辛二酰苯胺异羟肟酸对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元以及基质金属蛋白酶9表达与活性的影响

目的探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对鼻咽癌细胞回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基元(reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs,RECK)以及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达与活性的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用0、0.1、1、5μmol/L SAHA处理后,采用蛋白质印迹法(Western blot)和Real-Time PCR(RT-PCR)分别检测RECK,MMP-9蛋白和mRNA表达;MTT法检测CNE-1细胞的增殖。同时采用明胶酶谱实验观察SAHA处理后MMP-9酶活性变化。结果随着SAHA浓度的增加,RECK蛋白和mRNA的表达显著增高(P0.05);随着SAHA浓度的增加,MMP-9蛋白和mRNA的表达显著降低(P0.05);CNE-1细胞随着SAHA浓度的增加,存活率逐渐降低(P0.05)。明胶酶谱实验显示,随着SAHA浓度的增加,MMP-9酶活性逐渐降低。结论 SAHA可能通过上调RECK基因的表达,抑制MMP-9的表达与活性而发挥对CNE-1细胞生长抑制作用。     

儿童髓母细胞瘤亚型的MRI特征

目的探讨分析儿童髓母细胞瘤组织病理学各亚型的MRI表现以及扩散加权成像(DWI)、氢质子磁共振波谱(1H-MRS)的诊断价值。方法回顾性分析经手术病理证实的136例儿童髓母细胞瘤患者,本组中所有患者均在术前行MRI、DWI检查,其中50例同时行1H-MRS检查,比较分析各亚型间的平均ADC值(ADC_(mean))、最小ADC值(ADC_(min))、r ADC及代谢物的差异性。结果 136例中,经典型83例,促结缔组织增生/结节型28例,髓母细胞瘤伴广泛结节型11例,大细胞/间变型14例。常规MRI征象(包括T_1WI平扫和T_2WI平扫表现、强化程度、瘤周水肿、囊变、出血改变、播散等)未见明显差异(P均0.05)。促结缔组织增生/结节型的ADC_(mean)、ADC_(min)、r ADC低于经典型、大细胞/间变型,且大细胞/间变型的ADC_(mean)、ADC_(min)、rADC在各亚型中最高(P均0.05)。髓母细胞瘤伴广泛结节型与经典型、髓母细胞瘤伴广泛结节型与促结缔组织增生/结节型之间的ADC_(mean)、ADC_(min)、r ADC差异无统计学意义(P均0.05)。各亚型的ADC_(mean)、ADC_(min)、r ADC大小为:大细胞/间变型经典型促结缔组织增生/结节型;而髓母细胞瘤伴广泛结节型与经典型、髓母细胞瘤伴广泛结节型与促结缔组织增生/结节型之间无明显差异。1H-MRS显示各亚型的Cho/Cr、NAA/Cr、NAA/Cho、m I/Cr以及Lip出现概率无统计学差异(P均0.05);但Lac出现概率差异具有统计学意义(P0.05),各亚型出现Lac峰的概率为:大细胞/间变型髓母细胞瘤伴广泛结节型经典型促结缔组织增生/结节型。结论儿童髓母细胞瘤各亚型的常规MRI表现、各代谢物比值及Lip峰出现概率无明显差异,但各亚型的ADC_(mean)、ADC_(min)、r ADC值及Lac峰出现情况有一定特征性,其与病理特征密切相关,在髓母细胞瘤各组织学分型的鉴别诊断上具有较高的价值。     

变异型p53蛋白表达对人乳腺癌细胞阿霉素抗药性的 …

目的：探讨变异型Ｐ５３蛋白表达对人乳腺癌细胞阿霉素抗药性的影响。方法应用琼脂培养ＭＴＴ法检测阿霉素（ＡＤＭ）对９例人乳腺癌新鲜标本药物敏感性，用Ｓ－Ｐ免疫组化技术观察变异型Ｐ５３蛋白表达，并用ＩＣＭ－１００细胞ＤＮＡ图像分析系统作半定量分析；同时观察阿霉素对人乳腺癌手术前化疗效。结果（１）９例人乳腺癌新鲜标本中７例变异型Ｐ５３蛋白表辽阳性（阳性率为７７．７７％）。（２）变异型Ｐ５３蛋白表达量（阳性     

CathepsinD与恶性肿瘤的关系

侵袭、转移是恶性肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤侵袭、转移的一个必要条件为肿瘤细胞侵犯并穿过基底膜及细胞外基质所组成的屏障。组织蛋白酶D（CathepsinD）是一种天冬氨酸溶酶体蛋白水解酶,活化的CathepsinD催化降解基底膜和细胞外基质,以利于肿瘤细胞移动并穿过细胞外基质和血管壁进入血液循环,在肿瘤的侵袭、转移中发挥重要作用。     

Rb反义寡核苷酸对人结肠癌细胞凋亡及化疗药敏的影响

目的　观察Rb反义寡核苷酸 (AS ODN)对人结肠癌(HT 2 9)细胞凋亡及化疗药物敏感性的影响。方法　人工合成RbAS ODN经脂质体 (Lip)包裹后作用HT 2 9细胞。采用免疫组化、WesternBlot检测转染前后Rb蛋白表达状况 ,流式细胞术测定HT 2 9细胞转染前后 5 Fu诱导凋亡程度 ,MTT法观察化疗药敏的变化。结果　经RbAS ODN处理的HT 2 9细胞Rb蛋白表达量明显下降 ,RbAS ODN处理的HT 2 9细胞加 5 Fu作用后与对照组比较 ,细胞凋亡率明显下降 ,化疗药物敏感性降低。结论　RbAS ODN阳离子脂质体转染具有抑制化疗药诱导大肠癌HT 2 9细胞凋亡的作用及降低化疗药物敏感性作用。     

二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞G_2/M期的阻滞作用

目的　探讨二烯丙基二硫 (DADS)对人胃癌MGC80 3细胞G2 /M期的阻滞作用及分子机制。方法　体外培养MGC80 3细胞 ,采用MTT比色实验、细胞计数法 ,流式细胞光度术和Westernblot分析DADS对MGC80 3细胞的抑制增殖作用 ,细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白的表达。结果　MTT法显示 ,2 0mg·L-1DADS、30mg·L-1DADS作用MGC80 3细胞 72h后 ,生长抑制率分别达2 5 7%、5 8 6 %。细胞计数法表明常规培养MGC80 3细胞群体倍增时间为 2 9 92h ,30mg·L-1DADS作用MGC80 3细胞后 ,其细胞群体倍增时间延长到 5 5 5 8h。流式细胞仪分析结果显示DADS呈浓度依赖性将MGC80 3细胞阻滞在G2 /M期。 30mg·L-1DADS作用MGC80 3细胞 36h ,与对照组相比 ,可使G2 /M期细胞增加到 4倍多。Westernblot分析表明在G2 /M期阻滞同时有Cdc2 5C蛋白表达下降 ,但CDK1蛋白表达不受DADS作用的影响。结论　DADS对MGC80 3细胞的抑制增殖作用与G2 /M期阻滞有关 ,DADS对MGC80 3细胞G2 /M期阻滞的分子机制可能与降低Cdc2 5C蛋白水平有关     

胃癌染色体7q31.1杂合性缺失的精细作图及其相关基因探讨

目的 显微切割胃癌细胞检测染色体7q31.1区域的杂合性缺失(LOH),绘制胃癌7q31.1区域等位基因缺失图谱,确定其常见最小缺失区域,揭示胃癌细胞的分子遗传学改变,分析7q31.1杂合性缺失与胃癌临床病理特征的关系.方法 在胃癌组织石蜡切片上行显微切割获得胃癌细胞.采用Chelex-100方法分别抽提切割的胃癌细胞和相应正常对照细胞的DNA.利用高密度微卫星标志结合PCR技术,检测胃癌染色体7q31.1杂合性缺失,绘制胃癌染色体7q31.1等位基因的缺失图谱,确定其常见最小缺失区域.结果 胃癌染色体7q31.1至少有一个位点存在杂合性缺失者21例,占70.0%(21/30);D7S2459、D7S523、D7S2502、D7S486、D7S480、D7S650、D7S2486各位点杂合性缺失频率分别为10.0%、6.7%、23.3%、43.3%、26.7%、26.7%、20.0%;缺失图谱分析显示常见最小缺失区域位于D7S2502～D7S480之间.统计学分析表明这一区带微卫星位点的等位基因缺失阳性率与患者年龄、性别、原发灶位置、病理分期、分化程度以及淋巴结转移不相关(P>0.05).结论 胃癌染色体7q31.1常见最小缺失区域在D7S2502～D7S480之间,在D7S486附近可能存在与胃癌相关的抑癌基因.     

应用激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌蛋白质表达谱的建立

目的：建立鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究奠定基础。方法：应用激光捕获显微切割（laser capture microdissection,LCM）技术从NPC组织纯化NPC细胞,应用二维凝胶电泳（2-DE）分离LCM 纯化NPC细胞的蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质,利用生物信息学资源构建NPC的2-DE蛋白质组数据库。 结果：建立了NPC蛋白质2-DE参考图谱,2-DE图谱共显示（1 312±30）个蛋白质点,共鉴定了427个蛋白质点,包括241个非冗余蛋白质,并构建了NPC的2-DE蛋白质组数据库,这些数据可从本实验室网站(http://www.xyproteomics.org)上进行查询。结论：首次建立了LCM纯化NPC细胞2-DE蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究提供了重要的信息和资料。     

细胞骨架在肿瘤侵袭转移中的研究进展*

肿瘤转移是肿瘤导致死亡最主要的原因之一,细胞骨架与肿瘤的侵袭转移密切相关,但细胞骨架各组分在肿瘤侵袭转移中作用的研究均较独立、分散,且随着细胞骨架相关研究的不断深入,微管在肿瘤转移中的重要性开始凸显,微管关键相互作用蛋白和微丝细胞骨架间的交互作用也越来越受到关注,这可能给转移性肿瘤的治疗带来新的思路。本文就细胞骨架的结构功能、重要信号通路、新进展及相关抗肿瘤药物研究进行综述,并探讨细胞骨架蛋白相互间的联系以及细胞骨架相关的潜在抗肿瘤药物新思路。