The study of IL-1 β,TNF-α,IL-6 gene expression and plasma levels on hemodialysis before and after dialyzer reuse

ＴｈｅｓｔｕｄｙｏｆＩＬ┐１β，ＴＮＦ┐α，ＩＬ┐６ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｉｏｎａｎｄｐｌａｓｍａｌｅｖｅｌｓｏｎｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｄｉａｌｙｚｅｒｒｅｕｓｅＱｉａｎＪｉａｑｉ钱家麒，ＹｕＺｈｉｙｕａｎ余志远，ＤａｉＨ...     

血透生物相容性系列研究——细胞因子和粘附分子在血透时变化及相关因素分析

血透生物相容性与血透并发症密切相关,并直接影响患者的存活率和生活质量。研究提示,血透相关的一系列变化可能与激活单核细胞释放细胞因子、影响白细胞粘附分子表达,引起与粘附功能相关的白细胞功能异常有关。本项目自90年代初在国内率先、在国际上也以领先步伐采用多聚酶联反应、细胞原位杂交技术、酶联免疫吸附试验及流式细胞仪分析方法等技术,全面系统地研究血透时不同透析膜初用、复用及不同透析时相IL-1β、TNF-α与IL-6在外周血单个核细胞中的基因表达与     

人腹膜微血管内皮细胞的原代培养

目的 分离和培养人腹膜微血管内皮细胞.方法 取非炎症且非转移性肿瘤患者施行腹部外科手术的大网膜组织,经Ⅰ型胶原酶消化,两次筛网过滤、离心等步骤获取人微血管段,接种24 h待内皮细胞从微血管段爬出贴壁后,去除微血管段获得内皮细胞进行传代培养.组织形态学观察及免疫组化法鉴定所培养的细胞.结果 运用此法进行的原代培养,血细胞在换液和传代过程中被去除,成纤维细胞污染被减至最少;组织形态学观察显示内皮细胞呈铺路石样生长,免疫组化鉴定表明Ⅷ因子阳性;证实所培养的细胞为人腹膜微血管内皮细胞,其纯度较高,生长状态良好.结论 实验成功分离和培养了人腹膜微血管内皮细胞,为体外研究腹膜透析的病理生理学改变,提供了细胞来源.     

医院科研伦理价值观培育平台的构建

科研伦理价值观是指导科研人员科研动机和科研行为的价值意识,对科研诚信起到重要的作用。在三级医院应当根据不同的科研人员群体,搭建不同的科研伦理价值观培育平台,并最终成为一套立体的培育体系,引导科研人员树立正确的科研伦理价值观。     

Klotho蛋白在肾脏疾病中研究进展

肾脏疾病已成为威胁人类健康的公共卫生问题之一,其发病机制尚不非常清楚,治疗手段有限.Klotho蛋白是体内Klotho基因编码的一种单向跨膜蛋白,主要在肾小管上皮细胞中表达,可在血液和尿液中检测到.Klotho蛋白具有多种生物学效应,包括调节矿物质代谢、抗凋亡和抗衰老等[1].近年的研究提示Klotho蛋白水平降低可能在急性肾损伤（acute kidney injury, AKI）的发生发展中起着重要作用,并有可能作为AKI诊断和判断预后的一个新的标志物[1].同时Klotho蛋白对钙磷代谢的调节作用也为慢性肾脏病（chronic kidney disease, CKD）的治疗提供了新的方向.本文就近年来Klotho蛋白在肾脏疾病发病机制、诊断和治疗等方面的研究现状作一综述.     

黄芪对糖尿病大鼠肾组织血管生成素受体Tie-2表达的作用

目的:探讨血管生成素受体Tie-2在糖尿病大鼠肾组织中的表达以及黄芪对其影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和黄芪治疗组。8周后处死大鼠,采用实时定量聚合酶链反应和免疫组化法分别检测3组大鼠肾组织中Tie-2基因和蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾组织Tie-2蛋白表达显著升高(P<0.01);黄芪治疗组大鼠肾组织Tie-2蛋白表达较糖尿病组显著下调(P<0.01)。结论:黄芪通过下调糖尿病大鼠肾组织Tie-2的表达而发挥肾保护作用是其治疗糖尿病肾病的作用机制之一。     

白细胞介素6对体外培养人脐动脉平滑肌细胞成骨样转化、钙化的影响

目的 研究白细胞介素6（IL-6）对体外培养人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）成骨样转化、钙化的作用及可能的信号通路。 方法 组织植块法原代培养HUASMC。培养基加入不同浓度重组人IL-6（rhIL-6）孵育细胞,设空白对照组。茜素红S钙沉积染色及甲氧-酚酞络合酮法检测细胞层钙盐含量。实时定量PCR、荧光定量法以及Western印迹法分别检测骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨桥蛋白（OPN）、骨形成蛋白2（BMP２）和骨保护素（OPG）基因以及蛋白表达。凝胶迁移滞后实验（EMSA）检测核心结合因子α1亚基（Cbfα1）的结合活力,以及分别应用p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580和蛋白激酶C二氢神经鞘氨醇（DHC）后Cbfα1的结合活力。 结果 rhIL-6 50 μg/L诱导12 d,细胞基质层茜素红S染色阳性。与对照组相比,细胞层钙盐含量在rhIL-6 10 μg/L组刺激9 d[（0.76±0.02） mmol/g蛋白]和12 d[（1.54±0.11） mmol/g蛋白]升高,50 μg/L组刺激6 d[（1.81±0.03） mmol/g蛋白]、9 d[（2.08±0.10） mmol/g蛋白]和12 d[（3.22±0.18） mmol/g蛋白]升高,并呈时间、剂量依赖地增加。rhIL-6 10 μg/L刺激12 h,BMP2 mRNA（3.04±0.07）和蛋白（8.14±0.41）及BAP mRNA（2.51±0.11）和蛋白（3.96±0.54）表达上调;刺激72 h,OPN mRNA（3.14±0.32）和蛋白（2.57±0.43）水平及OPG mRNA（4.06±0.24）和蛋白（3.46±0.34）水平上调。rhIL-6刺激6 h,Cbfα1结合活力增加;DHC能够部分抑制rhIL-6诱导的Cbfα1结合活力增加,SB203580没有明显作用。 结论 IL-6体外能够诱导HUASMC发生钙化和成骨样转分化,这可能是临床观察到IL-6与血管钙化相关的机制之一。IL-6的这一作用可能与细胞内蛋白激酶C通路的活化有关。     

尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在成人心脏手术后急性肾损伤早期诊断中的价值

目的 探讨尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL）在心脏手术后急性肾损伤（AKI）早期预测和诊断中的价值。 方法 前瞻性收集我院心脏手术患者手术前后不同时相的血、尿标本,选取其中14例AKI患者,分别测定尿NGAL和Scr水平;并选择临床资料相匹配的非AKI患者15例作为对照。观察两组患者围手术期尿NGAL和Scr的动态变化,运用接受者操作特性曲线（ROC）评价尿NGAL诊断AKI的精确性。AKI定义为Scr水平较基础值增加≥50%。 结果 Scr诊断AKI的中位时间为入ICU后24 h（10 h,48 h）。AKI患者术后入ICU即刻的尿NGAL水平显著高于术前基础水平并达峰值[20.51（13.42,50.02） μg/L比3.42（1.60,9.92） μg/L,P = 0.006];也显著高于非AKI患者 [2.91（0.72,8.61） μg/L,P = 0.002]。入ICU即刻尿NGAL 的ROC曲线下面积为0.824,95%的可信区间（CI）为0.667~0.980,P = 0.003。当以10.95 μg/L作为诊断截点时,此刻的尿NGAL在AKI诊断中的敏感性和特异性分别为85.7%和80.0%。入ICU即刻的尿NGAL与入ICU 24 h的Scr（r = 0.545,P = 0.002）及eGFR（r = －0.546,P = 0.002)呈正及负相关。 结论 心脏手术后AKI患者术后入ICU即刻的尿NGAL水平显著升高,对诊断AKI具有较高的准确性,其诊断AKI的时间早于Scr。尿NGAL可作为成人心脏术后AKI的早期诊断标志物。     

AKI网络定义的急性肾损伤在心脏手术后患者中的发生情况及其危险因素和预后分析

目的 了解心脏手术后急性肾损伤（AKI）的发生情况,危险因素及预后。 方法 回顾性分析2004年1月1日至2007年6月30日期间所有在本院行心脏手术的住院患者的临床资料。采用AKI 网络（AKI Network, AKIN）推荐的AKI定义评估心脏手术后AKI的患病率及住院病死率,对术前、术中、术后与AKI发生可能相关的危险因素进行分析。 结果 总共1056例患者中,术后发生AKI者328例,患病率为31.06%。AKI患者的住院病死率显著高于非AKI患者（11.59% 比 0.69%,P < 0.01）。多因素Logistic逐步回归分析显示,高龄（每增加10岁,发生AKI的风险上升1.40倍）、术前高尿酸血症（OR = 1.97）、术前左心功能不全（OR = 2.53）、冠脉旁路移植术（CABG）联合瓣膜手术（OR = 2.79）、手术时间延长（每增加1 h,发生AKI的风险上升1.43倍）、术后循环血容量不足（OR = 11.08）是心脏手术后AKI发生的独立危险因素。 结论 AKI是心脏手术后常见的并发症,AKI患者预后较差。高龄、术前高尿酸血症、术前左心功能不全、CABG联合瓣膜手术、手术时间延长、术后循环血容量不足是心脏手术后AKI发生的独立危险因素。     

术前左心功能不全是心脏手术后发生急性肾损伤的独立危险因素

目的 评价心脏手术患者术前心功能对术后并发急性肾损伤(AKI)的影响.方法 回顾性分析2004年1月1日-2007年6月30日在上海交通大学医学院附属仁济医院行心脏手术的所有住院患者的资料,采用AKI网络(AKIN)推荐的AKI定义统计心脏手术后AKI的发生率,对患者术前的心功能进行评估,并分析其他可能造成术后AKI的危险因素.结果 1 056例患者中,术后发生AKI 328例,发生率为31.1%.AKI组的院内病死率为11.6%(38/328),显著高于非AKI组的0.7%(5/728,P＜0.01).多因素Logistic回归分析显示,在校正年龄、术前高尿酸血症、冠状动脉旁路移植联合瓣膜手术、手术时间、术后循环血容量不足等因素后,术前左心功能不全仍是心脏手术后发生AKI的独立危险因素(OR=2.53,95%CI为1.24～5.13,P=0.01).结论 术前左心功能不全是心脏手术后发生AKI的独立危险因素.