膜表达热休克蛋白70真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞的转染

目的构建普遍适合性的膜表达热休克蛋白70(HSP70)的真核表达载体,修饰并建立HSP 70表达并结合在细胞膜表面的肿瘤细胞.方法RT-PCR法从人胚肾中获取HSP 70的cDNA,扩增成带酶切位点的目的基因.选择载体pDisplay,将目的基因插入载体多克隆酶位点中.DNA测序证实后,以脂质体转染的方法,将载体转染到黑色素瘤细胞.用G418抗性筛选获得阳性克隆.结果酶切电泳和DNA测序证实载体构建正确;目的基因的上游带信号肽序列,下游带跨膜序列.RT-PCR产物电泳、Westem Blotting、激光共聚焦显微镜和流式细胞术证实大量HSP 70表达并结合在转染的黑色素瘤细胞膜表面.结论成功地构建了膜表达HSP 70的真核表达载体;转染到黑色素瘤细胞后,细胞膜表面表达丰富的HSP70.转染细胞可以进一步制备新型瘤苗.     

重组腺病毒载体mIL-12治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

目的： 观察重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤的治疗效应.方法： 皮下注射B16黑色素瘤细胞给C57BL/6小鼠建立荷瘤模型.于瘤内注射重组腺病毒载体AdmIL-12治疗, 观察皮下肿瘤的生长及荷瘤小鼠的存活期.采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结果： 重组腺病毒载体AdmIL-12治疗后, 能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长, 明显延长荷瘤小鼠的存活时间, 增强荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结论： 重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤有显著的治疗效应.     

经典名方中杜仲的本草考证

通过查阅历代本草、医籍、方书并结合近现代文献资料,笔者对杜仲药材的名称、基原、产地、品质评价、采收加工、炮制历史沿革及产地变迁情况进行了系统梳理及考证,以期为含杜仲的经典名方开发提供参考依据。经考证可知,历代本草均以杜仲为正名,基原为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides的干燥树皮,古今一致;杜仲最早的产地为河南、山西、陕西、四川一带,自明代以来产地扩展至全国大部分地区,且推崇四川、陕西、重庆、贵州、湖北等地为杜仲的道地产区;近代以来总结其品质以皮厚、块大、粗皮刮净、断面多丝、内表面色暗紫为佳;杜仲的古代炮制加工方法主要有去粗皮切制生用和加酥蜜、姜汁、盐水、酒等辅料炮制,近现代以来炮制方法日趋简化,沿用的炮制方法主要为净制后切制生用、盐炙,建议挖掘不同杜仲炮制品的现代科学内涵,通过标准恢复传统主流炮制方法。基于宋代陈自明的三痹汤中杜仲“去皮,切,姜汁炒”的要求,根据考证结果,建议使用姜杜仲,即参考2020年版《中华人民共和国药典》炒法,以姜汁为辅料进行炮制后入药。     

音乐护理的功效及其临床应用

音乐是一种乐音运动的形式．而治疗和护理则是以特定的方法缓解病痛．促进患者恢复健康。近年来．随着整体护理的开展和多元文化护理概念的不断深入人心．音乐疗法作为一极有前途的新型心身护理方法在临床的应用亦愈来愈广泛。     

发光二极管光固化灯和普通卤光灯对离体牙树脂固化微渗漏影响的研究

目的探讨牙科发光二极管光固化灯对离体牙备洞树脂充填固化后的边缘微渗漏的影响。方法离体磨牙73颗．随机分为实验组（MORITA^TM PENCURE，38颗牙）和对照组（3M^TM ESPE^TM Elipar^TM 2500，35颗牙），制备标准V类洞，隔湿、消毒，干燥后用可乐丽菲露AP-X复合树脂充填，用上述两种光源的固化灯固化，打磨抛光。经冷热循环处理后进行染色、剖开，用体视显微镜定量和扫描电镜定性观察并拍照。结果体视显微镜下实验组和对照组中没有产生微渗漏的牙齿均占大多数，而重度微渗漏均极少，两者均有较好的边缘封闭效果，差异无统计学意义，扫描电镜提示实验组边缘密合度要好于对照组。结论发光二极管光固化灯和普通卤光灯一样，都可以较好地固化可乐丽菲露AP-X复合树脂，而发光二极管光固化灯可能有更好的降低微渗漏的能力。     

卒中后肩痛周围神经电生理学研究

目的 通过对卒中后肩痛患者上肢进行神经传导速度检查及针极肌电图检查，观察卒中后肩痛患者周围神经电生理指标的变化。方法 选择符合入选标准的卒中住院患者40例，根据数字疼痛评分法（Numerical Pain Rating Scale，NPRS）分为肩痛组（26例）与无肩痛组（14例）。分别进行双侧上肢神经传导速度检查和针极肌电图（electromyography，EMG）检查。结果 肩痛组患侧腋神经、肌皮神经、正中神经复合肌肉动作电位（compound muscle action potential，CMAP）波幅较无肩痛组患侧降低，差异有显著性（P=0.000，0.001，0.000）；无肩痛组患侧尺神经CMAP波幅较同组健侧降低，差异有显著性（P=0.000）；肩痛组患侧尺神经感觉神经动作电位（sensory nerve action potential，SNAP）波幅较无肩痛组患侧降低，差异有显著性（P=0.000）。三角肌、肱二头肌自发电位出现率，肩痛组较无肩痛组增高，差异具有显著性（P=0.044，0.044）。结论 卒中后肩痛患者伴有上肢周围神经的损伤，且肩痛的发生可能与运动神经损伤有关。     

树突状细胞分化发育及功能的表观遗传学调控机制的研究进展

树突状细胞（DCs）是体内功能最强的专职抗原提呈细胞，具有摄取、加工、处理和呈递抗原以及激活初始T淋巴细胞的功能。近年来研究发现，DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、基因组印记以及非编码RNA等表观遗传学修饰能调控相关基因的表达，同时树突状细胞的分化发育及功能也受到表观遗传学调控。研究从DNA甲基化修饰、组蛋白修饰和非编码RNA，了解近年来很有必要树突状细胞的分化发育及功能的表观遗传学调控机制很有意义。     

Musashi 1在结肠癌中的表达及其与微血管密度及预后的关系

目的:探讨Musashi 1在结肠癌中的表达与肿瘤微血管密度(MVD)及预后的关系。方法:应用实时荧光定量PCR的方法检测36对结肠癌组织及其配对的正常结肠组织中Musashi 1 mRNA的表达情况。通过免疫组化法对96例结肠癌组织中Musashi 1表达情况和微血管密度(MVD)进行检测。结合随访术后生存情况,统计分析Musashi 1表达与结肠癌病理参数、预后及MVD之间的相关性。结果:实时荧光定量PCR法结果显示,在结肠癌组织中,Musashi 1 mRNA的相对表达水平显著高于正常结肠组织(P0.05)。免疫组化结果显示,96例结肠癌组织中,有61例(63.5%)高表达Musashi 1。Musashi1的表达与患者性别、肿瘤大小、分化程度无相关性(P0.05),而与肿瘤的浸润深度、Dukes分期、淋巴转移、TNM分期密切相关(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Musashi 1高表达患者的5年生存率显著低于Musashi 1低表达者(23.0%vs60.0%;P0.01),且Musashi 1的表达与结肠癌血管密度相关(P0.01)。结论:结肠癌中Musashi 1的表达较正常癌旁组织高,具有统计学意义。结肠癌中Musashi 1的表达与肿瘤浸润深度、Dukes分期、淋巴转移、TNM分期和血管密度密切相关。Musashi 1蛋白可通过促进瘤内血管增生,从而促进结肠癌的生长和侵袭转移,进一步影响结肠癌患者的预后。     

子宫颈小细胞神经内分泌癌临床病理分析

目的探讨宫颈小细胞神经内分泌癌(small cell neuroendocrine carcinoma of the cervix,SCNEC)的临床病理特征和免疫组化特点。方法对四川省妇幼保健院病理科和四川省人民医院病理科2006年1月至2014年6月诊治的8例宫颈小细胞神经内分泌癌进行组织形态学、免疫组化观察,并对其临床资料进行整理分析。结果 8例患者平均年龄45.6岁,均以阴道不规则出血或宫颈接触性出血就诊。组织学显示肿瘤由大小较为一致的圆形、卵圆形细胞构成。其中单纯性小细胞神经内分泌癌7例,合并腺癌成分1例。免疫组化:所有病例癌细胞细胞角蛋白(CK)不同程度阳性,且均有两种以上神经内分泌标记阳性,其中6例突触素(Syn)和嗜铬素(Cg A)均阳性,4例神经细胞黏附分子(CD56)阳性。随访7例患者,死亡3例。结论宫颈小细胞癌作为一种少见的高度恶性肿瘤,进展快,预后差,免疫组化神经内分泌标志阳性有助于诊断。     

microRNA-21在2型糖尿病伴冠心病患者中的表达及作用

目的分析2型糖尿病伴有冠心病患者血浆中microRNA-21的表达水平。方法选取德清县人民医院内分泌科2018年1月至12月收治的2型糖尿病伴有冠心病患者(糖尿病伴冠心病组)20例、2型糖尿病不伴有冠心病患者(糖尿病组)20例及正常体检者(正常组)20例,对所参加者静脉采血,提取血浆中总RNA,通过荧光定量PCR技术检测microRNA-21的表达水平,同时检测血浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),ELISA法检测血浆中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平。结果糖尿病伴冠心病组比糖尿病组和正常组的血浆中microRNA-21的表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);与糖尿病组和正常组相比,糖尿病伴冠心病组的SOD下降,MDA升高,HIF-1α的表达也明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论microRNA-21在糖尿病伴有冠心病患者血浆中表达明显上调。