基于层次分析法（AHP）的保健食品原料评价体系构建及分析

目的建立保健食品原料评价体系(Functional Food Crude Materials Evaluation System,FUFMES),为保健食品原料目录排名提供科学依据与技术保障。方法首先,利用文献调研和多轮专家访谈方法筛选FUFMES的指标并确定其层级关系;第二,使用层次分析法(Analytic Hierarchy Process,AHP)计算指标权重,具体方法是依据专家打分构建判断矩阵,利用R语言进行一致性检验与最大特征根检验,得出各级指标权重;第三,使用极值法计算原料的单个指标值;第四,利用线性加权综合法得到每种原料的评价指数并据此进行排名;最后,将获得的分析结果与专家评价结果进行比较。结果 FUFMES包括6个一级指标、39个二级指标、11个三级指标。利用FUFMES对9种保健食品原料进行评价,获得的评价指数依次是:西洋参(0.49)、人参(0.48)、银杏叶(0.21)、灵芝孢子粉(0.08)、鱼油(0.06)、螺旋藻(0.03)、辅酶Q10(0.02)、褪黑素(0.01)、大蒜油(-0.03)。基于该评价指数的排名结果与专家评价结果显示了较高一致性。结论构建了科学、完整的FUFMES,FUFMES将成为保健食品原料目录评价与排名的有力工具,为推进保健食品原料备案制提供科学依据与技术保障。     

赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。     

灵芝多糖联合二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠氧化应激的影响

目的研究灵芝多糖联合二甲双胍对2型糖尿病大鼠氧化应激的影响。方法 采用斯泼累格·多雷（SD）大鼠高脂饮食4周后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素30 mg.kg-1造模。成模后将大鼠随机分为模型对照组、灵芝多糖组（给予灵芝多糖600 mg.kg-1）、二甲双胍组（给予二甲双胍600 mg.kg-1）及联合用药组（给予灵芝多糖300 mg.kg-1＋二甲双胍300 mg.kg-1）,另设正常对照组。给药治疗12周末测量大鼠空腹血糖;测定血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。结果用药组空腹血糖水平均低于模型对照组（P<0.01）,其中联合用药组血糖显著低于单独用药组（P<0.01）。与模型对照组比较,用药组血清TC、TG水平明显下降（P<0.05或P<0.01）,与单独用药组比较,联合用药组血清TC、TG水平明显降低（P<0.05或P<0.01）;与模型对照组比较,用药组血清SOD水平明显升高（P<0.01）;与单独用药组比较,联合用药组血清SOD水平明显升高（P<0.05）。与模型对照组比较,用药组血清MDA水平明显降低（P<0.01）,联合用药组血清MDA较单独用药组明显降低（P<0.05）。与模型对照组比较,用药组血清CAT、GSH-Px水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,联合用药组血清CAT、GSH-Px水平较单独用药组明显升高（P<0.05）。结论 灵芝多糖、二甲双胍联合用药能够有效对抗2型糖尿病大鼠体内氧化应激作用,效果优于单独用药,其机制可能与增强体内SOD、CAT、GSH-Px水平及调节血脂障碍有关。     

灵芝多糖肽GL-PPSQ2的热分析研究

目的:研究灵芝多糖肽(GL-PPSQ₂)的热解物理化学特性和热稳定性。方法:采用热重(TG)和红外(IR)、质谱(MS)联用,在30～800℃升温范围为内对GL-PPSQ₂进行热重(TG)和微分热重(DTG)分析;采用差示扫描量热(DSC)法,升温范围为-50～500℃,流量为50 mL·min^-1,升温速率为10℃·min^-1,分别在氮气和空气气氛下测定样品的变性温度和热流变化。结果:GL-PPSQ₂的主要热解温度为180～450℃,在310℃(氮气)和265℃(空气)出现最大失重尖峰,失重过程在600℃左右结束,800℃时热解残留量分别为14.78%(氮气)和1.65%(空气)。TG-IR和TG-MS结果表明,热解产物析出量在320℃时达到最大峰值,小分子气体产物主要有H₂O和CO₂。对热处理样品残留物进行红外光谱分析主要含有多糖、碳和硫酸盐。DSC分析可知,GL-PPSQ₂在200℃下吸热峰为失去吸附水或溶...     

失血性休克复苏时心肌损伤和一氧化氮的变化及灵芝多糖的干预作用

目的 :探讨失血性休克和复苏再灌注过程中心肌损伤和一氧化氮 (NO)浓度的变化及灵芝多糖的干预作用。方法 :复制家兔失血性休克再灌注模型 ,随机分成假手术组、生理盐水再灌注组和质量分数为 1%的灵芝多糖再灌注组 ;观察 3组动物平均动脉血压 (MAP)、心功能、血浆 NO浓度及心肌 NO含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的变化。结果 :两个再灌注组动物在失血性休克 4 0 m in时左心室舒张末压 (L VEDP)比休克前及假手术组略有升高 ,但差异不显著 (P均 >0 .0 5 ) ,左心室内压最大变化速率 (± dp/dt max)则明显降低 (P均 <0 .0 5 ) ,血浆 NO浓度则显著升高 (P均 <0 .0 5 )。生理盐水再灌注组动物再灌注 4 0 min时 ,心功能较休克 4 0 m in时进一步降低 (P<0 .0 5 ) ,血浆 NO浓度进一步升高 ,心肌 NOS活性和 NO含量明显高于假手术组 (P均 <0 .0 5 )。灵芝多糖组再灌注 4 0 min时较生理盐水再灌注组、心功能明显改善 ,血浆 NO浓度、心肌 NO含量和心肌 NOS活性均明显降低 (P均 <0 .0 5 )。结论 :失血性休克再灌注过程中心肌 NOS活性、血浆 NO浓度、心肌NO含量均升高 ,而心功能降低 ,提示 NO在失血性休克再灌注心肌损伤中起重要作用 ;而灵芝多糖可通过抑制 NOS活性、降低 NO浓度对失血性休克再灌注心肌损伤起保护作用。     

灵芝多糖通过调控ICOS/ICOSL 对宫颈癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制及对免疫逃逸的解除作用研究

目的：观察灵芝多糖（GLP）对宫颈癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制及免疫逃逸的解除作用,并探究其机制。方法：60只小鼠随机抽取10只设为正常组,其余皮下接种宫颈癌U14细胞诱导小鼠宫颈癌模型,随机分为荷瘤组、GLP组、抑制剂组、GLP+抑制剂组,各10只。GLP组GLP 200 mg/kg灌胃;抑制剂组诱导性共刺激分子（ICOS）mAb 100μg/kg腹腔注射;GLP+抑制剂组药物用法及用量同GLP组、抑制剂组;正常组与荷瘤组灌胃、腹腔注射等量生理盐水。1次/d,连续干预14 d。游标卡尺测定肿瘤体积;流式细胞仪测定外周血髓源抑制性细胞（MDSCs）水平,CD4+、CD8+T淋巴细胞水平;测定胸腺、脾脏指数;Western blot测定肿瘤组织ICOS、诱导性共刺激分子配体（ICOSL）蛋白相对表达量。结果：第10、12、14天抑制剂组、荷瘤组、GLP+抑制剂组、GLP组肿瘤体积依次缩小（P<0.05）;抑制剂组、荷瘤组、GLP+抑制剂组、GLP组、正常组胸腺指数、脾脏指数CD4+T淋巴细胞占比、CD4+/CD8+,肿瘤组织ICOS、ICOSL蛋白相对表达量依次升高,外周血MDSCs占比、...     

“灵芝耐力宝”对机体耐疲劳作用的实验应用研究

目的：探讨“灵芝耐力宝”对运动能力的影响和作用。方法：运动员口服灵芝耐力宝，测定定量负荷和最大负荷工作时间。结果：运动员服用后，实验组递增负荷运动时间和做功值明显高于服药前（P＜0．01）；运动时心率负荷及血乳酸的消除（P＜0．05），也显示了服药后训练程度的提高。结论：“灵芝耐力宝”具有一定的提高运动能力及消除疲劳之功效。     

“灵芝耐力宝”对机体耐疲劳作用的实验应用研究

目的探讨“灵芝耐力宝”对运动能力的影响和作用。方法运动员口服灵芝耐力宝,测定定量负荷和最大负荷工作时间。结果运动员服用后,实验组递增负荷运动时间和做功值明显高于服药前(P<0.01);运动时心率负荷及血乳酸的消除(P<0.05),也显示了服药后训练程度的提高。结论“灵芝耐力宝”具有一定的提高运动能力及消除疲劳之功效。     

灵芝孢子对原发性肝癌术后肝功能影响的研究

目的评估灵芝孢子对原发性肝癌术后肝功能的影响。方法80例原发性肝癌切除术后患者随机分为对照组（常规护肝治疗）和治疗组（对照组基础上加灵芝孢子治疗）,各40例。术后1d、3d、7d动态监测肝功能指标（ALT、AST、TBIL、ALB、PT）变化,比较灵芝孢子治疗对原发性肝癌术后肝功能的影响。结果术后第1天,治疗组和对照组均出现较明显的肝功能损害。经1周治疗后,治疗组较对照组肝功能明显改善（P=0．032）,无一例出现肝功能不全,而对照组2例出现肝功能不全。两组术后并发症和药物不良反应无明显差异（P分别为0．453、0．874）。结论灵芝孢子可以较好地改善原发性肝癌患者术后肝功能的损害,改善患者的预后。