QuEChERS结合GC-MS/MS-内标法测定川麦冬中多效唑残留量

目的:建立测定川麦冬中多效唑残留量的方法,并用于检验不同来源的川麦冬药材质量。方法:收集50批不同产地、市场和企业来源的川麦冬样品,样品前处理方法为QuEChERS法,即样品加水经乙腈提取,以QuEChERS提取包(含无水硫酸镁与无水乙酸钠等)进行盐析,提取液再经QuEChERS净化包(含无水硫酸镁、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶、硅胶、石墨化炭黑)净化后加入内标磷酸三苯酯,采用气相色谱-质谱/质谱联用(GC-MS/MS)法测定川麦冬样品中多效唑残留量。色谱柱为DB-5MS,程序升温,检测器为三重四级杆质谱,载气初始流速为1.3 mL/min,采集方式为多反应监测,不分流进样。结果:多效唑检测质量浓度线性范围为1.01～505 ng/mL(r=0.999 7),精密度试验、稳定性试验(24 h)、重复性试验的RSD分别为3.94%、13.62%、7.54%(n=6),方法回收率平均值为111.26%(RSD=5.43%,n=9);在50批样品中的多效唑检测结果为0.02～2.72 mg/kg。结论:建立的多效唑检测方法操作简便、结果准确、灵敏度及重复性好,可用于川麦冬中多效唑残留量的检测;不同来源的川麦冬样品中多效唑残留量相差较大。     

杜仲炮制工艺对其质量的影响及化学成分与药理研究进展

杜仲是一种传统中药材,中医常以生品和盐制品入药,入肝、肾经,起到补肝肾,强筋骨的作用。笔者在文献考证的基础上,论述了杜仲的炮制方法、工艺对质量的影响,以及所含的化学成分与药理作用的最新研究进展,为杜仲饮片的规范化、标准化研究奠定基础。     

脑心通胶囊对苯巴比妥成瘾大鼠脑细胞损伤的保护作用

目的 探讨脑心通胶囊对苯巴比妥成瘾大鼠的脑细胞损伤的保护作用并初步探讨其机制.方法 用递增剂量的苯巴比妥诱导建立成瘾大鼠模型,并用脑心通胶囊进行干预,通过戒断症状评分、脑切片HE染色和免疫组化染色的方法探讨脑心通胶囊对苯巴比妥成瘾大鼠脑细胞损伤的保护作用及机制.结果 苯巴比妥成瘾大鼠戒断症状评分较高,脑细胞受损伤而形态改变,脑额叶凋亡细胞数增多;用脑心通胶囊干预可以降低大鼠戒断症状评分,保护脑细胞形态完整,减少脑细胞凋亡,且脑心通胶囊对凋亡相关因子Bcl-2和Bax表达调控呈现浓度相关性.结论 脑心通胶囊可以一定程度减轻苯巴比妥成瘾的戒断症状,保护脑细胞,其机制可能与凋亡调控因子Bcl-2和Bax有关.     

当归药材补血活性的定量测定

当归为常用的补血药,以阿魏酸等已知化学成分为指标难以有效评价其质量.为此,根据生物检定的原理,建立了定量测定当归药材补血活性的生物检测方法.当归药材依次用乙醇和水提取,以合并后的总提物为供试品进行小鼠补血活性试验;用环磷酰胺和盐酸苯肼联合建立小鼠血虚模型;以红细胞数为补血活性的评价指标,用环孢菌素A标定当归的补血活性.再根据量反应平行线(3 ·3')法计算供试品的补血活性.结果表明,环孢菌素A和当归总提物补血活性的可靠性检验结果成立;与模型组相比,当归总提取物具有显著的补血活性(P＜0.05).环孢菌素A在给药剂量0.035 ～0.56 g· kg-1与红细胞数增加值呈良好的线性关系(r=0.998 4,n=5).供试品补血活性重复测定的RSD为6.15％(n=6),可信限率为26.68％ (n=6).5份从甘肃、四川、云南收集的当归药材样品的性状特征不同,其补血活性也不同(21.95 ～44.16 U·g-1).表明建立的方法可准确测定当归药材的补血活性,评价其质量.     

HPLC同时测定麦冬中5个皂苷成分的含量

建立测定麦冬药材中麦冬皂苷D,麦冬皂苷D', ophiopojaponin C,去乙酰基ophiopojaponin A, 3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-葡萄糖麦冬苷元5种成分的HPLC方法。采用HPLC-ELSD方法,色谱柱为Kromasil 100-5C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B)溶液,梯度洗脱0~45 min,35%~55%A,体积流量1.0 mL·min^-1;柱温35℃,漂移管温度100℃,气体流速3.0 L·min^-1;进样量15μL。结果表明5种成分均达到基线分离,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r>0.999);回收率在95.75%~103.1%。建立的麦冬皂苷含量测定方法准确灵敏、重复性好,可应用于麦冬药材质量评价中。     

QuEChERS法结合气相色谱-串联质谱法测定贝母类中药中53种农药残留

目的建立基于QuEChERS法结合气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)对贝母类中药中53种农药残留量的快速检测方法,并应用于193批样品筛查。方法根据调研选择禁限用及常用农药作为检测指标。采用QuEChERS法对样品进行前处理,在气相色谱-串联质谱多反应监测(MRM)模式下进行测定,以3个添加水平测定样品的回收率和RSD。结果 53种农药在一定含量范围内线性关系良好,r均大于0.997 8;在1倍LOD(Limit of Detection)、2倍LOD、10倍LOD 3个添加浓度水平进行回收率试验中,86.8%的农药在60%～140%,RSD均小于15%;各农药检出限均小于0.01 mg/kg。193批贝母类中药种共检出14种农药,91批样品有检出,检出率为47.2%,仅有1批超出即将执行的《中国药典》2020年版限度规定。结论该方法检测指标具有一定针对性,且操作简便快速、灵敏可靠,适用于贝母类中药中农药残留的筛查测定。对于贝母类中药的生产种植和流通监管具有一定的参考意义。     

复方桔梗止咳片的质量标准研究

目的:建立复方桔梗止咳片的质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)对复方桔梗止咳片中桔梗、远志、甘草进行定性鉴别;采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测法测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷D的含量。色谱柱为Agilent C18,流动相为乙腈-水(26∶74,V/V),流速为1.0 m L/min,检测器为蒸发光散射检测器,漂移管温度为105℃,载气流速为3.0 L/min,柱温为35℃。结果:桔梗、远志、甘草的TLC图谱中斑点清晰,分离度好,阴性对照未见相同斑点。桔梗皂苷D的进样量线性范围为0.421 9～5.062 8μg(r=0.999 9);定量限、检测限分别为0.364、0.109μg;精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于3.0%;加样回收率为87.32%～91.96%(RSD=1.73%,n=6)。178批样品中,桔梗皂苷D的含量为0.004～0.73 mg/片,有55批(30.9%)样品中桔梗皂苷D含量低于本研究拟定的含量限度(0.10 mg/片)。结论:所建质量标准方法准确、可靠,可用于复方桔梗止咳片的质量控制。     

16S rDNA序列分析法在注射剂微生物污染鉴定及溯源分析中的应用

目的 对一次注射剂无菌检查阳性结果进行溯源。方法 采用16S rDNA序列分析法对污染菌A1和污染调查中采集的16株葡萄球菌进行鉴定和同源性分析,并将分析结果用脉冲场凝胶电泳进行验证。结果 A1的鉴定结果为科氏葡萄球菌;科氏葡萄球菌科氏亚种菌株的核糖体16S亚基序列完全相同;结合PFGE分析显示A1来自无菌检查使用的隔离器污染。结论 制药企业可以使用16S rDNA序列分析法进行生产和检验中污染菌的鉴定和溯源,但对于与如科氏葡萄球菌科氏亚种一样核糖体16S亚基序列完全相同的菌株,需要结合其他同源性分析方法进行最终的判定。