坛紫菜硫酸多糖对60Co辐射引起的小鼠体内氧化应激的作用研究

应用生物化学的方法探讨在^60Co辐射条件下，坛紫菜硫酸多糖对小鼠体内氧化应激的抑制作用。结果表明，^60Co辐射能显著降低昆明种小鼠体内不同脏器组织匀浆SOD、GSH—Px的活性，引起脂质过氧化。坛紫菜硫酸多糖可提高辐射损伤后小鼠组织匀浆SOD、GSH—Px的活性，增强总抗氧化能力，减少脂质过氧化。     

三氧化二砷联合5-FU体外抗人胃癌细胞SGC-7901作用及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）与5-氟尿嘧啶（5-FU）联合应用体外抗人胃癌细胞株SGC-7901的作用及其机制。方法：用不同浓度的As2O3（终浓度依次为0．1，0．5，1．0μmol／L）和（或）5-FU（终浓度50mg／L）处理SGC-7901细胞后．采用流式细胞术观察细胞凋亡和细胞周期变化：免疫细胞化学法（PV法）观察凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-FU联合应用可显著提高诱导胃癌细胞凋亡率（q=63．9608，166．1758，51．3343，P〈0．01），与空白组相比，联合用药后S期细胞所占比例下降（q=16．0743，10．8805，12．1482，P〈0．01），G0／G1期细胞比例上升（q=8．7188，9．3309，9．8534，P〈0．01），癌细胞Bcl-2基因表达明显下降（q=10.2801，17．8456，19．0086，P〈0．01）。结论：As2O3与5-FU联合应用具有协同抗胃癌作用，其机制可能与细胞周期阻滞、增强诱导胃癌细胞凋亡以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

海生素注射液的特殊毒理学研究

目的探讨海洋抗肿瘤活性物质——海生素注射液的特殊毒理作用,评价该物质的安全性能。方法应用Ames实验、小鼠微核实验和精原细胞染色体畸变实验观察海生素注射液的致突变作用,用受孕小鼠观察海生素注射液的致畸胎作用。结果海生素注射液在5000μg/皿浓度下未见回复突变作用;在3.5mg/kg剂量下未诱发小鼠微核率增高;在3.5mg/kg浓度下不出现细胞染色体畸变率升高;在3.5mg/kg剂量下不存在胚胎毒性和致畸毒性。结论海生素注射液无特殊毒理作用,临床应用安全。     

兔ADSCs与NPCs共培养后再移植对椎间盘退变影响

目的探讨兔脂肪间充质干细胞(ADSCs)与髓核细胞(NPCs)共同培养后再植入兔腰椎间盘对Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响。方法体外分别提取分离培养兔ADSCs与NPCs。诱导分化兔ADSCs向成骨、成脂方向分化,鉴定兔ADSCs。将兔ADSCs与NPCs共同培养,诱导兔ADSCs向NPCs方向分化。新西兰大白兔30只,分为实验组和对照组,分别将兔ADSCs与NPCs共同培养后的细胞悬液、PBS缓冲液注入针刺抽吸后的椎间盘。4、8周后,采用间苯三酚分光光度法检测两组兔椎间盘髓核蛋白多糖表达的变化,采用反转录-聚合酶链反应对Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达进行半定量分析。结果 ADSCs可诱导向成骨、成脂方向分化,与NPCs共同培养后由梭形、多角形变为成纤维细胞样。对照组髓核Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达低于实验组,差异有显著性(t=6.50～13.04,P<0.05)。结论兔脂肪组织可成功提取分离ADSCs,ADSCs与NPCs共同培养后移植可延缓兔椎间盘退变。     

骨髓基质干细胞片层的制备及其在组织工程骨中应用的初步研究

目的：探讨骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）片层（cell sheet）的制备方法,并观察其在实验犬体内构建组织工程骨时的成骨作用。方法：密度梯度离心法获取实验犬骨髓基质干细胞,经成骨诱导培养后,利用温度感应性培养皿（temperature-responsive culture dish）制备细胞片层后在体外包裹犬同种异体脱钙骨基质（demineralized bone matrix,DBM）,相差显微镜和扫描电镜观察细胞及片层形态;将复合体植入实验犬背阔肌筋膜下,组织学方法观察术后组织工程骨的骨形成情况。结果：细胞片层成功制备,并与支架材料复合良好,术后16周组织学显示形成类似板层骨的致密骨组织。结论：利用温度反应性培养皿可成功制备BMSC细胞片层,细胞片层包裹支架材料后在实验动物体内可形成具有类似板层骨结构的组织工程骨。     

氨基葡萄糖和壳寡糖对去势大鼠血液生化指标的影响

目的:探讨氨基葡萄糖(GLC)和壳寡糖(COS)对去势大鼠动物模型血液生化指标的影响,进一步研究其抗骨质疏松的作用,以期为临床骨质疏松的防治和新药、功能性食品开发提供理论和实验依据。方法:通过切除3月龄雌性大鼠双侧卵巢复制绝经骨质疏松动物模型,每日分别给予不同剂量的氨基葡萄糖和壳寡糖,心脏取血观察血清生化指标的变化。结果:模型组碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(Cr)都明显升高,氨基葡萄糖和壳寡糖中剂量(0.25g/kg)能明显降低上述6个指标的水平(P<0.05)。结论:氨基葡萄糖和壳寡糖对去势大鼠过高的骨转换有明显的抑制作用,并能提高骨再建能力,对去卵巢致骨质疏松有明显的对抗作用。     

妊娠高血压综合征孕妇血清SOD、GSH-px活性和脂质过氧化水平的变化

①目的　探讨妊娠高血压综合征 (妊高征 )病人外周静脉血血清中超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH px)活性以及脂质过氧化终产物丙二醛 (MDA)含量的变化及其与妊高征发生、发展的关系。 ②方法　用酶生化法和硫代巴比妥酸法检测 2 7例非妊娠妇女、32例正常妊娠妇女和 5 1例妊高征孕妇血清中SOD、GSH px活性以及MDA含量。 ③结果　正常妊娠组SOD、GSH px活性及MDA含量较非妊娠组明显增高 (F =3.2 6～ 11.4 8,q =2 .6 9～ 8.2 7,P <0 .0 1) ,SOD/MDA、GSH px/MDA比值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。妊高征组MDA含量显著高于正常妊娠组 (q =4 .34,P <0 .0 1) ,且病情越重 ,增加越明显 (q =4 .78～ 8.2 6 ,P <0 .0 1) ;而SOD、GSH px活性、SOD/MDA、GSH px/MDA显著低于正常妊娠组 ,差异有显著性 (q =2 .0 1～ 9.37,P <0 .0 1)。④结论　妊高征的发生、发展与机体氧化和抗氧化平衡失调有关 ,SOD/MDA、GSH px/MDA可作为早期判定妊高征病情的指标。     

双酚A对体外大鼠睾丸支持细胞闭锁蛋白Occludin表达的影响

目的 观察双酚A (BPA)对体外大鼠睾丸支持细胞增殖能力与闭锁蛋白Occludin (OCLN)表达的影响,探讨BPA对精子发生的损伤机制.方法 体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞,油红O染色鉴定.实验分为BPA染毒组(25 μM、50 μM和100 μM分别处理细胞24h)、溶剂对照组(无血清DMEM/F12+DMSO+细胞悬液)和空白对照组(无血清DMEM/F 12).CCK-8法测支持细胞增殖活性,Western Blot法检测OCLN表达水平.结果 分离培养大鼠睾丸支持细胞纯度＞90％.CCK-8实验结果显示:BPA对支持细胞增殖活性具有抑制作用,BPA浓度＞103μM时,存活率明显降低,细胞存活率＜44％,其差异有统计学意义(P＜0.05).Western Blot法检测结果显示,OCLN蛋白表达随着BPA染毒剂量的增加而降低,呈剂量依赖性,不同染毒剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 BPA可抑制睾丸支持细胞增殖活性和OCLN的表达,干扰支持细胞正常的生精过程.     

血清肌抑素水平与胃癌恶病质的关系

目的 观察胃癌恶病质患者血清肌抑素水平变化,并初步探讨肌抑素与肿瘤坏死因子-α的相关性.方法 根据整体营养状况主观评估(PG-SGA)分级将80例胃癌患者分成胃癌恶病质组(PG-SGAC级,32例)和胃癌非恶病质组(PG-SGA A+B级,48例),采用ELISA法测定血清肌抑素和肿瘤坏死因子-α水平,并记录身高、体质量、总蛋白、白蛋白、血红蛋白、C-反应蛋白等指标.对照组为健康体检者80例,同法测定并记录上述指标.结果 胃癌恶病质组的血清肌抑素水平为(1.36±0.50) μg/L,显著高于胃癌非恶病质组的(0.91 ±0.49) μg/L(x2=14.67,P=0.00);对照组的血清肌抑素水平为(0.70±0.37) μg/L,显著低于胃癌非恶病质组(x2=36.45,P=0.00).对照组(r=-0.16,P=0.16)、胃癌非恶病质组(r=0.08,P=0.58)及胃癌恶病质组(r=0.18,P=0.31)中血清肌抑素与肿瘤坏死因子-α浓度均不具有相关性.结论 胃癌恶病质患者血清肌抑素水平升高;血清肌抑素与肿瘤坏死因子-α无相关性.