赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。     

赤灵芝段木栽培新技术研究

短段木仿野生栽培灵芝是近年发展起来的灵芝人工栽培新法,应用于大规模生产。本文将栽培要点归纳为:熟材短段木断面接种室内培菌(野外)大棚覆土栽培。     

红曲氨基酸成分分析

目的 建立"福曲"(古田红曲)质量的参考指标.方法 采用相应前处理方法和氨基酸自动分析仪.结果 从古田红曲中共检出20种氨基酸,其中蛋白质氨基酸17种(总量为11.23 mg/100mg)和非蛋白质氨基酸3种(鸟氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸).红曲中必需氨基酸占全氨基酸总量(11.23 mg/100mg)的42.02%(E/T=0.42);含有11种药用氨基酸总量为8.635 mg/100mg,其中牛磺酸含量为0.460 mg·g-1.20种游离氨基酸15.04 mg·g-1g,约占水解氨基酸总量的13.3%,其中7-氨基丁酸与鸟氨酸分别为0.283 mg·g-1和3.957 mg·g-1,与水解样品中的含量(0.283 mg·g-1和4.145 mg·g-1)较为接近.结论 全氨基酸总量11.23 mg/100mg、γ-胺基丁酸含量0.28 mg·g-1和牛磺酸含量0.46 mg·g-1可以作为"福曲"(古田红曲)质量的参考指标.     

硬孔灵芝三萜酸提取工艺研究

目的 确定硬孔灵芝三萜酸乙醇回流提取法的最佳工艺. 方法 通过L9(34)正交试验,优选乙醇回流提取硬孔灵芝三萜酸的最佳工艺. 结果 影响95％乙醇回流提取硬孔灵芝三萜酸的因素是:温度＞提取时间＞提取次数＞料液比,最优水平组合为:提取温度60C、提取3次、料液比1:25、提取时间2h.在此条件下,硬孔灵芝三萜...     

地道灵芝药材锗含量低于1×10~（－6）

地道灵芝药材锗含量低于１×１０￣（－６）陈体强，李开本，何修金福建农业科学院原木灵芝发展中心（福州３５００１３）灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）为我国传统名贵滋补药材。国内外有关药理研究结果普遍认为灵芝具有免疫调节及抗肿瘤等药理作用，而微量元...     

原木灵芝药材显微形态及其扫描电镜鉴定

采用扫描电子显微镜对原木灵芝药材的显微形态结构进行观察结果表明灵芝 Ganodrma lucidum与紫芝 G.sinense的担孢子在形态结构及大小上存在明显差别 ,为灵芝生药材鉴定提供一种形象直观的新依据。在扫描电镜下可见灵芝担孢子大小为 5 .2 6～ 6.0 5× 7.89～ 8.68μm,表面分布着一些或明或暗的微小的凹陷或坑穴 ;而紫芝担孢子大小为 6.84～ 7.3 7× 10 .2 6～ 11.0 5 μm,表面有纵向分布的或长或短的沟、嵴和数条环状波纹。     

韩国赤芝全基因组重测序分析

目的：探索韩国赤芝与中国赤芝CGMCC5.0026间在基因组水平上存在的差异,为赤芝的遗传育种提供研究基础。方法：采用高通量重测序技术,对韩国赤芝进行全基因组重测序,并对单核苷酸多态位点突变（SNP）、小片段插入缺失变异（InDel）、结构变异（SV）进行检测和注释。对DNA水平变异基因进行KEGG、GO、COG、NR、SwissProt数据库注释。结果：韩国赤芝重测序覆盖深度为44 ×,与中国赤芝CGMCC5.0026相比,共发现10607个基因发生非同义SNP,4774个InDel和1428个SV,共导致9469个基因发生变异。这些变异基因中有转录因子86个,细胞色素P450 195个。结论：本研究通过对中国赤芝和韩国赤芝基因组序列进行比较,为赤芝的分子标记育种和对完善灵芝模式真菌研究体系提供了基础。     

灵芝(孢子粉)生药质量检测

目的 通过显微形态、化学成分的检测分析,探讨灵芝孢子粉生药质量检测方法。方法 一般化学成分按常规方法进行,锌、锰等微重元素分析采用原子吸收分光度法(AAS),多酶含量的检测采用苯酚-硫酸比色法,牛磺酸分析采用氨基酸自动分析仪;破壁形态观察和破壁率的检测采用数字显微镜、扫描电镜进行。结果 破壁前后孢子的粗蛋白、总酷、微量元素、牛磺酸等含量均变化不大,而粗脂肪(索氏提取)及多糖(热水提取)含量明显增加。在扫描电镜和光学显微镜下,未破壁孢子粉的显微形态完整,而破壁孢子粉样品中观察不到完整的孢子,其孢壁蛄构基本解体,孢内物质是易释出。结论 (1)水溶性多糖(Polysaccharides)、灵芝酸(Triterpenoid acids)及牛磺酸(Taurine)等含量可以作为灵芝孢子粉生药质量控制的重要指标;(2)对破壁孢子粉的检测可以数字显微镜或扫描电镜观察其破壁形态及破壁率高低。     

太子参挥发油化学成分研究

目的比较不同挥发油提取方法对太子参挥发油化学成分的影响。方法提取挥发油采用方法Ⅰ是乙醚提取，提取物经水蒸气蒸馏提取法；方法Ⅱ是直接采用水蒸气蒸馏提取法。运用GC—MS—DS联用分析技术和气相色谱保留指数法，比较分析方法Ⅰ和方法Ⅱ太子参挥发油化学成分，用GC面积归一法分别计算了各成分的相对含量。结果方法Ⅰ和方法Ⅱ太子参的挥发油得率分别为0．28％和0．13％。从方法I提取的挥发油中鉴定出9种化合物，有7种化合物出峰的保留时间在30rain后，其中以邻苯二甲酸二丁酯相对含量最高（87．19％）；方法Ⅱ鉴定8种化合物，均在30min前出峰，其中以2-糠醇相对含量最高（79．76％）。显然，方法Ⅰ和方法Ⅱ提取的挥发油化学成分含量和组成有较大的差别；方法Ⅰ提取的挥发油中未能检出2-糠醇，2-糠醇是太子参在水蒸气蒸馏过程中生成的，重复实验进一步验证该结果。结论不同提取方法对太子参挥发油化学成分含量和组成有明显的影响；2-糠醇不是太子参的天然成分。     

建青黛醚溶成分GC-MS分析及氨基酸含量测定

目的 建立建青黛药材质量标准. 方法 采用GC-MS联用仪和氨基酸自动分析仪分别检测建青黛药材中醚溶成分和氨基酸的含量. 结果 从建青黛醚溶成分中鉴定出15个成分,占醚溶成分总量的93%;从建青黛中检出18种氨基酸,全氨基酸总量3.76%.游离氨基酸总量为0.0125%. 结论 建青黛中醚溶成分以甾醇类化合物为主,氨基...