重组Ser-125突变型人白细胞介素-2的构建 表达和纯化

用PCR定点突变方法将天然人白细胞介素-2分子125位上的半胱氨酸突变为丝氨酸，并在大肠杆菌中表达。由于消除了变性时产生错配和二聚体的分子基础．从而方便了纯化，明显提高了比活性和纯度。     

鱼露致中国仓鼠卵巢细胞HGPRT位点突变作用

背景与目的:研究鱼露及亚硝化鱼露对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞HGPRT位点突变的影响.材料与方法:分别将鱼露和亚硝化鱼露分成4个不同剂量处理组:5 μl/ml、2.5μl/ml、1.25 μl/ml、0.625 μl/ml,另设阳性对照组(EMS:0.75 μg/ml,不需代谢活化;MCA:4 μg/ml,需代谢活化)和溶剂对照组(三蒸水),应用CHO/HGPRT基因突变试验,采用琼脂平皿法,检测鱼露和亚硝化鱼露对CHO细胞的毒性及突变体频率,评价鱼露及亚硝化鱼露引起突变的可能性.结果:经S9系统活化和未经S9系统活化的所有处理组突变体频率差异均有统计学意义(X2S9-=41.115;FS9 =19.528;P均＜0.01);亚硝化鱼露及经S9系统代谢活化后的鱼露组处理突变体频率均显著高于溶剂对照组(P＜0.05或P＜0.01),且存在剂量-效应关系(S9-:r 亚硝化鱼露=0.986,P＜0.05;S9 :r鱼露=0.950,P=0.05;r亚硝化鱼露=0.997,P＜0.01);而未经S9系统活化的鱼露处理组与溶剂对照组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:鱼露经亚硝化后对CHO/HGPRT位点有致突变作用,经S9系统活化后可能也有此作用.     

临床肿瘤治疗药物相关基因的研究进展

肿瘤化学药物治疗已经在临床上得以广泛应用，但患者对各类治疗药物的敏感性和不良反应存在明显个体差异，药物相关基因指导下的临床肿瘤药物的个体化治疗是肿瘤治疗最重要的发展方向之一。本文主要介绍了5个与临床抗肿瘤药物疗效及毒性相关的基因：二氢嘧啶脱氢酶(DPD)基因突变与5-氟尿嘧啶(5-Fu)的毒性反应；表皮生长因子受体(EGFR)突变与非小细胞肺癌(NSCLC)中吉非替尼、特罗凯的疗效；核苷酸切除修复酶1(ERCC1)基因多态性与铂类化合物疗效；UDP葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)的遗传变异与羟基喜树碱的毒性反应；胸腺酸合成酶(TS)基因多态性与5-Fu的敏感性，探讨如何预测肿瘤治疗药物的敏感性及不良反应，以指导临床个体化用药。     

T790M的突变富集PCR检测方法和克隆演化假设

3背景·吉非替尼在临床部分非小细胞肺癌（nonsmall cell lungcancer，NSCLC）患者中取得了较好的疗效．但几乎所有的患者最终将发生耐药。     

原发性肝癌中线粒体DNAD—Loop区突变的研究进展

肿瘤的发生涉及多因素多环节过程，研究认为肿瘤的生物学特征不仅取决于核内遗传物质，而且还与核外的线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）关系密切。线粒体与肿瘤发病关系的研究可追溯到20世纪70年代以前，但过去的研究主要集中在肿瘤细胞线粒体的形态和能量代谢等方面，80年代后，由于mtDNA的发现，人们迅速把目光转向mtDNA突变与肿瘤关系的研究上。目前已在多种实体肿瘤细胞中发现mtDNA突变和不稳定性等变化，但在肿瘤发生和发展过程中具体的机制及生物学意义尚不清楚。     

APS-Ⅰ早期确诊方法(附1例病例报道)

目的:探讨自身免疫性多内分泌腺病综合征Ⅰ型(APS-Ⅰ)的早期确诊方法.方法:报道1例中国APS-Ⅰ病例,结合国外72例APS-Ⅰ患者的表型和基因型进行分析.结果:APS-Ⅰ除3种典型表现外,尚可合并20余种其他病症,临床表现复杂,依靠传统的诊断方法易误诊;APS-Ⅰ的致病基因为自身免疫调节因子(AIRE)基因,对可疑患者积极进行基因检测可明确诊断.结论:APS-Ⅰ比较罕见,基因检测町早期确诊临床进展不典型的APS-Ⅰ.     

中国汉族瘢痕疙瘩家系易感基因位点的定位分析研究

目的 定位中国汉族瘢痕疙瘩家系的易感基因位点.方法 采集2个4代发病的中国汉族瘢痕疙瘩大家系51例成员的外周静脉血样.提取基因组DNA;假定Fas基因为该家系致病基因的候选基因位点.选取位于10q23.31上Fas基因周围共约10Mbp范围内与细胞凋亡障碍有关的已知基因相邻的微卫星标记D10S1687、D10S1765、D10S1735和D10S1562,对这些微卫星位点进行PCR扩增,产物片断基因分型,再进行连锁分析.结果 在重组率θ=0～0.5时,这些微卫星标记的两点LOD值绝大部分都小于1,排除连锁关系存在.结论 研究发现中国汉族瘢痕疙瘩家系易感基因位点不在染色体10q23.31区域.     

线粒体DNA G13513A突变所致线粒体脑肌病伴高乳酸血症和脑卒中样发作/Leigh重叠综合征

目的 报道1例线粒体DNA G13513A点突变所致线粒体脑肌病伴高乳酸血症和脑卒中样发作(MELAS)/Leigh重叠综合征的临床、影像学、神经病理学改变特点.方法 患者为22岁女性,反复出现头痛、视力下降和肢体抽动11年,因癫疴持续状态而死亡.之前多次MRI检查发现大脑皮质大片长T1长T2异常信号,病灶从枕叶开始,逐渐波及顶叶,疾病后期累及双侧基底节区及脑干灰质核团.对患者进行脑局部尸体解剖检查,取肌肉标本进行线粒体基因检查.结果 各个脑叶皮质以及双侧纹状体和中脑四叠体可见多灶性层样分布的海绵样改变,出现胶质增生、毛细血管内皮细胞增生以及较多单核细胞反应,其中双侧枕叶和顶叶的皮质全层以及皮质下白质被严重累及.基因检查显示线粒体还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶5基因存在G13513A点突变.结论 MELAS/Leigh重叠综合征的临床表现以皮质损害为主,影像学改变提示病变先累及大脑皮质,而后累及脑干和基底节区,出现海绵样改变伴随毛细血管增生.     

中国10个全面性癫痫伴热性惊厥附加症家系的临床特征分析

目的探讨中国全面性癫痫伴热性惊厥附加症(generalized epilepsy with febrile seizure plus,GEFS+)家系的临床特征。方法通过门诊就诊、个人访视、电话等方式,对10个GEFS+家系所有成员进行详细临床资料收集,包括家系图谱、有无发作、发作形式以及检查结果等。结果10个家系共有140名成员接受了调查(其中3名去世,由亲属提供病史),发现受累者80例,其中74例符合GEFS+临床发作谱,2例为特发性全面性癫痫,4例不能明确分类。其中有两个家系较为特殊(家系I和家系H),2个家系受累者绝大部分仅表现为热性惊厥(febrile seizure,FS),每个家系仅有先症者1人表现为热性惊厥附加症(febrile seizure plus,FS+)。此外还发现3例FS+伴局灶性发作,2例为FS+伴儿童良性癫痫伴中央颞部棘波,1例为FS+伴颞叶癫痫。结论GEFS+是一种常见的、儿童时期起病的遗传性癫痫综合征,GEFS+最常见的表型为FS和FS+,其次是FS+伴局灶性发作、FS伴IGE、FS+伴失神发作以及FS+伴肌阵挛发作,我们的10个GEFS+家系中未发现FS+伴失张力发作、肌阵挛站立不能性癫痫和婴儿严重肌阵挛癫痫,说明这些表型为临床少见表型;此外我们还发现了GEFS+合并IGE以及在FS遗传背景上仅个别患者为FS+的较特殊家系,这些将进一步扩展GEFS+的概念。     

门诊治疗患儿病情突变的观察及急救护理

现将2006年1月～2007年12月间门诊护理工作中对病情突变患儿的护理体会总结如下. 1 临床资料