液体培养法与套式PCR法检测解脲脲原体比较研究

目的：评价解脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ,Ｕｕ）液体培养技术的准确性。方法：应用被认为是目前检测临床标本中支原体最为灵敏、特异的套式ＰＣＲ技术,并辅以ＤＮＡ全自动测序技术,对１５４例男性ＳＴＤ者的尿道拭子和８３例女性ＳＴＤ者的阴道拭子配对进行Ｕｕ液体培养法和套式ＰＣＲ法检测。并以套式ＰＣＲ检测为参照系进行统计分析。结果：一、男性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率为６３．０％,假阴性和假阳性率分别为２８．５７％和８．４４％;二、女性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率仅为３８．５５％,假阴性和假阳性率分别４９．４０％和１２．０５％。三、男、女性ＳＴＤ者合并观察Ｕｕ液体培养准确率为５４．４３％,假阴性和假阳性率分别为３５．８６％和９．７％。四、Ｕｕ套式ＰＣＲ产物经ＤＮＡ全自动测序与Ｕｕ标准株（９６０＾Ｔ）完     

解脲脲原体培养法与荧光定量PCR检测结果对比研究

目的：对解脲脲原体液体培养法与荧光定量PCR进行方法学评估。方法：322例病人标本进行液体微量培养与荧光定量PCR平等检测，采用UU－荧光定量PCR试剂盒，以PE5700全自动分析仪进行检测和分析。结果：UU－荧光定量PCR法与液体培养法的一致性系数Kappa=0.6825, χ^2=3.843,p＜0．05。液体培养法敏感性为0．874，特异性为0．815，准确性为0．841。结论：以荧光定量PCR检测解脲脲原体其敏感性、特异性、准确性均优于液体培养法。采用培养法应考虑恰当标本处理，选择优质的商品培养基以减少假阳性和假阴性的机会。     

解脲脲原体培养法与荧光定量PCR检测结果对比研究

目的对解脲脲原体液体培养法与荧光定量PCR进行方法学评估. 方法 322例病人标本进行液体微量培养与荧光定量PCR平行检测,采用UU-荧光定量PCR试剂盒,以PE 5700全自动分析仪进行检测和分析. 结果 UU-荧光定量PCR法与液体培养法的一致性系数Kappa=0.6825,χ2=3.843,p<0.05.液体培养法敏感性为0.874,特异性为0.815,准确性为0.841. 结论以荧光定量PCR检测解脲脲原体其敏感性、特异性、准确性均优于液体培养法.采用培养法应考虑恰当标本处理,选择优质的商品培养基以减少假阳性和假阴性的机会.     

应用PCR与培养法检测解脲支原体感染的研究

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１９８便病人进行检测，阳性率３８．９％，同时应用培养法进行对照检测，阳性率２１．７％。结果表明ＰＣＲ法检测 同于培养法检测阳性率，确定ＰＣＲ法是目前对支原体诊断的准确性、敏感性、特异上于最佳的检测方法。     

解脲支原体检测方法比较与探讨

比较荧光定量PCR（FQ—PCR）法．培养法以及ELISA法在检测解脲支原体中诊断与方法学。对534例疑似病例取尿道或宫颈分泌物同时进行FQ—PCR法。培养法以及ELISA法对比检测。以两种方法阳性为真阳性,两种方法皆阴性为真阴性。ELISA法敏感性为81．2％．特异性为87．8％。培养法敏感性为93．4％,特异性为100％。FQ-PCR敏感性与特异性皆为100％。ELISA法特异性和敏感性都稍差。荧光PCR法检测支原体有较好的特异性和准确性,快速,但需要特殊设备和环境,操作要求极为严格．不能进行药敏试验。培养法也有较高的特异性．而敏感性稍差,但方法简单再加上可快速做出药敏,配合临床用药,特别适合基层医院检测解脲支原体的好方法。     

解脲支原体实验方法的探讨

本文选择了180例门诊泌尿生殖系感染患者,同时用PCR和培养法检测角脲支原体。其阳性率分别为31.1%,20.0%。培养法阳性率下降可能与临床用药有关,表明检测解脲支原体,PCR方法更占有优势,如为首诊病人,PCR结合培养更能提高解脲支原体感染的检测水平。     

IST支原体培养与PCR解脲支原体检测方法的比较

目的：比较分析ＰＣＲ解脲支原体检测法与ＩＳＴ支原体培养法的结果及两种方法的优缺点。方法：同时采集８８例临床上诊断为非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）、阴道炎患者分泌物标本两份,分别用ＩＳＴ支原体培养法和ＰＣＲ解脲支原体（Ｕｕ）检测法进行对照实验和分析。结果：ＩＳＴ支原体培养法Ｕｕ阳性２５例（２８．９４％）,人型支原体（Ｍｈ）１例（１．１４％）,Ｕｕ＋Ｍｈ５例（５．６８％）。ＰＣＲ检测Ｕｕ阳性３０例（３４．０４％）,其中男性５例ＰＣＲ检测Ｕｕ为阳性,而ＩＳＴ支原体培养法为阴性;女性３例ＰＣＲ检测Ｕｕ阴性,培养法为阳性。两种方法的Ｕｕ阳性率经统计学ｘ２检验（Ｐ＞０．０５）无显著性差别。结论：ＩＳＴ支原体培养法与ＰＣＲ检测Ｕｕ法均能适用于临床Ｕｕ的检测。ＩＳＴ支原体培养法操作简便,不需要特殊仪器;能进行支原体的种类鉴别;有参考病理阈值并可同时做药敏实验,特别适合基层医院的支原体检测工作。     

128例原发性不育患者精液解脲脲原体的检测

采用解脲脲原体检测试剂对１２８例原发性不育患者的精液进行解脲脲原体病原学诊断，阳性率为３１．２５％（４０／１２８）。本文结果提示在山西省大同地区，解脲脲原体感染可能是引起男性原发性不育的重要原因之一。     

液体培养法检测育龄妇女生殖道感染标本中解脲支原体

目的了解育龄妇女生殖道解脲支原体感染情况。方法用液体培养法对2004年1月至2005年9月间拟诊为生殖道感染的年龄在23~40岁之间的育龄妇女宫颈分泌物标本检测解脲支原体。结果女性生殖道感染组解脲支原体阳性率为54.9%(282/514),高于对照组(22%);经卡方检验,二者之间有高度显著性差异(P<0.005)。结论解脲支原体与女性生殖道感染有关,育龄妇女生殖道解脲支原体感染率很高,并且逐年不断增高的趋势,所以育龄妇女应在孕前或产前检测解脲支原体,这对优生工作有重要意义。     

QF-PCR和液体培养法两种方法联合检测解脲支原体的临床意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(QF-PCR)和液体培养法检测解脲支原体(Uu)感染的临床意义。方法对泌尿生殖道感染患者治疗前后标本用QF-PCR法和液体培养法平行检测,比较两种检测方法阳性检出率。结果治疗前、后QF-PCR阳性检出率高于液体培养(P0.01),但治疗后拷贝数明显下降。Uu对常用抗生素均有不同程度的耐药性。结论临床应根据QF-PCR及液体培养结果,结合临床综合判断,避免培养的低灵敏度造成漏诊、延误治疗或荧光定量聚合酶链反应的高灵敏度造成误诊。     

溶脲脲原体与人精子共同抗原的研究

为探溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)引起不育机理。本文对Uu 与人精子共同抗原性作初步研究材料与方法一、材料4株Uu 从不育男性精淤液中分离,血清2型和     

解脲脲原体的实验室检测方法的研究现状

解脲脲原体是一种条件致病菌，多与宿主共存，仅在某些条件下引起机会性感染，感染部位常为男女泌尿道，其中更易致病的为U．urealyticum型。近年来检测解脲脲原体的方法主要有液体培养法、固体培养法、免疫学方法和分子生物学方法等等，这些检测方法各有优劣。本文就临床使用较多的液体培养法、固体培养法和分子生物学方法进行重点分析，希望能给临床提供更多的帮助。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备抗解脲脲原体(Uu)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用灭活的Uu免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备抗Uu的mAb。以ELISA和免疫组织化学染色法对mAb的亚类、效价及特异性进行鉴定。结果:获得3株抗Uu的mAb,均为IgG2b亚类。3株mAb的腹水ELISA效价为10-4~10-5。有2株只与Uu产生反应而不与肺炎支原体、淋球菌(gonococcus/GC)及豚鼠气单胞菌(A.cariae)等病原体发生交叉反应。免疫组化结果表明,mAb能和解脲脲原体特异性结合。结论:制备了3株具有较高的特异性和效价的抗UumAb,为Uu的免疫学检测及相关研究提供重要的制剂。     

总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性评估

目的 探讨总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性。方法 参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP9-A2文件的要求,以双试剂盒为参比方法、单试剂盒为待评方法,使用患者新鲜血浆标本进行方法比对及偏倚评估。结果 回归方程Y=1.0064X+0.2168,相关系数r=0.9984,不同医学决定水平处的偏倚均小于我国卫生行业标准《WS/T 403-2012 临床生物化学检验常规项目分析质量指标》所规定的总允许误差的1/2。结论 总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果具有良好的一致性,差异临床可接受,其检测报告可使用相同的参考区间,但仍建议临床实验室使用双试剂盒检测患者样本。     

PCR法解脲脲原体分群和四环素耐药检测

目的 建立解脲脲原体(Ureaplasma urealyxicum，Uu)的分群和四环素耐药PCR检测方法。方法 1．根据Uu的多带抗原(multi—banded antigen，MBA)基因序列自行设计引物(P15′-ATT，TGC，AAT，CTT，TAT，ATG，TT；P25′-TTC，AGC，TGA，TGT，AAG，TGC，AGC，ATT，AAA，T)，并建立分群PCR反应体系。2．根据TetM基因序列自行设计引物(P15′-TTA，TCA，ACG，GTT，TAT，CAG，G；P25′-GCT，ATA，TAT，GCA，AGA，CG)，并建立四环素耐药反应体系。结果 1．MBA基因PCR能将Uul4个血清型正确分为二个生物群，其中生物一群(1、3、6、14等4个血清型)出现404bp的产物带，生物二群(2、4、5、7、8、9、10、11、12、13等10个血清型)出现448bp的产物带。60株Uu临床分离株经MBA基因PCR检测，生物一群53例、生物二群6例、生物一／二群同时存在1例。2.Uu典型株14个血清型，TetM基因PcR扩增的不能出现任何条带；60株Uu临床分离株经TetM基因PCR检测41例出现目的条带。结论 PCR法进行Uu生物分群和四环素耐药检测简单、快速，为相关研究提供了手段。     

溶脲脲原体感染对精液参数影响的研究

目的探讨男性生殖道溶脲脲原体(Uu)感染对精液各参数的影响。方法应用支原体微量培养试剂盒进行人型支原体检测;应用WLJY—9000伟力彩色精子质量分析系统对精液标本进行常规分析。结果溶脲脲原体(Uu)感染组64例中,精液量异常8例,占12.5%;液化时间异常10例,占15.6%;pH值异常8例,占12.5%;精子密度异常15例,占23.4%;精子活率异常8例,占12.5%;精子活动力a级25%或(a+b)级50%共有28例,占43.8%;无精子症3例,占4.7%;畸形精子8例,占12.5%。结论 Uu感染可引起精子数量减少、运动质量和能力减弱,进一步证实了生殖道Uu感染是男性不育的重要原因。     

广州地区新生儿解脲脲原体感染及高危因素调查

对１４１例新生儿做鼻咽部及尿道口分泌物的解脲脲原体（ＵＵ）培养，结果显示：无症状正常组的新生儿（ＵＵ的阳性率为２０％，患病组的新生儿ＵＵ的阳性率为４５％，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。新生儿出生前其母有胎膜早破的，其ＵＵ阳性率为２５％，出生前其母无胎膜早破的新生儿ＵＵ阳性率为１９％，两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。本文认为ＵＵ是引起新生儿感染的重要病原体之一。     

解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。     

解脲脲原体感染与早产儿关系研究

本文随机对我院新生儿病房１９９７年６月１９９７年１２月收住的１２３例新生儿患者用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）在入院３天内对其咽拭子标本进行解脲脲原体（ＵＵ）之ＤＮＡ检测。结果：（１）早产儿组ＵＵ阳性率５６５２％显著高于足月儿组ＵＵ阳性率３４００％（ｘ２＝４．０１,Ｐ＜０．０５）。（２）ＵＵ阴性组平均体重３０８２２±３３５１ｇ显著高于ＵＵ阳性组平均体重２７５４３±３１６２ｇ（ｔ＝２．０５１,Ｐ＜０．０５）。结论：宫内感染ＵＵ是引起早产儿、低出生体重儿的重要因素之一。预防关键在对生殖道ＵＵ阳性妇女怀孕前先予治疗,以阻断母婴垂直传播。