三磷酸胞苷二钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的 探讨三磷酸胞苷二钠(CTP)诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的作用.方法 取成年SD大鼠,用贴壁培养法分离纯化骨髓间充质干细胞(BMSCs),传代扩增,连续观察细胞形态及生长特性.用不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.40和0.80 mg/mL)CTP对BMSCs进行诱导;诱导后用免疫组织化学检测细胞神经微丝蛋白(NF)、胶质原性纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元烯醇化酶(NSE)的表达.计算阳性细胞比例,进行统计学分析,选出合适的诱导剂量.结果 随CTP浓度增高,经免疫组织化学检测NF、GFAP和NSE阳性细胞比例也呈现逐步增高趋势,到一定浓度后又有所下降,统计学分析,CTP浓度为02 mg/mL时,能够诱导NF、GFAP和NSE阳性细胞比例为(32.73±0.63)%、(62.77±2.45)%和(30.41±0.65)%,显著高于对照组(P＜0.01).结论 CTP是一种很好的体外诱导剂,可以诱导MSCs向神经细胞分化,以0.2 mg/mL CTP作诱导剂,能够获得较明显的诱导MSCs向神经细胞和神经胶质细胞分化的结果.     

HPLC法同时测定灵芝浸膏片中尿苷和腺苷的含量

目的:采用反相高效液相色谱法测定灵芝浸膏片中尿苷和腺苷的含量。方法:使用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.04mol/L磷酸二氢钾(6∶94),流速1.0 mL/min,检测波长260 nm。结果:尿苷、腺苷进样量分别在0.034~0.670μg和0.025~0.496μg范围内,与峰面积呈良好线性关系;尿苷及腺苷的平均回收率(n=6)分别为98.3%和98.6%,RSD分别为2.0%和2.0%。结论:本法简便、准确,重复性好,可为灵芝浸膏片的质量控制提供实验依据。     

LC-MS/MS法同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的含量

目的:建立同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的LC-MS/MS分析方法。方法:以芦丁为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理,采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水(25:75)为流动相,流速为0.4 ml/min,柱温20℃;采用ESI(+)离子源,MRM扫描检测离子对为柚皮苷m/z 581→273、新橙皮苷m/z 611→303、芦丁(内标)m/z611→303。结果:血浆中柚皮苷在0.025～2.5μg/ml、新橙皮苷在0.015～1.5μg/ml浓度范围内线性关系良好,二者的方法回收率均近100%,分析方法的日内日间精密度RSD值均小于10%,内源性物质不干扰样品测定。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、专属性好,适用于Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷测定及其体内药代动力学的研究。     

吸附澄清剂在HL颗粒中的应用

目的:考察吸附澄清剂在HL颗粒除杂工艺中的应用。方法:以黄芪甲苷的含量、干膏得率为指标,比较了乙醇沉淀与加澄清剂的除杂效果;并采用单因素实验优选了ZTC1+1-Ⅱ型吸附澄清剂除杂的工艺参数,包括ZTC1+1-Ⅱ型吸附澄清剂的加入量、加入顺序、药液浓度、搅拌速度等。结果:ZTC1+1-Ⅱ型吸附澄清剂处理对黄芪甲苷含量影响较小,且能明显降低出膏率,研究所得除杂工艺为:取提取液浓缩至药材重(g)与提取液体积(ml)为1:5时,先加入澄清剂B组分,后加入A组分,搅拌速度100～150 r/min。结论:澄清剂法比水醇法工艺简单,生产周期短,减少乙醇用量,节省能源,以ZTC1+1-Ⅱ型吸附澄清剂除杂能较好的保留黄芪甲苷,而且除杂效果明显。     

大孔吸附树脂分离纯化黄芪甲苷的工艺研究

目的：对黄芪中的黄芪甲苷进行分离纯化工艺研究。方法：采用动态吸附法以吸附量和洗脱率为指标选择分离树脂的型号,以黄芪甲苷的含量为指标筛选了上柱条件和洗脱条件,并进行了分离纯化工艺验证。结论：经分离纯化后黄芪甲苷的纯度由0.59%提高到12.66%,有效的去除杂质,保留了有效成分。     

糖脉宁胶囊质量标准研究

建立糖脉宁胶囊的质量标准.方法：采用薄层色谱（TLC）法对糖脉宁胶囊中的桂枝、牡丹皮、人参进行定性鉴别,对附子中的乌头碱进行限量检测;采用高效液相色谱（HPLC）法对处方中主要成分马钱苷进行含量测定.结果：在TLC色谱中斑点清晰,待检成分并与其它组分分离良好,并且乌头碱的含量符合要求;马钱苷在0.02～0.4 0 μg范围呈良好的线性关系,R= 0.999 6,平均回收率99.85%,RSD为1.83%（n=6）.结论：所建立的方法简便可靠,准确性好,可用于该制剂的质量控制.     

神经节苷脂对急性脑出血患者神经元特异性烯醇化酶的影响

目的探讨神经节苷脂(GM-1)对急性脑出血患者血清神经元特异性醇纯化酶(NSE)的影响及其对病情的影响及预后价值。方法急性脑出血患者60例分成2组,治疗组30例在基础治疗上加用神经节苷脂60～100 mg静脉滴注,连用15 d;对照组给予基础治疗。治疗前及治疗后1周、2周分别对NSE进行检测,同时治疗前、治疗后2周及3个月对两组患者神经功能缺损程度及日常生活活动量评分,并分别进行比较。结果治疗组与对照组相比,治疗后2周及3个月后神经功能缺损程度评分、日常生活活动量评分均较对照组改善更为明显,有统计学意义(P<0.05),且NSE水平治疗组较对照组下降更为明显(P<0.05)。结论神经节苷脂治疗具有保护神经,改善脑出血预后的作用,其机制可能与下调神经元特异性烯醇化酶水平有关。     

逍遥散联合复方甘草酸苷治疗慢性乙型肝炎肝郁脾虚型60例疗效观察

目的 观察逍遥散联合复方甘草酸苷治疗慢性乙型肝炎肝郁脾虚型患者的临床疗效.方法选择中医辨证为肝郁脾虚型的慢性乙型肝炎患者120例,随机分为2组.治疗组60例采用逍遥散联合复方甘草酸苷治疗,对照组60例单纯采用复方甘草酸苷治疗,治疗1月后观察2组患者肝功能、临床症状、体征改善情况.结果治疗组治疗后在临床症状、体征及肝功能...     

复方甘草酸苷联合还原型谷胱甘肽治疗乙醇性肝病60例疗效观察

目的:观察复方甘草酸苷联合还原型谷胱甘肽治疗乙醇性肝病的临床疗效。方法:将60例酒精性肝病患者随机分成复方甘草酸苷、还原型谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽和复方甘草酸苷联合组三组,每组各20例,疗程均为20 d。复方甘草酸苷组给予复方甘草酸苷注射液120 mg/d;还原型谷胱甘肽组给予还原型谷胱甘肽1.8 g/d;联合组给予复方甘草酸苷针120 mg/d和还原型谷胱甘肽针1.8 g/d。结果:治疗后,三组临床症状均有改善。联合组临床症状改善均优于复方甘草酸苷组和还原型谷胱甘肽组。结论:复方甘草酸苷联合还原型谷胱甘肽比两药单用对乙醇性肝病的临床治疗作用更加明显。