能是反复支气管肺炎小儿的易感基因。     

强直性脊柱炎与HLA—B27

强直性脊柱炎是HLA关联最强的疾病。HLA－B27由22个以上同种异型基因型（亚型：B*2701-B*22)组成，不同亚型核苷酸序列之间只存在个别位点的差异，其亚型具有分布不同的种族和人种充行情况，以B*2705分布最广。近年来建立了大量的AS动物模型，人类B27转基因鼠实验证实B27分子是AS的原发关联成分。PCR－SSP等DNA分型技术和流式细胞术克服了传统的血清学分型技术检测HLA－B27的众多弊端，成为临床辅助诊断强直性脊柱炎的重要手段。     

HLA基因测序分型技术的应用

[目的]对在骨髓库HLA基因分型和器官移植配型等工作中，应用PCR—SSP、PCR—SSO等方法不能确定结果的疑难标本进行测序，确认分型结果，寻找、发现新基因。[方法]测序方法采用双脱氧链终止法，引入双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）作为链终止剂。[结果]对标本直接进行测序能够得到确切的HLA基因分型结果；对PCR—SSP、PCR—SSO等方法不能确定HLA基因分型结果的疑难标本进行测序，得到可靠的确认分型结果。[结论]HLA测序分型结果精确可靠，是HLA基因分型的金标准，能发现新基因。     

不同类型自身免疫性甲状腺疾病与人类白细胞抗原基因的关系及机制研究进展

自身免疫性甲状腺相关疾病与人类白细胞抗原(HLA)基因的关联性得到广泛临床关注。近年来,由于HLA分型技术的发展及对该类疾病发病机制认识的加深,一些新的疾病相关区域及位点被发现。本文对相关研究进行综述,以深入阐明该类疾病的病理过程和机制,为临床提供理论基础。     

HLA配型技术

人类白细胞抗（HLA）是人类最复杂的遗传系统，其高度的多态性影响着细胞和器官移植的免疫反应，并与一些感染性疾病的进程有关，因此，准确的HLA分型技术无疑有着重要意义。本文依据分子生物学技术、免疫学技术等方面进行了综述。     

HLA—B27基因定型技术及其临床应用

利用HLA－B27特异性引物扩增其第3个外显子区的DNA片段，建立了HLA－B27的基因定型技术。125例献血员样本和59例临床样本同时用微量淋巴细胞毒试验（血清学方法）和建立的基因定型方法作HLA－B27分型。15株HLA标准细胞用基因定型技术作HLA－B27定型，结果与其真实情况完全相符．基因定型无假阳性和假阴性结果，而血清学方法有2例假阳性。在献血员样本和强直性脊柱炎（AS）样本中，分别有5．6％和91．3％的HLA－B27阳性率，说明B27与AS相关。分析以上结果，可以认为，HLA－B27定型在临床AS诊断中有重要意义，基因定型方法比血清学方法更可靠，也更适合于临床应用。     

山东骨髓库汉族人群HLA-A,B,DRB1位点基因频率调查

HLA抗原及基因型别是人类重要的遗传标志，存在种族、地域差异。由于HLA血清学分型受血清来源、特异性和所需标本等条件的限制，错误率高达25％。笔者应用较为准确的PCR—SSP方法对山东骨髓库（以下简称山东库）2483名汉族志愿捐献者做了HLA-A、B、DRBl等位基因分型，以期为患者查询HLA相合的造血干细胞供者提供帮助。并借以了解山东库HLA～A，B，DRB1基因频率的分布，现报告如下。     

慢性乙型肝炎患者HLA—A、DRBl基因多态性检测意义

[目的]了解与乙型肝炎慢性化有关的HLA—A、DRBl等位基因多态性。[方法]用基因芯片分型方法分析比较56例慢性乙型肝炎患者与146例正常人HLA—A、DRBl等位基因的多态性。[结果]HLA—A位点中的HLA—A*02、11、24与HLA—DRBl位点中的HLA—DRBl*12、09、04为正常人群常见等位基因。慢性乙型肝炎患者组HLA—A*02(43．8％ vs 29．1，OR：1．89，P=0．005，95％CI：1．21—2．95)与HLA—DRBl*07(10．7％ vs 5．1％，OR：2．21，P=0．04，95％CI：1．02—4．79)、43．8％ vs 29．1％，HLA—DRBl*08(16．1％vs6．8％，OR：2．60，P=0．004，95％CI：1．35—5．02)、HLA—DRBl*11(15．2％vs5．8％，OR：2．89，P=0．002，95％Cl：1．46—5．74)的出现频率较正常对照组明显升高。慢性乙型肝炎患者组HLA—DRBl*13出现频率呈下降趋势，无统计学意义。[结论]HLA—A*02与HLA—DRBI*07、08、11可能是慢性乙型肝炎的易感基因，可以作为慢乙肝预后转归的参考指标。     

反相PCR-SSO技术应用于福建省汉族人群HLA基因多态性研究

自20世纪90年代末期起，以DNA为基础的HLA基因分型技术日趋成熟，成为目前HLA遗传多态性调查和造血干细胞库HLA分型的主流技术。本研究采用反相PCR-SSO技术对近期在厦门登记的造血干细胞捐献志愿者做HLA-A，B，DRB1基因分型，并对其中171名福建省汉族人的HLA基因多态性进行了分析。     

山东淄博地区汉族人群HLA-A、B、DRB1基因频率调查

目的 调查山东淄博地区汉族人群HLA基因多态性的分布。方法 采用序列特异性引物PCR（PCR-SSP）方法，对HLA-A、B、DR位点进行低分辨基因分型；用直接计数法进行抗原频率和基因频率计算。结果 得到一组抗原频率和基因频率资料。结论 山东淄博地区汉族人群HLA基因具有多态性，PCR-SSP方法进行HLA分型的结果准确可靠。     

移植物抗宿主病18例防治及效果分析

选取2004-01／2007—01中山大学附属中山医院行异基因造血干细胞移植的18例患者，亲缘供者HLA全相合8例，亲缘供者HLA 1个A／B／DR位点不合9例，无关供者HLA全相合1例。根据HLA配型情况而采取以低剂量环孢素＋短程甲氨喋呤为基础的不同预防移植物抗宿主病方法，治疗用甲基强的松龙作为一线方案，若效果差需加用其他免疫抑制剂作为二线方案或挽救方案。慢性移植物抗宿主病以甲基强的松龙＋环孢素为基本治疗方案。18例患者均获得造血重建且移植成功，其中12例患者出现急性移植物抗宿主病（66．7％），6例未出现移植物抗宿主病；HLA—A、B、DR位点全相合者发生Ⅱ～Ⅳ急性移植物抗宿主病为11．1％。而HLA上述位点不全相合发生Ⅱ～Ⅳ急性移植物抗宿主病为55．6％。7例患者出现慢性移植物抗宿主病（38．9％）。12例发生急性移植物抗宿主病的患者，治疗后10例临床缓解，2例未缓解并死亡；7例发生慢性移植物抗宿主病的患者，治疗后6例临床缓解，1例无效死亡。所有患者均未出现疾病复发。根据HLA配型不同采用相应的防治方案可以有效控制移植物抗宿主病发生。