原发性脑瘤的分子遗传学研究进展

［摘要］ 原发性脑瘤是发生于神经系统常见的疾病，高度恶性的胶质瘤占原发性脑瘤的40%，主要分为I型胶质母细胞瘤（继发性胶质母细胞瘤）和II型胶质母细胞瘤（原发性胶质母细胞瘤），二者的产生有着不同的遗传学改变。I型胶质母细胞瘤的产生途径是从一种恶性程度较低的星形细胞瘤（II级，主要为p53基因突变和血小板来源的生长因子/受体过表达）至恶性的间变型星型细胞瘤（III级，主要为Rb基因突变，CDK4基因扩增，9p、11p、13q和19q的等位基因缺失），再到胶质母细胞瘤（IV级，最常见的遗传学改变是7号和20号染色体的获得,10号染色体的丢失以及PTEN和LRRC4基因的缺失，PDGFα及其受体的过表达）的渐进的发展过程；而II型胶质母细胞瘤则是一种没有恶性程度渐进过程的原发性胶质母细胞瘤，表皮生长因子受体基因的扩增是最常见的遗传学改变。     

二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建

目的　应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyldisulfide ,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库 ,以期克隆DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化的相关基因。方法　用DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,提取polyA+ RNA ,反转录合成cDNA ,消化成短片段后分成两组 ,分别与两种不同的接头连接 ,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增 ,将PCR产物与pGEM T线性载体连接 ,转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果　成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病细胞分化的cDNA文库 ,随机挑取消 2 0 0个克隆制备质粒并酶切分析 ,其中 84 5 %的克隆均具有 1 0 0～ 6 0 0bp左右的插入片段 ,说明每一克隆中均含有特异性的目的片段 ,从而为大批量筛选、克隆DADS诱导人白血病细胞分化的相关未知新基因奠定了基础。结论　DADS能诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,并引起相关的基因发生改变 ,而抑制性消减杂交技术能有效地分离差异表达的基因。     

Rb反义寡核苷酸对人结肠癌细胞凋亡及化疗药敏的影响

目的　观察Rb反义寡核苷酸 (AS ODN)对人结肠癌(HT 2 9)细胞凋亡及化疗药物敏感性的影响。方法　人工合成RbAS ODN经脂质体 (Lip)包裹后作用HT 2 9细胞。采用免疫组化、WesternBlot检测转染前后Rb蛋白表达状况 ,流式细胞术测定HT 2 9细胞转染前后 5 Fu诱导凋亡程度 ,MTT法观察化疗药敏的变化。结果　经RbAS ODN处理的HT 2 9细胞Rb蛋白表达量明显下降 ,RbAS ODN处理的HT 2 9细胞加 5 Fu作用后与对照组比较 ,细胞凋亡率明显下降 ,化疗药物敏感性降低。结论　RbAS ODN阳离子脂质体转染具有抑制化疗药诱导大肠癌HT 2 9细胞凋亡的作用及降低化疗药物敏感性作用。     

鼻咽癌易感/抑瘤基因的功能基因组学研究

鼻咽癌组织在染色体3p,9p,6q,11q,13 q和14q等区域存在较高的等位基因不平衡,表明这些区域存在与鼻咽癌相关的抑瘤基因.采用cDNA代表性差异分析等方法成功获得了候选的鼻咽癌易感/仰瘤基因,并进行了基因功能研究.发现:(1)Cx基因的表达增强是由于肿瘤细胞为突破细胞通讯功能的障碍,试图重建细胞间隙连接的一种表达变异;(2)BRD7基因是一个与细胞周期调控密切相关的核转录调控因子;(3)NAG7基因具有双重生物学功能--在抑制低侵袭能力的HNE1细胞增殖的同时,能够增加HNE1和6-10B细胞的侵袭潜能;(4)NGX6可以与Ezrin发生交互作用,参与鼻咽癌转移;(5)SPLUNC1基因的表达下调是鼻咽癌早期预警的分子诊断标志物.这些易感/抑瘤基因的功能基因组学研究为阐明鼻咽癌的发病机制打下了坚实的理论基础.     

LRRC4通过SDF-1α/CXCR4生物学轴抑制脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力

目的:探讨LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)通过SDF-1 α/CXCR4(stromal cell-derived factor-1 α/CXC receptor 4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响.方法:将LRRC4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实验、侵袭实验、细胞运动试验、划痕标记荧光染料示踪实验,研究SDF-1α干预前后LRRC4对U251细胞迁移能力的影响.结果:将LRRC4基因转入脑胶质瘤细胞U251,通过RT-PCR实验发现CXCR4的表达下调.用CXCR4的特异配体SDF-1α干预后,肿瘤黏附内皮实验、侵袭实验、细胞迁移实验、划痕标记染料示踪实验表明脑胶质瘤细胞迁移能力增强,LRRC4可以抑制细胞的这种侵袭迁移能力.SDF-1 α能够改善细胞间的通讯能力,LRRC4可以进一步增强这种通讯能力.结论:SDF-1 α/CXCR4的相互作用可以增强脑胶质瘤细胞U251的运动迁移能力,LRRC4基因可以通过调控SDF-1α/CXCR4生物学轴有效地抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力.     

miRNA失调控与肿瘤的发生发展

microRNA(miRNA)为长度约19～25个核苷酸的非编码RNA,miRNAs能够识别特定的目标mR-NA并在转录后水平通过促进靶mRNA的降解和/或抑制翻译过程而发挥负调控基因表达的作用[1]。计算机预测表明,每个miRNA有能力调控约200个靶基因,说明人类大约1/3的基因表达受miRNAs的精细调节。它们主要通过调节信号分子(细胞因子、生长因子、转录因子和促凋亡或抗凋亡基因等)的表达参与动植物的生长、发育、分化和代谢[2]。近几年来的研究发现,一些miRNA的特异性调节和     

造血调控的网络化信号传导

信号传导的研究发展至今，已经成为生命科学领域的热点和重点。简单地说，我们把各种信号通过细胞膜进入细胞，逐步引起细胞物质主要是蛋白质变化的过程，称为信号传导。信号传导主要是一个多酶级联反应过程，各条信号通路之间通过细胞间信号蛋白的相互作用……     

二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞体外抑制机制的初步研究

大蒜及其烯丙基硫化物抗肿瘤活性的研究是抗癌药物研究的一个新领域.二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS,C6H10S2)是用来研究大蒜抗癌疗效最适当的一种油溶性烯丙基硫化物[1].目前,有关DADS抑制人肿瘤细胞的报道尚少,本研究拟在探讨DADS对体外培养的人白血病HL-60细胞的抑制作用及其机制,为进一步探讨DADS的抗肿瘤作用提供理论基础.     

小凹-小凹蛋白的生物学特性

Caveolae(小凹 )是细胞质膜表面富含胆固醇的疏水性泡状内陷微区 ,是信号转导的信使中心 ,有利于信号分子间的相互作用。它们广泛存在于各种类型的细胞。Caveolin(小凹蛋白 )是Caveolae的表面标记蛋白 ,是各种信号分子的支架蛋白和负性调节蛋白 ;Caveolin 1是一种候选的肿瘤抑制因子。Caveolae Caveolin在体内参与了许多生物学过程。     

奥沙利铂联合5氟尿嘧啶及亚叶酸钙治疗晚期胃癌的临床观察

目的 观察奥沙利铂(OXA)联合5氟尿嘧啶(5-Fu)及亚叶酸钙(CF)治疗晚期胃癌的近期疗效和不良反应,为临床治疗提供依据.方法 采用FOLFOX4方案治疗:OXA 85 mg/m2,静脉滴注2 h,第1天;CF200 mg/m2静脉滴注2 h,第1、2天;5-Fu 400 mg/m2静脉推注,第1、2天;5-Fu 600 mg/m2持续静脉滴注22 h,第1、2天.每2周1次.每例患者至少进行2个周期的化学治疗,每2个化疗周期进行疗效评价.结果 共观察31例晚期胃癌患者,均可评价疗效及不良反应,其中完全缓解(CR)1例(3.2%),部分缓解(PR)13例(41.9%),稳定(SD)11例(35.5%),进展(PR)6例(19.4%).有效率45.1%,中位生存期为8个月,1年生存率为67.7%.Ⅲ、Ⅳ级不良反应中,中性粒细胞减少6例(19.4%,6/31),胃肠道反应5例(16.1%,5/31);Ⅱ级周围神经感觉异常12.9%(4/31).结论 5-FI+CF+OXA的联合方案治疗晚期胃癌具有良好的疗效和耐受性,并发症轻,值得进一步临床推广.