恙虫病东方体Sta56抗原的原核表达、纯化及其在间接ELISA中的应用

目的　构建含恙虫病东方体sta5 6基因的重组表达质粒 ,在E .coli中表达Sta5 6重组抗原 ,纯化后用于间接ELISA检测恙虫病。方法　从含有恙虫病东方体Karp株sta5 6基因的重组质粒TOPO sta5 6扩增出截短的sta5 6 ,定向插入pET30a载体 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,用SDS PAGE及Westernblot进行分析 ;采用电洗脱方法纯化重组抗原并应用于间接ELISA检测恙虫病。结果　以截短的sta5 6基因片段构建了重组表达质粒pETOt95 7,重组的Sta5 6抗原可在E .coli中以融合蛋白的形式有效表达 ,SDS PAGE显示了一条相对分子质量 (Mr)为 4 0 .3× 10 3 的蛋白表达带 ,West ernblot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别。电洗脱纯化的重组抗原应用于间接法ELISA检测恙虫病 ,与间接免疫荧光法IFAT比较 ,其敏感性和特异性分别为 91.7%和 76 .5 %。结论　在大肠杆菌中表达的Sta5 6重组抗原具有免疫反应性 ,纯化后可用作免疫诊断试剂。     

京沪两地小学生早餐行为及影响因素分析

目的　了解京沪两地小学生早餐现状及影响早餐的行为因素 ,为深入研究小学生早餐问题 ,制定和开展“学生营养早餐计划”提供科学依据。方法　采用分层整群抽样方法 ,对北京、上海两个城市 86 88名 6～ 1 1岁学生的早餐行为进行问卷调查。调查内容包括家庭一般情况、饮食喜好、早餐食物选择、奶类摄入等情况。结果　小学生不能保证每天吃早餐的比例北京男生为 2 5.8% ,女生为 2 1 .6 % ;上海男生为 1 1 .4 % ,女生为 1 3.3%。学生不吃早餐的原因主要是没有食欲、没有时间吃和家长没时间做。学生早餐食物品种单调 ,质量较差。学生早餐 55%以上由母亲准备 ,食用早餐的地点以家里为主 ,其次为上学路上和饭馆或小摊。早餐费用在 2～ 3元之间。学生吃早餐的行为与其母亲的吃早餐行为密切相关 (P <0 .0 1 )。结论　京沪两地小学生的早餐质量均有待改善。应加强家长的营养知识教育 ,重视早餐 ,倡导合理营养。     

恙虫病东方体Karp株Sta22抗原基因原核表达载体的构建及鉴定

目的:构建恙虫病东方体Karp株Sta22抗原基因原核表达载体,为表达该基因奠定基础。方法:以恙虫病东方体Karp株基因组为模板,通过PCR方法扩增Sta22抗原基因,并将其克隆到表达载体pEASY-E2上,通过PCR方法及核苷酸测序进行鉴定。结果:所构建的原核表达载体携带Sta22基因,基因序列与GenBank上所公布的信息完全一致。结论:成功构建了Sta22抗原基因的原核表达载体,为研制和开发新型的恙虫病疫苗及临床诊断试剂奠定理论基础及物质保障。     

恙虫病东方体Karp株核酸疫苗的构建及其免疫功能初步研究

目的构建恙虫病东方体Karp株Sta56抗原候选核酸疫苗并初步探讨其可能诱导的免疫功能。方法从连有恙虫病东方体Karp株编码56000u表膜蛋白基因开放读码框全长的T载体质粒pMD18/Sta56中双酶切出目的基因,定向亚克隆构建核酸疫苗质粒载体pVAX1-Sta56,转染Hela细胞,WesternBlot分析Sta56蛋白的表达及其免疫原性,转染L929细胞,接种恙虫病东方体,Giemsa染色细胞内恙虫病东方体数目比较,初步探讨pVAX1-Sta56可能诱导的细胞免疫现象。结果pVAX1-Sta56连有正确读码框架的Sta56全长基因。转染有pVAX1-Sta56的Hela细胞培养上清可检测到被兔抗恙虫病东方体Karp株抗血清识别的特异条带。转染有pVAX1-Sta56的L929细胞内恙虫病东方体数目显著少于转染pVAX1的L929细胞(P<0.01)。结论成功构建能够表达Sta56表膜蛋白抗原的核酸疫苗载体pVAX1-Sta56,并能诱导产生细胞免疫功能。     

ERIK, a low-frequency red cell antigen of the MNS blood group system associated with Sta

Summary. A new low-frequency red cell antigen, ERIK (MNS37), is associated with the St^a antigen of the MNS system. Four ERIK + propositi have been identified: all are St(a+). Thirteen other St(a+) samples, including one of the M^z type, and over 200 St(a-) samples were ERIK-. In two of the propositi ERIK is associated with an abnormal trypsin-resistant M antigen; in the others it is associated with N, which is shown to be expressed weakly in one family. Immunoblotting with an antibody to an epitope common to glycophorin A (GPA) and glycophorin B (GPB) gave identical results with St(a+) EiRIK + and St(a+) ERIK-cells, revealing GPA, GPB, an abnormal structure GPSt^a aggregates of these components. In the propositi with trypsin-resistant M, GPSt^acarries the unusual M antigen, whereas in the M - N + ERIK+ individual analysed by immunoblotting GPSt^a carries N. Immunoblotting with anti-St^a anti-ERIK showed that St^a is located on GPSt^a but that ERIK is located on GPA, presumably the GPA molecule encoded by the GYPA gene contiguous to the gene encoding GPSt^a.     

Holter ECG study of the electrocardiographic phenomena in Prinzmetal angina attacks with emphasis on the study of ventricular arrhythmias

The ECG phenomena in 20 outpatients (121 episodes) suffering from variant angina with transient ST segment elevation greater than 1.5 mm. (Prinzmetal angina) were studied by Holter monitoring. The most important changes in the ECG morphology were: a) increased height of the R wave in all cases, b) the S wave decreased or disappeared, c) the ST segment elevation varied from 1.5 to 38 mm, d) the TQ interval was ascending in 78 episodes, e) there was a double alternance of ST-TQ in 20 episodes and f) the first modification of the ECG was an increase of the T wave height. Arrhythmias were seen in 19 patients (44 episodes). The most frequent were premature ventricular contractions. The prevalence and importance of the ventricular arrhythmias were statistically related to the duration of the episodes (p less than 0.005), the degree of the ST segment elevation (p less than 0.005), the presence of ST-TQ alternance (p less than 0.005) and the presence of increased R wave greater than 25% (p less than 0.025).     

恙虫病东方体山东分离株Sta56基因全序列扩增及酶切分析

目的明确山东恙虫病东方体（Ot）分离株Sta56基因全序列与其他已知的序列之间的遗传变异关系。方法对从山东省费县恙虫病患者、黑线姬鼠、小盾纤恙螨体内分离的3株Ot分离株Sta56基因全序列进行聚合酶链反应（PCR）扩增；选取4种内切酶HinfⅠ、HhaⅠ、HaeⅢ、PstⅠ对PCR扩增产物进行限制性片段长度多态性分析（RFLP）；对代表株XDM2株Sta56基因全序列测序，运用Clustal X（5、0）和PHYLIP软件对测得的序列与GenBank中已知的Ot序列构建系统发育树，进行比较分析。结果患者分离株B-16、黑线姬鼠分离株FXS2和小盾纤恙螨分离株XDM2均扩增出接近1．6kbp的目的条带。Ot山东分离株PCR扩增产物经HhaⅠ、HinfⅠ、HaeⅢ、RstⅠ酶切后图谱一致，但与国际参考株Gilliam、Karp、Kato株的RFLP图谱均不相同；虽与日本地方株Kawasaki株的酶切图谱有相似之处，但存在酶切位点的突变。序列同源性分析结果显示，山东地区代表株XDM2株Sta56基因全序列与Kawasaki型相应的序列同源性最高，为97％，氨基酸序列同源性为92％。结论经Sta56基因全序列分析，仇山东分离株基因型虽与日本Kawasaki型相似，但也存在差异。     

合肥市中学生危害健康行为因素结构及其人口统计学特征

目的 分析中学生危害健康行为项目的因素结构，描述主要危害健康行为的人口统计学特征，为分析危害健康行为的影响因素确定协变量提供参考。方法 采用修订的美国疾病控制中心(CDC)青少年危险行为监测问卷(YRBS)，对3127名合肥市城乡中学生进行无记名调查。运用因子分析法分析危害健康行为的因素结构，用X^2检验分析不同人口统计学特征的中学生主要危害健康行为发生率的差异。结果 34项危害健康行为归类为12个因子，分别是性行为、饮酒、吸烟、故意伤害、体像和体形控制，过量饮酒、接触毒品、迷恋上网、非故意伤害、缺乏运动，不健康减肥行为，少食蔬菜水果。每个因子取1项作为主要(代表性)危害健康行为，这些主要危害健康行为发生率在不同性别、年龄、年级、学习成绩、城乡、学校类型、父亲和母亲化程度的中学生中分布差异有显性。结论 我国中学生危害健康行为的因素结构基本符合美国CDC的YRBS危险行为分类思想。在分析危害健康行为的影响因素时，要控制人口统计学变量的混杂作用．     

注射用红花黄色素在果糖注射液中的稳定性考察

目的考察25℃下12h内,注射用红花黄色素与果糖注射液的配伍稳定性。方法采用紫外分光光度法测定注射用红花黄色素与果糖注射液配伍后0～12h内含量变化．同时测定pH并观察其紫外吸收光谱、外观等变化。结果25℃下12h内,注射用红花黄色素与果糖注射液配伍后含量、pH、紫外吸收光谱、外观几乎无变化。结论12h内注射用红花黄色素与果糖注射液配伍基本稳定。