Experimental study on the effect of Kang-Lai-Te induced apoptosis of human hepatoma carcinoma cell HepG2

BACKGROUND:Kang-Lai-Te(KLT)is extracted from the traditional Chinese herbal medicine Semen Coicis,which has been used in China as an effective clinical drug for over a thousand years.It contains numerous ingredients with anti-tumor effects.In our previous studies on transplanted hepatomas in rats,KLT could stop the cells in the G2+M stage of cell cycle and then reduce the number of cells entering the stage G0 and G1,but the mechanism of the anti-proliferative effect was unknown.In this experiment,we examine...     

自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化患者肝组织和外周血单个核细胞Fas及FasL的检测

目的 观察自身免疫性肝炎(AIH)和原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝组织和外周血单个核细胞(PBMC)Fas、FasL的表达,探讨细胞凋亡在自身免疫性肝病(AILD)发病机制中的作用.方法 采用免疫组织化学技术对10例AIH、20例PBC患者肝组织和PBMC中Fas、FasL进行检测,正常对照为10例健康献血者.结果 AIH 患者PBMC中Fas、FasL检出率分别为100%和90%, Fas、FasL平均阳性细胞率分别为78%和65%;PBC患者PBMC中Fas、FasL检出率均为90%,平均阳性细胞率分别为62%和59%.在肝组织中Fas、FasL表达于肝细胞和淋巴细胞:9例AIH Fas阳性颗粒见于肝细胞浆,其中1例胞膜、胞浆同时阳性;8例FasL阳性颗粒表达于肝细胞浆;Fas、FasL阳性肝细胞多聚集于汇管区周围.同时在汇管区周围浸润的淋巴细胞中也可见Fas或FasL的阳性表达.17例PBC患者Fas阳性颗粒表达于肝细胞浆,其中4例胞膜、胞浆同时阳性;16例PBC FasL阳性,见于肝细胞浆,在肝组织中浸润的淋巴细胞浆中Fas、FasL均有表达.AIH和PBC患者Fas、FasL表达显著高于正常对照.结论 AIH和PBC患者的Fas、FasL表达增加,细胞凋亡可能在AIH和PBC的发病机制中起重要作用.     

完全弗氏佐剂预防链尿菌素引起糖尿病的机制研究

目的研究完全弗氏佐剂对链尿菌素(STZ)引起的糖尿病及胰岛炎免疫保护作用的机制。方法正常昆明种小鼠随机分为完全弗氏佐剂(CFA)组(A组)于腹腔内和双侧后跖部各注射CFA50μl,和对照组(B组),以同样方法注入等量的生理盐水。两周后均注射STZ(每公斤体重40mg/d,共5d),以血糖16.7mmol/L诊断为糖尿病,观察糖尿病的发病率,并在STZ注射后6周处死小鼠,观察胰岛β细胞和T细胞的Fas/FasL的表达。结果4周后糖尿病发病率,A组为0%,B组为80%(P<0.01);胰岛炎评分,A组为0.2,B组为2.52±0.48(P<0.01)。组织学检查示B组胰岛β细胞明显减少,并且胰岛内β细胞表达Fas,而A组胰岛数目明显较多,未见β细胞有Fas表达,两组胰岛浸润T细胞均有FasL表达。结论CFA显著抑制了T细胞在胰岛局部的聚集,同时抑制胰岛局部β细胞表达Fas,提示CFA抑制了免疫系统的激活或引起免疫抑制性细胞因子释放,抑制了β细胞表达Fas,避免了T细胞引起的β细胞凋亡,从而对胰岛局部β细胞起到免疫保护作用。     

雌激素对青春期大鼠Sertoli细胞及血睾屏障的影响

目的:研究在Sertoli细胞分化和成熟阶段,外源性雌激素对Sertoli细胞FasL表达以及血睾屏障的影响,进一步讨论影响血睾屏障的相关因素及其可能机制。方法:体内体外分别给与青春期SD大鼠大剂量的雌激素(二乙烯雌酚和雌二醇),运用免疫荧光方法和Western印迹观察Sertoli细胞内FasL的表达以及电镜下血睾屏障结构的变化。结果:外源性大剂量雌激素作用下,Sertoli细胞内FasL表达量明显增强(P<0.05);同时出现Sertoli细胞膜和生精上皮血睾屏障部位FasL的表达量上升;在18d实验组,电镜显示示踪剂镧透过血睾屏障,到达生精上皮全层。结论:外源性大剂量雌激素能使Sertoli细胞内FasL的表达量和分布区域发生改变并影响血睾屏障的结构。     

老年原发性非小细胞肺癌患者外周血T淋巴细胞Fas/FasL的表达及临床意义

目的 探讨T细胞表面凋亡分子Fas及其配体与老年原发性非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展之间的联系.方法 应用五色免疫荧光标记流式细胞术对63例老年NSCLC患者外周血T细胞表面Fas及FasL的表达进行检测,并与老年良性病变组(老年非癌组)、老年健康组以及年轻健康组进行比较,同时分析它们与临床病理特征之间的关系.结果 Fas及FasL在老年健康组外周血T细胞上的表达明显高于年轻健康组(P＜0.01);两者在老年非癌组中表达与老年健康组比较无统计学意义;Fas在老年肺癌组中表达显著高于老年健康组及老年非癌组(P＜0.01),而FasL在老年肺癌组中表达与老年健康组及老年非癌组比较无统计学意义;T细胞Fas的表达水平与老年肺癌的临床TNM分期、细胞分化程度以及淋巴结转移状态密切相关(P＜0.05或P＜0.01),而与病理类型无关.结论 呈增龄性上调的T细胞表面Fas抗原在老年人原发性肺癌的形成和演变过程中发挥着重要作用.     

FasL系统在妊高征胎盘中的表达

目的检测凋亡诱导蛋白Fas及其配体FasL在妊娠高血压综合征(PIH)胎盘中的表达,探讨FasL系统在PIH发病中的作用。方法应用免疫组化法检测10例正常足月孕妇及10例重度PIH孕妇胎盘组织中Fas、FasL的表达,并应用BI-2000医学图像分析系统对其表达进行定量分析。结果两组胎盘绒毛滋养细胞均有Fas、FasL表达,其表达量比较,差异有显著性。PIH组绒毛滋养细胞FasL表达的平均灰度、染色面积比分别为(93·390±7·600)、(0·060±0·019),明显低于正常妊娠组(73·104±7·788)、(0·121±0·019),两组间差异有显著意义(P<0·05);PIH组胎盘绒毛滋养细胞Fas表达的平均灰度、染色面积比分别为(75·212±4·688)、(0·120±0·009),明显高于正常妊娠组(97·445±6·019)、(0·057±0·011),两组差异有极显著意义(P<0·01)。结论PIH时胎盘中FasL表达下调,Fas表达增加。FasL系统表达异常可能参与PIH的发病。     

兔肺动脉栓塞/再灌注损伤中肺泡细胞凋亡及其Fas/FasL表达的变化

目的:观察兔肺动脉栓塞/再灌注损伤中肺泡细胞凋亡及其Fas及FasL蛋白表达的变化,探讨肺损伤的可能机制.方法:健康新西兰白兔30只,雌雄不拘,运用5F Berman球囊堵塞左下肺动脉,然后球囊放气,复制肺动脉栓塞缺血再灌注模型,随机分为5组(n=6):假手术组,肺动脉栓塞1 h组、肺动脉栓塞2 h组,肺动脉栓塞2 h再灌注1 h组、肺动脉栓塞2 h再灌注2 h组;另设6只正常未手术白兔为对照组.实验结束取肺组织,测定肺组织湿/干重比,采用流式细胞分析法检测肺组织细胞凋亡率,免疫组织化学法检测肺上皮细胞Fas及FasL蛋白表达的变化.结果:与对照组、假手术组相比,肺动脉栓塞1、2 h组兔肺组织细胞凋亡率明显增加,再灌注后凋亡细胞进一步增多,并随着再灌注时间延长而逐渐增多(P＜0.05或0.01);Fas及FasL蛋白表达在肺动脉栓塞及再灌注后明显上调(P均＜0.01).肺泡上皮细胞凋亡指数与肺组织湿干比、Fas及FasL蛋白表达呈显著正相关(r分别为0.769,0.820,0.820;P＜0.01).结论:肺动脉栓塞缺血/再灌注可能通过激活Fas/FasL系统,诱导肺组织细胞凋亡,从而导致肺损伤的发生.     

p,p’-DDE对离体培养支持细胞DNA损伤与FasL基因表达的影响

目的研究p,p’-DDE对离体培养支持细胞DNA损伤与FasL基因表达的影响。方法从大鼠睾丸组织中分离支持细胞进行离体原代培养3天,加入不同浓度p,p’-DDE继续培养24h,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)和反转录聚合链式反应(RT-PCR)研究p,p’-DDE诱导支持细胞DNA损伤和FasL基因表达。结果发现支持细胞DNA迁移度随着p,p’-DDE剂量的增高而增高,同时FasL的基因表达水平也随之增高。结论p,p’-DDE可诱导支持细胞DNA损伤和FasL基因表达,pp’-DDE可能是通过Fas/FasL途径诱导支持细胞损伤,破坏生精过程的动态平衡,最终导致精子减少。     

产前束缚应激对子代大鼠听力及耳蜗核Fas／FasL表达的影响

目的 确定产前束缚应激刺激对子代大鼠听性脑干反应(Auditory Brainstem evoked Response,ABR)和耳蜗核中Fas和FasL表达的影响.方法 在母鼠怀孕的13～19d,每天进行3次束缚应激,每次45min.大鼠7天龄时测ABR和对脑组织切片应用免疫组化方法检测耳蜗核中Fas和FasL的表达.结果 S组ABR反应阈为59±7.18dB nHL,对照组ABR反应阈为30±5.68dB nHL.S组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ波潜伏期及Ⅰ～Ⅱ、Ⅱ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅲ波间期明显延长.应激组Fas的表达强于对照组(P＜0.05),FasL的表达强于对照组(P＜0.05),Fas和FasL的表达两组间没有显著性差异(P＞0.05).结论 产前束缚应激刺激可使子代大鼠耳蜗核神经元中Fas/FasL表达上调,并引起耳蜗核细胞凋亡的发生,从而使子代大鼠ABR阈值升高和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ波潜伏期及Ⅰ～Ⅱ、Ⅱ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅲ波间期延长,因而产前慢性应激对子代听力有损伤.