乙肝病毒X基因转基因树鼩模型的建立和病理学研究

目的:探索以精原细胞作为载体建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型的可行性.方法:首先构建带乙肝病毒pcDNA3.1- HBx基因的表达载体;然后以脂质体2000包被之.将此复合物以微量注射器注入8只雄性树鼩之睾丸组织中,1周后重复注射1次.注射后6周,使处理过的雄树鼩与雌性树鼩交配.在仔树鼩出生后1个月,取其肝组织作活检,并以多聚酶链式反应(PCR)对其DNA表达进行鉴定,观察其内是否存在乙肝病毒X基因.结果:处理的8只雄性树鼩中,6只具有生育能力,产仔树鼩11只.其中,1只仔树鼩乙肝病毒X基因阳性(阳性率9.09%).基因测序结果证实为乙肝病毒X基因.病理检查结果显示仔树鼩肝组织的改变包括:肝细胞坏死、慢性炎细胞在汇管区的浸润.结论:以精原干细胞作为载体,建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型是可行的.     

MAPK信号转导通路多基因多重RT-PCR方法的建立

目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法.方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基因序列用Align X进行同源性比较,选取保守区应用primer 5软件设计3对引物,建立Multi RT-PCR检测体系,分别扩增ERK1、JNK1、p38基因,产物长度分别403、309、607 bp;对RT-PCR扩增产物分别切胶回收进行PCR产物测序进一步验证.结果:①应用Multi RT-PCR方法对11例大鼠及11例人肝细胞癌组织进行检测,琼脂糖电泳结果显示各基因产物条带清晰、无引物二聚体产生、无非特异性扩增产物,并对各基因产物片段分别切胶测序得到证实;②对22例肝癌组织检测结果表明在肝癌组织中ERK1、JNK1、p38mRNA阳性率分别为95.83%、100%、100%,且在表达丰度上有明显的变化.结论:所建立的MAPK Multi RT-PCR检测方法具有特异性强、效率高、简单易行、可靠的特点,对MAPK信号转导通路在疾病中的作用研究具有较强的应用价值.     

HBV、HCV、HBV和HCV重叠感染与HCC发生关系的研究

目的:探讨HBV、HCV、HBV和HCV重叠感染及复制与广西HCC发生的关系.方法:在肝癌高发区和低发区分别选择符合全国诊断标准的HCC病人78例作为病例A组(肝癌高发区组)、B组(肝癌低发区组),并分别选择相同乡镇、生活习惯、生活水平、年龄±5岁、同性别的原籍健康人群2组分别78人作为对照组C组(肝癌高发区正常人组)和D组(肝癌低发区正常人组),应用PCR法检测研究对象血清中的HBVDNA、HCVRNA,并对阳性率进行比较.结果:HBVDNA、HCVRNA、HBVDNA HCVRNA阳性率分别为:A组69.2%(54/78)、20.5%(16/78)、16.7%(13/78);B组52.6%(41/78)、6.4%(5/78)、5.1%(4/78);C组18.0%(14/78)、7.7%(6/78)、3.8%(3/78);D组10.3%(8/78)、2.6%(2/78)、1.3%(1/78);其中A组与C组,A组与B组组间的阳性率比较差异均有统计学意义(均P＜0.05),B组与D组中HBVDNA阳性率比较差异也有统计学意义(均P＜0.01).结论:HBV、HCV、HBV和HCV的重叠感染及复制与广西肝癌高发区的肝癌发生有密切关系,其中HBV的感染及复制在肝癌的发生中最为重要,高发区中HCV、HBV和HCV的重叠感染的致癌作用也是不容忽视的.     

临床医学理论课教学改革的初步实践浅析

在临床医学理论课教学中,如何引起同学们对所上内容产生兴趣,在上课过程中能集中精力,强化记忆,上完课后就能掌握老师上课的重点内容,这是所有医学院校老师在教学中所面临的共同重大课题之一。由于临床医学理论课的每个病种内容包括了流行病学、病理生理、病理解剖、生理生化、微生物、免疫学、临床表现,诊断和鉴别诊断、预后、治疗等内容,内容烦杂而枯燥,如果没有好的教学方法,难以吸引同学们的视听,学习的效率就不会提高。在现行的教学实践中,在上理论大课时,结合临床,举典型病例,同时应用丰富多彩的多媒体,可以在很大程度上吸引同学们注意力,也收到了良好的效果。但是,要减轻同学们的学习负担,做到上完大课同学们就能基本掌握所上重点内容,就必须对现行教学方式与方法进行必要的改革。1问题要使同学们熟悉医学科学知识,掌握重点内容,又不至于使同学们学习任务过重,让同学们从沉重的学习中解放出来,选择更多的选修课进行学习,拓宽知识面。临床医学理论课的教学改革重点在哪里?我们在教学过程中通过与同学们谈心和交流,同学们反映,上临床理论课,内容无论巨细,面面具到,重点不突出,不好掌握,不好记忆。同时,由于医学理论知识对大多数年轻的大学生没有吸引力,难以产生...     

基于地理信息系统的一起腺病毒感染暴发疫情的调查处置

目的 分析南宁市武鸣区一起腺病毒感染的流行病学特征和空间分布特点，为预防腺病毒疫情暴发提供科学依据。方法 采用统一的流行病学个案调查表对病例进行一对一调查，使用地理信息系统（GIS）技术对疫情的空间分布和聚集情况进行探究，通过核密度和全局莫兰指数（Moran's I）分析该起疫情的空间流行分布特征。结果 此次疫情共228例儿童感染腺病毒，无重症以及死亡病例。感染者年龄主要为5~9岁，发病时间集中在2019年7月28日-8月4日。临床表现主要为发热、咳嗽、咽部充血与扁桃体肿大。Moran's I Z值为3.76（P<0.05），提示腺病毒感染患者空间分布上具有较强的空间聚集性，核密度分析显示此次疫情感染患儿在全区范围内分布。结论 暑假期间具有较强的人口流动性，应警惕疫情的大范围扩散。家长带儿童到公共场所游玩时，需要加强自身安全意识，养成良好的卫生习惯。使用空间分析能够全面、直观地展现疫情发病的聚集区域，为疫情防控提供科学的参考依据。     

HBeAg阴、阳性慢乙肝患者细胞免疫状态及HBVDNA水平分析

目的 对比HBeAg阴性及HBeAg阳性慢性乙肝患者在细胞免疫状态及HBV DNA水平方面的差别,分析造成这种差别的可能原因.方法 应用流式细胞仪进行T淋巴细胞分类检测、荧光定量PCR测量血清中的HBVDNA.结果 在HBVDNA水平方面,HBeAg阴性慢性乙肝患者均值为(5.13±1.43)Log,显著低于HBeAg阳性组的(6.29±1.70)Log(P＜0.05);在T淋巴细胞分类方面,HBeAg阴性慢性乙肝患者CD8 T显著高于HBeAg阳性患者,分别是:23.25±3.79和20.69±3.30(P＜0.05),总T、CD4 T及CD8 /CD8 比值方面两组无明显差别(P＞0.05).结论 HBeAg阴性慢性乙肝患者HBV DNA水平低于HBeAg阳性患者,可能与HBeAg阴性慢性乙肝患者具有相对较强的细胞免疫状态有关.     

乙型肝炎病毒基因型、YMDD变异与拉米夫定治疗后HBV DNA反弹关系的研究

目的探讨HBV基因型、YMDD变异与拉米夫定抗病毒治疗后HBV DNA反弹的关系。方法应用多引物对巢式PCR法、PCR-序列分析法检测拉米夫定治疗的27例乙型肝炎患者和19例从未用过抗病毒治疗的患者HBV基因型和P区（YMDD）的突变位点。结果在27例HBV DNA反弹的患者中，13例（48．15％）检出YMDD变异，而对照人群无YMDD变异（P〈0．05）。YMDD变异的位点为rtM204V／I（C区）±rtL180M（B区）；在治疗组YMDD变异的患者中，B、C基因型构成比（46．15％和59．26％）与对照组（53．85％和68．42％）比较无显著性差异（P〉0．05）。结论YMDD变异是拉米夫定治疗后出现耐药导致HBV DNA反弹的主要原因；YMDD变异的常见位点依然为rtM204V／I（C区）±rtL180M（B区）；YMDD变异在B、C基因型病人中无差别。     

一种新型凝胶剂的研制

凝胶剂是近年来兴起的一种药物新剂型，本文阐述了国内外凝胶剂的研究状况，并介绍了一种新型双柏凝胶剂，介绍了其技术原理和优势。     

影响拉米夫定抗乙型肝炎病毒疗效的因素分析

目的 探讨影响拉米夫定抗乙型肝炎病毒(HBV)疗效的相关因素.方法 采用前瞻性和回顾性相结合的方法收集资料,53例患者均口服拉米夫定100mg/d治疗至少12个月,停药观察至少6个月.结果 疗程超过1年的患者在治疗期间的病毒学应答情况与性别、年龄、疗程、HBV基因型以及治疗前的ALT、HBV DNA水平无关,停药6个月后的持续应答情况与上述因素中的HBV基因型及ALT、HBV DNA水平有关.结论 HBV基因型与ALT、HBV DNA均是慢性HBV感染患者重要的抗病毒治疗应答因素.     

TTV与HBV、HCV的重叠感染与HCC家庭聚集性的关系研究

目的:探讨广西肝癌高发区输血传播病毒(TTV)与乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)的重叠感染在原发性肝细胞癌(HCC)家庭聚集性中的作用.方法:分别采用巢式PCR和RT-PCR技术对研究对象外周血清中TTVDNA、HBVDNA和HCVRNA进行检测,应用χ2检验进行统计学分析.结果:HCC高发家庭成员组及无癌家庭成员组中TTVDNA、HBV DNA、HCVRNA阳性率分别为35.4%(46/130)、29.2%(38/130)、10.0%(13/130)和 24.6%(32/130)、10.8%(14/130)、3.8%(5/130),两组间TTVDNA、HBVDNA、HCVRNA阳性率差异有统计学意义(χ2=4.12、P=0.04、RR=1.81、95%CI=1.018～3.219;χ2=14.97、P=0.000 1、RR=3.765、95%CI=1.88～7.54;χ2=3.91、P=0.048、RR=2.84、95%CI=0.972～8.29).两组TTV与HBV、HCV重叠感染率分别为7.7%(10/130)、3.8%(5/130)和1.5%(2/130)、1.5%(2/130),TTVDNA HBVDNA感染率在两组间差异有统计学意义(χ2= 5.591 4、P=0.018 0、RR=5.33、95%CI=1.15～24.84);而TTVDNA HCVRNA阳性率在两组间差异无统计学意义(χ2=1.321 3、P=0.250 4、RR=2.56、95%CI=0.49～13.44).结论:TTV、HBV、HCV感染以及TTV和HBV的重叠感染与广西HCC家庭聚集性存在一定的相关关系,但 TTV和HBV重叠感染在致肝癌上无明显协同作用.