丹参二萜醌类活性成分通过PKCδ/PKD1μ信号通路抗胰腺癌的作用研究

摘要 目的 验证丹参二萜醌类活性成分对胰腺癌和多发性骨髓瘤的抑制效应，阐明其诱导胰腺癌和多发性骨髓瘤凋亡的作用机制。方法 胰腺癌细胞AsPC-1、BxPC-3用含10% gibco胎牛血清的RPMI1640培养液培养，按隐丹参酮组（30μM）、丹参新酮组（15μM）、去氢丹参新酮组（15μM）分别加药处理。cell-counting-kit-8（CCK8）法检测细胞存活率；AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡；Western Blot检测相关PKC同工酶磷酸化水平；对AsPC-1和BxPC-3细胞进行siRNA转染，Western Blot检测相关PKC同工酶磷酸化水平。结果 隐丹参酮组AsPC-1、BxPC-3细胞存活率分别为40.1%±5.0%、36.2%±5.4%；丹参新酮组AsPC-1、BxPC-3细胞存活率分别为52.1%±5.1%、47.2%±5.7%；去氢丹参新组AsPC-1、BxPC-3细胞存活率分别为46.1%±5.0%、42.2%±5.4%(P<0.01)。流式细胞术结果显示：AsPC-1组内空白对照组、隐丹参酮组、丹参新酮组、去氢丹参新酮组细胞的凋亡率分别为4.71%、30.10%、52.26%、42.30%；BxPC-3组内空白对照组、隐丹参酮组、丹参新酮组、去氢丹参新酮组细胞的凋亡率分别为5.10%、30.66%、33.76%、51.76%（P<0.01）。Western Blot检测显示隐丹参酮组、丹参新酮组、去氢丹参新酮组较空白对照组，胰腺癌AsPC-1、BxPC-3细胞p-PKD/PKCμ ser916、p-PKCδ thr505、p-PKD/PKCμ ser744/748的水平降低。Western Blot检测显示，siRNA沉默胰腺癌AsPC-1、BxPC-3细胞PKCδ，胰腺癌AsPC-1、BxPC-3细胞PKD/PKCμ ser744/748的磷酸化水平下调。结论 隐丹参酮、丹参新酮、去氢丹参新酮通过抑制PKCδthr505的磷酸化水平，继而PKD1μser744/748磷酸化水平下调，从而显著促进胰腺癌AsPC-1和BxPC-3细胞凋亡发生。     

乌头地上部分非二萜生物碱类成分研究

目的对毛茛科乌头属药用植物乌头Aconitum carmichaelii地上部分进行化学成分研究。方法乌头干燥的茎叶用甲醇回流提取,所得的浸膏用1.5%HCl溶解,醋酸乙酯萃取得总粗提取物。粗提物用各种柱色谱进行分离纯化,经光谱数据(~1H-NMR、~(13)C-NMR、MS)进行结构鉴定。结果从乌头地上部分分离得到15个化合物,分别鉴定为3-羧基-吲哚(1)、corchoionol C(2)、β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷-6′-棕榈酸酯(3)、松脂素(4)、(+)-N-formylnorglaucine(5)、oxoglaucidaline(6)、海罂粟碱(7)、(+)-cataline(8)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(9)、山柰酚-3-O-β-(2″-乙酰基)-半乳糖苷(10)、megastigmane(11)、山柰酚-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(12)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃木糖苷(13)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(14)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(15)。结论化合物1～15均为首次从该植物的地上部分中分离得到,其中化合物1～3、5、6、8～15为首次从乌头中分离得到。     

Diterpenoids from the Roots of Agastache rugosa

从土藿香根中得到两个二萜化合物，藿香酚（２）及异藿香酚（３）。经光谱解析（ＩＲ，ＵＶ，ＨＲＭＳ及ＮＭＲ谱），确定它们的结构分别为１１，１４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ１２ｍｅｔｈｏｘｙ１９（４→３）ａｂｅｏａｂｉｅｔａ４，（１８），８，１１，１３ｔｅｔｒａｅｎ７ｏｎｅ（２）和１１，１４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ１２ｍｅｔｈｏｘｙ１９（４→３）ａｂｅｏａｂｉｅｔａ３，８，１１，１３ｔｅｔｒａｅｎ７ｏｎｅ（３）藿香酚（２）为一新的化合物，而异藿香酚（３）系首次从天然界分离得到，二者为一对异构体。     

黄白姜花化学成分的研究

目的:研究黄白姜花Hedychium chrysoleucum根状茎的化学成分.方法:利用乙醇提取和蒸馏提取,硅胶柱进行分离纯化,通过波谱技术鉴定化合物的结构.结果:分离得到7个化合物,分别鉴定为姜花酮(1),姜花素A(2),滇姜花素A(3),姜花素E(4),β-谷甾醇(5),柳杉二醇(6)和β-桉醇(7).结论:化合物1～7为首次从黄白姜花中分离得到.     

丹参二萜醌的细胞毒活性及构效关系研究

目的：丹参二萜醌的结构－细胞毒活性的关联与探讨。方法：应用CHARM（Chemistry at Harvard Macro Molecular Mechanics)力场，用powell方法优化本文涉及的丹参二萜醌及其类似物分子的几何构型，经优化后的分子构象采用quanta软件包括CNDO计算，以获取量子化学参数，并对这些参数进行分析。结果：A环是芳环的丹参酮也包括三环二萜凡具有平面环系统结构的均有可能对小鼠淋巴白血病细胞显示明显的细胞毒活性。在二氢呋喃环的氧原子－3（如二氢丹参酮－I、隐丹参酮）较之含呋喃环氧原子－3的丹参酮其局部电荷更负，因而也就使化合物具有更大的极性从而增强了细胞毒性。具有对称结构的含1，4对萘醌生色团的丹参新醌A或B较1，2邻萘醌的如Ro-090680和二氢丹参酮－I的细胞毒活性均显著降低。所有丹参酮及其类似物的疏水基团均远远多于亲水基团，因此它们均不溶于水，但可在水中以某种方式形成胶体颗粒，其中的一些参数如偶极距、范特华力、亲水指数，均可影响到它们的疏水相互作用。丹参酮－I本身细胞毒活性很低，但通过Mannich反应，在呋喃环上引进含氮杂环后其对P－388的细胞毒活性有很大提高。     

不同地区冬凌草有效成分抗肿瘤作用研究

卢氏1号及信阳A,B都是从冬凌草[Rabdosia rubescens(Hemsi)]中提取出来的,均为新的二萜类抗肿瘤成分,实验证明:这三种成分对体外培养的艾氏腹水癌细胞具有较明显的细胞毒作用。对动物移植性肿瘤ECA,ARS,S_(180),HCA,HCS,P_(388),L_(1210),LLC及B_(16)均有较强的抗肿瘤作用(P<0.05)。对小鼠体液免疫(溶皿素方法),及细胞免疫(肿瘤相伴免疫方法)均无明显影响。急性毒性LD_(50)卢氏1号为69.5±6.7mg/kg,信阳冬凌草水剂为10.6±0.9g/kgip。     

卡氏乳香中1个新的降二萜

目的 研究卡氏乳香Boswellia carterii中的化学成分及其抗骨质疏松活性。方法 运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱和制备高效液相色谱等方法进行化学成分分离,通过波谱数据及文献对比对其进行结构解析。结果 卡氏乳香的95%乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为 (1R,2E,8S,9R)-1,9-环氧-8-乙酰氧基-4,5-二氧代降西松烷型-2-烯（1）、rel(1S,3R,7E,11S,12R)-1,12-epoxy-4-methylenecembr-7-ene-3,11-diol（2）、boscartin F（3）、boscartene K（4）、fidmansumbin-13(17)-en-3,16-diene（5）、3α-acetoxyl-7-oxo-tirucalla-8,24-dien-21-oic acid（6）、boscartene N（7）、3β-hydroxy-tirucallic acid（8）、α-boswellic acid（9）、boscarterol O（10）、boscarterol F（11）。结论 化合物1是新化合物,命名为卡氏乳香素,化合物5为首次从乳香中分离得到,化合物2和10首次从该属植物中分离得到。对11个化合物进行抗骨质疏松活性筛选,发现化合物1、3、6和10具有良好的抑制破骨细胞活性。     

显脉香茶菜化学成分的研究

在继续对显脉香茶菜Ｒａｂｄｏｓｉａ ｎｅｒｖｏｓａ （Ｈｅｍｓｌ）Ｃ．Ｙ．Ｗｕ ｅｔ Ｈ．Ｗ．Ｌｉ茎叶有效成分的研究中,又分得一种新的对映－甲壳杉烷型二萜,经理化常数和波谱分析,确定其结构为１α、１５β－二羟基－６β－乙氧基－６,７－Ｂ－断裂－对映－贝壳杉－１６－烯－６,２０－环氧－７,２０－内酯,命名为显脉香茶菜丙素（ｒａｂｄｏｎｅｒｖｏｓｉｎＣ）。     

显脉香茶菜化学成分的研究

从显脉香茶菜茎叶中分得一新二萜化合物,命名为ｒａｂｄｏｎｅｒｖｏｓｉｎＢ,根据光谱数据分析确定其结构１α,１５β－二羟基－６β,７－Ｂ－断裂－对映－对映－贝壳杉－１６烯－６,２０－环氧－７,２０－δ－内酯。     

毛叶香茶菜中的二萜化合物

目的：对河南产毛叶香茶菜化学成分进行研究。方法：运用各种色谱技术和波谱分析对其化学成分进行分离鉴定。结果：分离鉴定了20个二萜化合物。结论：化合物1—3为三个新的对映-贝壳杉烷二萜类化合物，结构分别为7β，15β，16β—三羟基—6β，17β—二乙酰氧基—7α，20-环氧—对映—贝壳衫烷(1)、16（S)—6β，11α，17β—三羟基-6，20-环氧—1α，7β—内酯—6，7—断裂—对映—贝壳杉-15酮(2)和6α，11α—二海基—1α—乙酰氧基—7，20内酯—6，7—断裂—对映—贝壳杉—16—烯—15—酮(3)，依次命名为毛叶香茶菜丙素、丁素和戊素；化合物4和5为—对新化合物，其结构为3α，15α，1β6，17β，18β—五羟基。对映—松香—7(8)—烯的丙酮化物，其丙酮化缩合部分互为对映体，分别命名为毛叶香茶菜庚素(4)和辛素(5)。