脂肪酸合成酶在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义

目的研究三阴性乳腺癌中脂肪酸合成酶（FAS）的表达及临床意义。方法采用EnVision法对三阴性乳腺癌标本进行FAS的免疫组织化学染色,观察三阴性乳腺癌中FAS表达及与临床病理特点之间的关系。结果FAS在三阴性乳腺癌中高表达,阳性表达率60％（18／30）;FAtS在癌旁组织中表达率低10％（1／10）,两者阳性率的比较差异有统计学意义（P〈0．05）。三阴性乳腺癌中FAS表达与患者的年龄、月经状态、分期、淋巴结状态无关（P〉0．05）,而与肿瘤大小、远处转移有关（P〈0．05）。肿瘤大、疾病进展快的患者,FAS表达较肿瘤小、进展慢的患者强。结论三阴性乳腺癌中FAS的表达可能在促进肿瘤生长、转移中起作用。     

Effects of adrenocorticotropic hormone and electroacupuncture on formalin—induced NOS—positive neurons in the sinal cord of rats

AIM:To study the effects of adrenocorticotropic hormone(ACTH) and electroacupuncture (EA) on formalin-induced nitric oxide synthetase (NOS)-positive neurons increases in the spinal cord or rats.METHODS:ACTH was administered by intrathecal injection (i.t.)and EA stimulation on “jiaji” point was performed by 1 mA 50Hz,5mA 5Hz and 1mA 5Hz respectively.The NOS-positive neurons were assayed by NADPH-diaphorase histochemistry.RESULTS:The results showed that both ACTH(0.5u,i.t.)and EA stimulation (1mA 50Hz,5mA 5Hz,1mA 5Hz) on “jiaji” point 30min significantly reduced the formalin-induced NOS-ositive neurons in the rat dorsal horn.The combinative use of ACTH (0.5u,i.t.) and EA(1mA 5Hz) caused a more marked reduction of the numbers of NOS positive neurons than that of the single ACTH or EA.Those effects were partially reversed by pretreatment with either the substrate of NOS,L-arginine (10nmol,i.t.)or opioid antagonist naloxone(10g,i.t.).CONCLUSION:These results suggests that both ACTH and EA might inhibit the formalin-induced NOS-positive neurons increases and have a synergic effect acting via a different pathway.     

薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用

目的探讨薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型,以2、6 m L/kg剂量的薏苡仁油连续ig给药26 d,绘制肿瘤生长曲线,实验结束后摘除肿瘤组织,称质量,计算抑瘤率,并采用紫外-可见分光光度法测定肿瘤组织中脂肪酸合成酶(FAS)活性。体外培养人前列腺癌PC-3细胞,应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR法测定各组FAS m RNA的相对表达量。结果薏苡仁油6 m L/kg组抑瘤率为43.9%,肿瘤组织中FAS活性与模型组比较下降44.7%(P0.05)。薏苡仁油20μL/m L水平上的FAS m RNA表达明显下降(P0.05)。结论薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的荷瘤裸鼠模型有明显的抑瘤作用,该作用可能与下调FAS m RNA的表达和降低FAS的活性有关。     

铁皮石斛倍半萜合成酶基因的克隆与表达分析

目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale倍半萜合成酶(sesquiterpene synthase,SES)基因,分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及在信号分子茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)诱导下的表达模式。方法采用RACE技术克隆铁皮石斛SES(DoSES)cDNA全长,利用相关软件和在线网站对其进行生物信息学分析,并使用实时荧光定量PCR技术分析DoSES的表达模式。结果获得的DoSES cDNA序列(Gen Bank登录号为KX278311)全长1 890 bp,含有1个1 659 bp的完整开放阅读框(ORF),编码552个氨基酸的多肽链,与其他科属植物的同源性达到60%左右。DoSES基因在铁皮石斛茎中表达量最高,从高到低依次是叶、花、原球茎、根;且受到Me JA的诱导。结论克隆了铁皮石斛DoSES基因,为进一步研究调控铁皮石斛萜类代谢奠定了理论基础。     

糖原合成酶基因M416V多态性与2型糖尿病的相关性

目的 探讨糖原合成酶，即Glycogen Synthase(GS)基因M416V多态性与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法 利用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCRRFLP)技术分析252例T2DM患者、196例非DM对照者GS基因第10外显子第416号位点上由蛋氨酸(Methionine)置换成缬氨酸(Valine)的变异，即M416V。结果 (1)T2DM组的GS基因M416V的Val等位基因频率为10．3％，对照组的Val等位基因频率为6．4％；T2DM组中的Val等位基因频率显著高于对照组，P-0．037。(2)在T2DM组中，具有GS基因Val等位基因者的BMI值明显高于无Val等位基因者(P-0、024)，具有GS基因Val等位基因者的2hPG值明显高于无Val等位：基因者(P-0．005)。结论 GS基因416位点上的Val等位基因与T2DM的发病有一定的相关性，并且它可能参与胰岛素抵抗(肥胖、高血压、高血脂等)的发生。     

醛固酮合成酶基因CYP11B2(-344T/C)多态性对北京汉族人群高血压患者缬沙坦降压疗效的影响

目的探讨醛固酮合成酶基因CYP11B2(-344T/C)多态性与北京汉族人原发性高血压的关系及对缬沙坦降压疗效的影响。方法采用多聚酶链式反应结合限制性内切酶片段长度多态性分析方法检测1999年8月至2003年10月首都医科大学宣武医院345例原发性高血压(EH)患者和156名健康人(NE)醛固酮合成酶基因CYP11B2(-344T/C)多态性。并测定各组人群的诊室血压、24h血压以及各项生化指标。其中98例高血压患者给予缬沙坦80mg,每日1次,用药4周,测定用药前后的血压指标。结果EH组CC CT基因型频率显著高于NE组;EH组C等位基因频率显著高于NE组(P<0.01)。CC CT基因型用药后的收缩压下降值、舒张压下降值、平均动脉压下降值及24h收缩压下降值、24h舒张压下降值、24h平均动脉压下降值均显著大于TT基因型(P<0.05)。结论醛固酮合成酶基因CYP11B2(-344T/C)多态性与北京汉族人原发性高血压明显相关,并且可能是缬沙坦降压疗效的有效预测因子。     

糖原合成酶激酶3抑制剂降低胰岛β细胞凋亡

用油酸诱导胰岛INS-1细胞凋亡,分别用流式细胞仪检测INS-1细胞的凋亡率,并用Western印迹检测糖原合成酶激酶3(GSK-3)磷酸化的水平,GSK-3抑制剂氯化锂(LiCl)干预后,油酸诱导的INS-1细胞凋亡率降低,GSK-3磷酸化增加,提示通过抑制GSK-3活性可降低胰岛β细胞凋亡率.     

抗合成酶综合征合并心脏受累患者的临床及免疫学特征

目的:探讨抗合成酶综合征 (anti-synthetase syndrome, ASS)患者心脏受累的临床及免疫学特征。方法:回顾性分析2003年4月至2020年11月于北京大学人民医院风湿免疫科住院治疗的96例ASS患者资料,包括人口学资料、临床表现(皮疹、肌肉损害等)、合并症及实验室指标(肌酶、炎性标志物、免疫球蛋白、补体、淋巴细胞亚群、自身抗体等), 依据有无心脏受累进行分组比较。结果:ASS患者心脏受累的发生率为25.0% (24/96),心脏受累的患者主要表现为心肌肌钙蛋白升高(75.0%, 18/24)、心包积液(33.3%, 8/24)、左心室舒张功能减退(33.3%, 8/24)、瓣膜反流(33.3%, 8/24)。心脏受累组患者的发病年龄大于无心脏受累组[(54.58±10.58)岁 vs. (48.47±13.22)岁, P=0.043],关节炎的发生率低(37.5% vs. 61.1%, P=0.044)。心脏受累组患者合并急进性间质性肺炎的发生率高于无心脏受累组(54.2% vs. 30.6%, P=0.037)。实验室指标方面,ASS合并心脏受累组的C反应蛋白[13.55 (8.96, 38.35) mg/L vs. 4.60 (1.37, 17.40) mg/L, P=0.001]和乳酸脱氢酶[408.0 (255.0, 587.0) U/L vs. 259.5 (189.8, 393.8) U/L, P=0.007]水平均明显高于无心脏受累组。此外,心脏受累组出现抗Ro-52抗体阳性的患者比例明显高于无心脏受累组(91.7% vs. 69.4%, P=0.029),而合并危险因素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、动态红细胞沉降率、铁蛋白、免疫球蛋白G、补体C3、补体C4及T/B/NK淋巴细胞亚群等方面,两组差异无统计学意义。结论:ASS患者心脏受累常见,以心肌受损为主,合并C反应蛋白和乳酸脱氢酶升高、抗Ro-52抗体阳性的ASS患者应警惕心脏受累。     

沉默FASN基因对肝母细胞瘤HepG2细胞的脂质代谢及增殖、迁移和凋亡的影响

目的 研究FASN基因沉默对肝母细胞瘤HepG2细胞脂质代谢及生物学行为的影响。方法 以脂质体包裹siRNA的方法沉默FASN基因,实验分为Control组、NC-siRNA组和FASN-siRNA组,FASN-siRNA组转染75 nmol/L的FASN-siRNA片段,NC-siRNA组转染等剂量的NC-siRNA片段,Control组只加入等体积的转染试剂。通过实时荧光定量PCR和Western blot法检测FASN基因和蛋白水平的相对表达;通过酶联免疫吸附法检测HepG2细胞甘油三酯水平;通过油红O染色法检测细胞内脂滴数目;利用CCK-8实验检测HepG2细胞增殖活性的改变;通过annexinV-FITC/PI双染色法检测HepG2细胞凋亡情况;采用划痕愈合实验及transwell实验检测HepG2细胞迁移能力的改变。结果 FASN-siRNA组的FASN基因表达、蛋白表达低于NC-siRNA组（P<0.001）。油红O染色显示,FASN-siRNA组细胞内脂滴较NC-siRNA组减少（P<0.001）、甘油三酯水平降低（P< 0.01）;CCK-8实验、annexinV-FITC/PI双染实验及划痕愈合实验结果显示,转染48、72、96 h后,FASN-siRNA组HepG2细胞增殖被显著抑制,FASN-siRNA组细胞总凋亡率与NC-siRNA组相比增加、FASN-siRNA组发生迁移的HepG2细胞数量低于NC-siRNA组（P<0.001）。结论 沉默FASN基因可抑制肝母细胞瘤HepG2细胞的增殖及迁移,并诱导HepG2细胞凋亡,该作用可能与FASN基因抑制后HepG2细胞内脂质合成降低有关。