雌激素受体基因ERβ调控小鼠脊柱线性生长

目的 初步研究ERβ在青春期脊柱线性生长中的调控作用.方法 取相当于人青春前期的5周龄昆明小鼠36只,其中18只雌性小鼠,18只雄性小鼠.应用随机数字表进行随机分组,将雌雄小鼠各分为3组,分别为ERβ RNAi组、空白对照组和阴性对照组.通过尾静脉注射转染ERβ RNAi逆转录病毒载体和阴性对照组逆转录病毒载体,进行基因沉默的在体实验.各组小鼠均在相同条件下分笼喂养.分别于在体动物实验的当天、2周、4周和6周时测量各组小鼠身长、体重.于第6周时麻醉下处死小鼠,测量各组小鼠第一腰椎高度.应用SPSS16.0软件统计分析各组间差异的显著性.结果 在雌性小鼠组中,ERβ RNAi组小鼠身长在第2次和第3次测量时的增加值明显高于空白对照组和阴性对照组;ERβRNAi组小鼠体重增加值小于空白对照组和阴性对照组;ERβ RNAi组小鼠身长/体重比在第2次和第3次测量时的增加值明显大于空白对照组和阴性对照组;差异有统计学意义(P＜0.05);6周后测量ERβ RNAi组小鼠第1腰椎高度明显大于阴性对照组和空白对照组(P＜0.0).而在雄性小鼠中,以上各检测指示均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ERβ基因沉默后,促进雌性小鼠脊柱生长.据此可以反向推断,雌激素与ERβ特异性结合,抑制雌性脊柱生长.     

ERβ通过调控OPG/RANK/RANKL信号通路调控小鼠成骨细胞的成骨能力

目的 在细胞水平上,用RNA干扰(RNAi)技术研究雌激素受体β(ERβ)对OPG/RANK/RANKL信号通路的调控,及其调控小鼠成骨细胞的成骨能力.方法 取的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为对象,设立3组,其中2个组分别转染重组ERβ RNAi载体和阴性对照ERLRNAi载体,第3组为空白对照组.3组在相同条件下培养.然后,检测ERβ基因沉默后小鼠成骨细胞中骨保护素(OPG)、核因子κB配体的受体激活子(RANKL)表达的变化、各组成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性和各组成骨细胞形成钙结节的差异.用SPSS 16.0软件统计分析.结果 RNAi组OPG的Ct值较空白对照组和阴性干扰组小,基因表达增强;RNAi组RANKL的Ct值较其它两组大,基因表达降低;RNAi组的ALP活性较其它两组高.均有显著性差异,P＜0.05.RNAi组成骨结节较空白对照组和阴性干扰组的数量较多,体积较大.结论 根据ERβ沉默后的结果,可以反向推断,雌激素与ERβ结合,增强ERβ表达,降低OPG的合成和表达,增加RANKL的合成和表达,减少ALP的分泌,进而抑制新骨的生成.     

雌激素受体基因ERβ与小鼠成骨细胞的增殖和分化

背景：雌激素受体ERs表达于所有关系到骨形成和骨吸收的细胞成分中。 目的：观察雌激素受体ERβ对成骨细胞增殖、分化能力的调控作用。 方法：以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为对象,设立3组：实验组转染雌激素受体ERβ RNAi载体、阴性对照组转染ERL RNAi载体、空白对照组不进行转染,3组在相同条件下培养。采用MTT法绘制各组细胞的生长曲线;流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期。 结果与结论：实验组成骨细胞的增殖能力明显高于空白对照组和阴性对照组,G1期细胞百分率明显少于空白对照组和阴性对照组,而S期和G2期细胞百分率明显高于空白对照组和阴性对照组(P均< 0.05)。根据雌激素受体ERβ沉默后检测的结果可以反向推断,ERβ的表达对成骨细胞的增殖、分化具有抑制作用。     

雌激素受体基因ERβ与小鼠成骨细胞的增殖和分化

背景:雌激素受体ERs表达于所有关系到骨形成和骨吸收的细胞成分中。目的:观察雌激素受体ERβ对成骨细胞增殖、分化能力的调控作用。方法:以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为对象,设立3组:实验组转染雌激素受体ERβ RNAi载体、阴性对照组转染ERL RNAi载体、空白对照组不进行转染,3组在相同条件下培养。采用MTT法绘制各组细胞的生长曲线;流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期。结果与结论:实验组成骨细胞的增殖能力明显高于空白对照组和阴性对照组,G1期细胞百分率明显少于空白对照组和阴性对照组,而S期和G2期细胞百分率明显高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05)。根据雌激素受体ERβ沉默后检测的结果可以反向推断,ERβ的表达对成骨细胞的增殖、分化具有抑制作用。     

人同种异体骨载异烟肼-壳聚糖缓释微球的制备和体内外释药特性

背景:壳聚糖微球具有良好的生物相容性及抗菌活性,被广泛地运用于各种药物缓释系统中。目的:制备人同种异体骨载异烟肼-壳聚糖微球,并分析其体内释药性能。方法:用喷雾干燥法制备异烟肼-壳聚糖微球,进行体外45d的药物释放实验。将单独装载异烟肼的异体骨块(对照组)和装载异烟肼-壳聚糖微球的异体骨块(实验组)分别植入家兔两侧髂骨,采用高效液相色谱法检测药物体内释放情况。结果与结论:异烟肼-壳聚糖微球外观呈圆形、表面光滑、分散良好;平均粒径(3.33±0.9)μm,载药率(16.25±1.24)%。体外药物释放实验显示无突释现象,24h释放20%左右,45d释放76%,释放曲线较平缓,释放稳定;数学模型拟合符合Ritger-Peppas模型。实验组异烟肼浓度在前28d内缓慢升高,其后缓慢下降,持续56d以上,浓度38.50～155.75μg/g;对照组异烟肼浓度在1周左右达高峰,为1982.5μg/g,21d后骨块周围药物不能测到。说明异烟肼-壳聚糖缓释微球在体内外均可以缓慢平稳释放异烟肼,且持续时间长。提示人同种异体骨载异烟肼-壳聚糖缓释微球复合体可以作为骨结核病灶清除后的一种置入材料,在提供机械支持的同时进行长时间的局部化疗。     

无神经症状的脊柱侧凸伴脊髓空洞症患者应否外科处理脊髓空洞的临床研究

[目的]探讨伴脊髓空洞症的脊柱侧凸患者在无神经症状且达到矫形指征时应否于矫形之前对脊髓空洞进行外科处理。[方法]实验组（A组）：回顾总结2001年6月～2006年6月本科采用单纯矫形手术而不外科干预脊髓空洞的方法治疗的15例无神经症状的脊柱侧凸并脊髓空洞症患者，测量术前、术后、随访时的冠状面Cobb＇s角以及脊髓空洞的长度、位置，空洞最大直径及S／C比值；对照组（B组）：随机抽取同一时段同一手术组医生采用相同方法治疗的20例AIS患者，测量术前、术后、随访时的冠状面Cobb＇s角。比较A、B两组病例的冠状面矫形率和丢失率；比较A组术前和随访时脊髓空洞的长度、最大直径、S／C比值。[结果]A、B两组矫形率和丢失率无明显差异（P〉0．05），A组脊髓空洞情况术前与随访时进行比较，空洞直径、S／C比值及脊髓空洞长度较随访时明显变小（P〈0．05）。[结论]（1）无神经症状的脊柱侧凸并脊髓空洞患者，脊髓空洞可自发性的减小、吸收，使侧凸停止或减慢进展，进而使该类病人于矫形术后不会产生过多的矫形丢失。（2）对于无神经症状的脊柱侧凸并脊髓空洞患者，脊髓空洞的存在会让术者在矫形时有所顾忌，但只要方法得当，尽量避免牵拉脊髓，在准备充分的情况下仅行矫形手术而不对脊髓空洞做外科处理，并不会影响矫形的效果。     

医学临床课教学方法的创新与研究

目的提高医学职业教育课堂教学水平,探索医学职业教育最优化的教学方法。方法以2000级和2001级大、中专学生为研究对象,随机分为实验班和对照班,分别采用传统教学法和模拟临床会诊式病例分析教学法,对外科学各论部分进行对比性研究。结果模拟临床会诊式病例分析教学法效果显著,P<0.01。结论模拟临床会诊式病例分析教学法能够增强学生对医学知识的综合、分析、重组、再创新的能力,达到理论和实践的充分结合,使医学临床教学质量迈上一个新台阶。     

Ⅰ期前后路联合手术治疗严重下颈椎骨折脱位

[目的]探讨Ⅰ期前后路联合手术固定在严重下颈椎骨折脱位中的临床疗效和应用价值。[方法]采用颈椎前路钢板和后路侧块钉棒Ⅰ期联合复位内固定技术治疗严重下颈椎骨折脱位27例,手术均在颅骨牵引下经鼻腔气管插管全身麻醉下进行,先采用俯卧位,植入侧块螺钉、减压、复位后,植入棒,运用“弓弦原理”,采用CD旋棒技术恢复颈椎的序列,维持并稍加大颈椎在矢状面上的生理前凸,植骨融合后拆除颅骨牵引置仰卧位,行前路椎体复位、减压、植骨及自锁钛板固定。术后定期复查X线片以观察损伤节段的稳定性和融合率,以Frankel分级判定脊髓功能的恢复情况。[结果]术后27例全部获得随访,随访6~27个月,平均11.6个月。脱位均完全复位,无植骨不融合。损伤节段稳定,颈椎椎间高度及生理曲度都得到良好重建及维持,未出现内固定断裂、松动及脱出,无血管、神经、食道损伤等并发症。除5例A级、2例B级脊髓功能无恢复,Frankel分级无变化外,其余Frankel分级平均提高1.8级,其中5例患者达到E级。[结论]颈椎Ⅰ期前后路联合手术固定治疗严重下颈椎骨折脱位,完全恢复颈椎序列,复位良好,椎管前后方压迫得到彻底解除,损伤节段术后获得即刻稳定,方便术后护理和功能锻炼,有利于脊髓功能恢复,为一积极有效的方法。     

广泛后路松解三维矫形治疗重度特发性脊柱侧凸

目的探讨广泛后路松解三维矫形对重度特发性脊柱侧凸的治疗效果.方法2002年3月至2005年9月我院收治的有完整资料的重度特发性脊柱侧凸患者42例,根据不同手术方法将患者分为两组A组(前路松解后路矫形)20例,男3例,女17例;年龄12～20岁,平均15.5岁;Lenke 1型12例,2型2例,3型3例,5型3例.B组(后路脊柱松解三维矫形)22例,男3例,女19例;年龄12～26岁,平均15岁;Lenke 1型13例,2型2例,3型4例,5型3例.比较两组间手术前、后及末次随访时Cobb角、手术时间、术中出血量、住院费用和SRS-22评分的差异.结果A组主弯Cobb角由83.6°±7.6°矫正到21.4°±5.4°,矫正率为72.4%±5.1%;B组由85.4°±11.5°矫正到22.0°±5.4°,矫正率为74.1%±5.2%,两组间比较无统计学差异(P＞0.05).A组的手术时间、术中出血量、住院费用及SRS-22评分分别为303.9+28.9min、1379.5±236.8ml、92246.5±9784.9(￥)及17.4+0.24分;B组分别为241.0±20.8min、965.5±193.1ml、77725.1±8917.8(￥)及19.65±0.20分,两组间差异有显著性(P＜0.05).两组均无曲轴现象、假关节形成及失代偿发生.结论广泛后路脊柱松解三维矫形对重度特发性脊柱侧凸的矫正效果满意,具有手术风险小、手术时间短、出血量少、住院费用相对低等优点.     

单纯经后路病灶清除联合异形钛网植骨融合治疗成人腰椎结核

目的探讨单纯经后路途径病灶清除联合异形钛网植骨融合和椎弓根钉棒系统内固定治疗成人腰椎结核的临床疗效。方法回顾性研究自2010年1月至2011年5月湘雅医院脊柱外科收治的腰椎结核病例,满足纳入条件者23例,均采用单纯后路途径病灶清除联合异形钛网植骨融合椎弓根钉棒系统内固定治疗,术前及术后采用规范抗结核药物。分别于术前、术后14d、1年随访和末次随访时检测红细胞沉降率（ESR）、病变节段Cobb’s角、Oswestry功能障碍指数（ODD,术后1年和末次随访时采用Bridwell分级评价植骨融合情况,同时评价临床疗效。结果所有患者均安全度过围手术期,平均手术时间为（198±52）min,平均失血量为（388±42）mL。ESR、病变节段Cobb’s角、ODI评分术前分别为57±16、6．5°±3．1°和39．1±12．4,末次随访时分别改善为11±3、3．5°±0．7°和6．8±2．5。术后1年和末次随访时Bridwell Ⅰ和Ⅱ级融合率分别为87％和96％。术后1年和末次随访时临床疗效评价优良率分别为91％和96％。本研究中无螺钉松动、断钉或断棒等发生。至末次随访时未发生手术及药物相关并发症。患者结核中毒症状、腰背痛等消失,伤口愈合可,无慢性感染或窦道形成,无复发者。结论单纯经后路途径可以满足成人腰椎结核手术时病灶清除、脊髓减压、畸形矫正和脊柱270°植骨融合的目的。异形钛网植骨量充足,椎问融合率高,椎间支撑力强,是一种安全有效的治疗方法。