大麻素受体-1拮抗剂抑制炎性痛大鼠的吗啡耐受效应

目的观察吗啡对炎性痛治疗时产生耐受效应的模型大鼠脊髓背角大麻素受体-1(CB1)蛋白表达变化,探讨CB1受体拮抗剂(AM251)对炎性痛大鼠吗啡耐受效应的干预作用。方法 40只成功行鞘内置管术的成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分入对照组、0.9%氯化钠溶液+完全弗氏佐剂(CFA)组、吗啡+CFA组、吗啡+AM251+CFA组,每组10只。对照组大鼠于右后足底皮下注射0.9%氯化钠溶液100μL,其余3组大鼠于右后足底皮下注射CFA100μL,建立CFA模型。于置管后第8天(CFA模型建立后第4天),对照组和0.9%氯化钠溶液+CFA组予0.9%氯化钠溶液10μL;吗啡+CFA组鞘内予吗啡10μg/10μL;吗啡+AM251+CFA组鞘内联合予吗啡10μg+AM2515nmol,共10μL。连续给药7d。于置管后第15天(CFA模型建立后给药第8天)将大鼠处死。采用热刺激缩足潜伏期(PWTL)评价痛行为学,采用免疫蛋白印迹法测定大鼠L2至L4脊髓背角组织中CB1的表达。结果 0.9%氯化钠溶液+CFA组、吗啡+CFA组和吗啡+AM251+CFA组CFA模型建立后鞘内给药前的PWTL值均较同组CFA模型建立前显著降低(P值均<0.001)。0.9%氯化钠溶液+CFA组CFA模型建立后鞘内给药第1、3、5、7天的PWTL值的差异无统计学意义(P值均>0.05);吗啡+CFA组在CFA模型建立后鞘内给药第1、3、5天的PWTL值显著高于0.9%氯化钠溶液+CFA组同时间点(P值均<0.001),且呈逐渐下降趋势,到CFA模型建立后鞘内给药第7天与0.9%氯化钠溶液+CFA组的差异无统计学意义(P>0.05)。吗啡+AM251+CFA组在CFA模型建立后鞘内给药第1、3、5、7天的PWTL值仍维持在较高水平,但各时间点间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。CFA模型建立后鞘内给药第7天,在吗啡+CFA组大鼠脊髓背角中的CB1相对表达量显著高于对照组同时间点(P<0.001)及0.9%氯化钠溶液+CFA组同时间点(P<0.05)。结论 CB1拮抗剂AM251可抑制吗啡耐受形成。     

不同剂量脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的凋亡机制

目的研究不同剂量脂多糖(LPS)诱导的不同程度急性肺损伤(ALI)的细胞凋亡机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠20只,随机分为4组,每组5只,分别在七氟烷麻醉下经尾静脉注射1 mL 0.9%氯化钠溶液(对照组)或LPS 5、10、20 mg/kg(分别为LPS5组、LPS10组和LPS20组)。6 h后处死大鼠,通过苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织形态学改变,肺组织湿/干比值(W/D值)评估肺组织水肿,脱氧核苷酸末端转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)染色法检测肺组织细胞凋亡,Western印迹法检测肺组织中天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和凋亡诱导因子(AIF)的表达水平。结果光学显微镜下可见对照组大鼠肺组织无明显损伤,LPS5组大鼠肺组织结构轻微破坏,LPS10组和LPS20组大鼠肺组织损伤严重。LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值均显著高于对照组(P值均<0.05),且随着LPS剂量的增加,LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值依次增大,两两比较的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。对照组大鼠肺组织基本未见到凋亡细胞,LPS5组、LPS10组、LPS20组大鼠肺组织的细胞凋亡率均显著高于对照组(P值均<0.05),凋亡细胞以肺泡上皮细胞为主。LPS5组大鼠肺组织中活化Caspase-3的相对表达量显著高于对照组(P<0.05),而LPS10组和LPS20组与对照组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。LPS5组大鼠肺组织中活化AIF的相对表达量较对照组有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),但LPS10组和LPS20组活化AIF的相对表达量均显著高于对照组(P值均<0.05)。结论不同剂量LPS诱导的ALI中,5 mg/kgLPS诱导的较轻的ALI主要激活了Caspase-3凋亡途径,而10和20 mg/kg LPS诱导的较严重的ALI则主要活化AIF凋亡信号,这为ALI的抗凋亡治疗提供了潜在的靶点。     

siRNA干扰立早蛋白ICP4对HSV-1病毒复制能力的影响

目的观察siRNA作用于HSV-1病毒的ICP4后对HSV-1复制能力的影响。方法设计两段靶向HSV-1 ICP4的siRNA和一段阴性对照序列,酶切连接法构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;脂质体法包装重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;嘌呤霉素筛选法建立抗ICP4的siRNA单克隆细胞系（VERO115、VERO3604、VERO115＋3604、VERO-CON）;TCID50法检测siRNA对HSV-1的病毒复制能力的影响。结果成功构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;获得重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;成功构建四个抗ICP4的siRNA单克隆细胞系;BAC-HSV-1-GFP病毒感染单克隆细胞系,siRNA作用后野生型VERO细胞的细胞病变效应（CPE）及绿色荧光蛋白（GFP）表达率均近100%,VERO-CON细胞达90%以上。siRNAVERO115及VERO3604的CPE及GFP表达率明显高于VERO115＋3604细胞,P〈0.05。且不同位点联合干扰对病毒的抑制作用强于单一位点干扰,低于VERO115和VERO3604,P〈0.05。结论抗ICP4的siRNA对HSV-1的复制有明显的抑制作用,且不同位点siRNA联合干扰对病毒的复制有协同抑制效果。     

食管癌SIB-IMRT与3DCRT的剂量学疗效比较

目的比较食管癌同期加量调强放疗(SIB-IMRT)与三维适形放疗(3DCRT)的剂量学疗效。方法选择2 0 1 0年1月-2012年12月于我院接受3DCRT治疗的60例食管癌患者作为3DCRT组,按1:1比例选取2013年1月-2016年2月于我院接受SIBIMRT治疗的60例患者作为SIB-IMRT组,收集所有患者的临床资料,比较两组靶区剂量分布及靶区适形度指数(CI)、剂量均匀指数(HI)及危及器官组织受量,比较SIB-IMRT、3DCRT治疗的效果及安全性。结果 (1)SIB-IMRT组靶区Dmin、Dmean、V95、D95%及靶区肿瘤体积(GTV)Dmin、Dmean与计划靶体积(PTV)Dmax、Dmin、Dmean均高于3DCRT组(P﹤0.05);(2)SIBIMRT组CI高于3DCRT组,其HI低于3DCRT组(P﹤0.05);(3)SIB-IMRT组脊髓Dmax、肺V30低于3DCRT组,其肺V5高于3DCRT组(P﹤0.05);(4)SIB-IMRT组放射性食管炎发生率低于3DCRT组(P﹤0.05)。结论采用SIB-IMRT放疗计划治疗食管癌靶区剂量分布均匀性高,适形度好,危及器官受量低,安全性高。     

泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白质降解对L—LTP维持期的影响

泛素-蛋白酶体系统作为细胞内局部迅速降解蛋白质的主要途径之一,其介导的蛋白质降解对LTP有重要影响。该系统可通过降解某些抑制性因子促进蛋白质合成,从而对L-LTP的维持期产生一定的正性调控作用。泛素一蛋白酶体系统本身的活性受到神经兴奋性的调节,使得蛋白质的降解作用与神经元的功能相适应。深入探讨泛素一蛋白酶体系统对L—LTP维持期的影响以及神经兴奋性对泛素一蛋白酶体系统的调控。不仅有助于更全面地了解学习记忆的分子机制。更合理地解释实验现象．还将有助于拓展认知功能障碍的治疗思路。     

金黄色葡萄球菌对消毒剂与抗菌药物敏感性的恢复研究

目的研究金黄色葡萄球菌对消毒剂的抗性及其对抗菌药物敏感性恢复的可能性。方法采用定量杀菌试验和药物敏感试验,对连续传代培养20次的金黄色葡萄球菌标准株抗消毒剂情况和用血液增菌管连续传代培养20次的三种亚致死量筛选的菌株和耐药菌株的药物敏感性恢复情况进行了观察。结果用亚致死剂量的消毒剂筛选出的金黄色葡萄球菌对含碘消毒剂、含氯消毒剂和生物酶等三种消毒液的抗性有轻微增强。经诱导出的青霉素和红霉素的金黄色葡萄球菌耐药菌株,血液增菌管传代30次,其敏感性没有得到恢复。临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌经血培养传代45次,其耐药性没有改变。结论亚致死剂量的消毒液可诱导出金黄色葡萄球菌抗性菌株,强化营养传代培养30次未使其耐药性降低。     

Drebrin对突触可塑性的影响以及相关认知功能障碍的研究进展

大脑发育调节蛋白(developmentally regulated brainpro-tein,Drebrin)作为一种神经元特异性的肌动蛋白结合蛋白,可通过改变细胞骨架的理化性质影响神经元树突棘及突触的形态和功能,调节突触可塑性。神经兴奋通过多种信号分子调节Drebrin的表达水平及功能状态,使其与神经功能保持一致。病理条件下,Drebrin的异常水平影响突触可塑性,导致机体不同程度的认知功能障碍,并与认知功能障碍的进展密切相关。在整体及分子水平对Drebrin的生理功能及致病机制的深入研究将有利于更深刻的理解认知功能,研发治疗认知功能障碍的新靶点。     

抗心磷脂抗体与人工流产术后继发不孕的相关性分析

人工流产可继发免疫性不孕,产生相关免疫性不孕抗体。其中血清抗心磷脂抗体(AcpAb)的出现与反复自然流产、胎死宫内及妊娠期高血压疾病等疾病,具有独特正相关因素[1];但其机制尚未完全明确。本文通过检测人流术后引发的继发不孕与原发不孕患者血清中AcpAb的水平,来探讨人流术后