荧光猝灭法研究大黄酚与牛血清白蛋白的相互作用

目的:运用荧光猝灭光谱研究了模拟人体生理条件下大黄酚与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。方法:以BSA为荧光剂,大黄酚为荧光猝灭剂,在激发波长278 nm下的荧光光谱,根据Stern-Volmer方程、位点结合模型和Lineweawer-Burk双倒数曲线方程,求出了大黄酚与BSA结合的结合类型、结合位点数和结合常数等参数。并利用Van’t Hoff方程求得反应的热力学参数,讨论了大黄酚与蛋白质的主要作用力类型。结果:大黄酚与BSA形成复合物从而猝灭BSA的内源荧光,且其荧光猝灭机理符合静态机制。在25℃和37℃下大黄酚与BSA结合的结合常数分别为:4.923×104 L.mol-1和5.928×104 L.mol-1;结合分子数分别为:0.8551和1.0583。热力学数据表明大黄酚与BSA以疏水作用为主,同时也存在较弱的静电作用。结论:大黄酚在体内能够被血清白蛋白存储和转运,且结合时可能改变了BSA的构象。     

通脉醒脑滴丸抗血栓与改善微循环的作用研究

目的:研究通脉醒脑滴丸抗血栓和改善微循环的作用。方法:玻璃毛细管法测定小鼠凝血时间;角叉菜胶复制小鼠尾血栓模型,观察小鼠尾血栓形成情况;尾静脉注射高分子右旋糖酐复制小鼠软脑膜微循环障碍模型,观察小鼠毛细血管收缩率和血液流态变化情况。结果:295.40、147.70、73.85mg/kg剂量下,通脉醒脑滴丸具有抗凝血作用,可对抗由高分子右旋糖酐引起的小鼠软脑膜微循环障碍(P<0.05);复制模型24、48、72h后在295.40mg/kg剂量下,通脉醒脑滴丸能显著抑制体内血栓的形成(P<0.05)。结论:通脉脑醒滴丸具有抗血栓与改善微循环作用。     

通脉醒脑滴丸对局灶性脑缺血模型大鼠的保护作用

目的:探讨通脉醒脑滴丸对局灶性脑缺血模型大鼠的保护作用及机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、药物组及对照组;线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶脑缺血再灌注模型(MCAO),评价神经功能状态,测定脑含水率和脑梗死比率,并测定过氧化损伤相关指标。结果:通脉醒脑滴丸能显著减轻缺血再灌注后神经功能损害,降低脑水肿程度和脑梗死比率,降低脑组织丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结论:通脉脑醒滴丸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机理与其减轻过氧化损伤,减轻组织缺血坏死程度和脑水肿有关。     

基于PI3K／Akt信号转导通路的通脉醒脑滴丸治疗脑缺血的机制研究

目的：探讨中药复方制剂通脉醒脑滴丸防治脑缺血卒中的作用机理。方法：选用线栓阻断大鼠大脑中动脉法复制脑缺血再灌注模型，采用荧光定量PCR方法测定脑组织PI3K、Akt和PTEN的表达，并通过免疫组化方法测定脑组织HIF-1a和VEGF的表达，考察通脉醒脑滴丸对PI3K／Akt信号通路的作用。结果：通脉醒脑滴丸能上调脑组织PI3K、Akt、HIF-1a以及VEGF的表达，下调PTEN的表达。结论：研究初步证实通脉醒脑滴丸对脑缺血损伤具有保护作用，其机制可能与介导PI3K／Akt细胞存活通路的激活或上调有关。     

对高职高专英语教学改革的思考

近些年来,随着时代的进步,要求高职高专英语教学改革的呼声越来越高,高职高专英语教学中确实也有一些急需改进的地方。笔者根据自己教学中的一些体会,对高职高专英语教学改革要优先解决的一些问题谈谈自己的看法。     

基于全人教育理念下的“脑、手、心”三位一体的《药理学》教学设计模式的探讨

该教学设计模式的探讨是基于全人教育理念指导下展开,在药理学教学过程中除关注知识讲授、能力培养外,同时将人文素养、职业素养等方面渗透到药理学课程的教学中,对提高药理学教学质量、实现教学目标具有重要的影响。     

没食子酸通过NF-κB通路对缺氧诱导的 BV2小胶质细胞损伤的保护作用机制

目的:建立BV2细胞缺氧损伤模型,研究没食子酸通过NF-κB通路对缺氧诱导的BV2小胶质细胞损伤的保护作用机制。方法:取BV2小胶质细胞分为空白组、模型组、低剂量、中剂量及高剂量组,通过三气培养箱建立BV2小胶质细胞缺氧损伤模型,低剂量、中剂量及高剂量组分别给予1.7 g/mL、3.4 g/mL、8.5 g/mL没食子酸进行干预。采用CCK-8法检测没食子酸对缺氧的BV2细胞的保护作用,使用试剂盒检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)的含量,ELISA检测上清中炎症因子表达水平(TNF-α、IL-1β、IL-6),Western blot检测BV2细胞内p-IKK/IKK、p-IκB/IκB和pNF-κB p65/NF-κB p65蛋白的表达水平以及NF-κB p65的核位移。结果:与空白对照组相比,缺氧可造成BV2细胞培养基上清液LDH的活力增加和炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的释放,细胞中SOD活力降低,MDA和ROS的水平升高,NF-κB通路(p-IKK/IKK、p-IκB/IκB和p-NF-κB p6...     

线栓法致大鼠局灶脑缺血模型的评价及思考

目的 基于实验经验的总结,重点介绍线栓法致大鼠局灶性脑缺血模型的制作方法 及操作程序,为建立较为稳定的脑缺血模型提供参考.方法 采用线栓自颈总动脉插入,经颈内动脉阻断大脑中动脉以造成局灶性脑缺血模型,测定各组脑组织含水率及梗塞体积比.结果 模型组脑组织含水率及脑梗塞体积比明显高于假手术组;阳性药尼莫地平能明显减轻线栓模型损伤引起的脑组织缺血,降低脑含水率和脑梗塞体积.结论 通过对线栓法模型进行改良,可有效缩短造模时程,减少手术损伤,提高再灌注后存活率,使造模效果趋于稳定.     

荧光猝灭法快速测定芦荟大黄素血浆蛋白结合率的研究

目的:建立荧光猝灭法快速测定芦荟大黄素血浆蛋白结合率的理论和实验方法学。方法:在模拟人体生理条件下,以牛血清白蛋白(BSA)为荧光剂,芦荟大黄素为荧光猝灭剂,研究激发波长280nm下的荧光光谱。结果:芦荟大黄素和BSA的荧光猝灭是静态猝灭过程,其结合常数K30℃=6.024×104 L.mol-1和K37℃=5.104×104 L.mol-1;结合分子数n30℃=0.9776和n37℃=1.0548;相互作用力主要是静电作用;同时建立了预测血浆蛋白结合率的理论模型,并根据实验数据分析了芦荟大黄素浓度与BSA浓度动态变化时药物血浆蛋白结合率的全程规律。结论:不同蛋白质浓度与药物浓度条件下血浆蛋白结合率处于动态变化中,血浆蛋白结合率随药物浓度的增大而减少。