银杏外种皮中银杏酸的体外抗肿瘤活性研究

目的:探讨银杏酸对肿瘤细胞和正常细胞生长的影响.方法:从银杏外种皮中制备纯度90%的银杏酸同系混合物.采用MTT法,检测银杏酸对各细胞株生长的抑制作用.结果:银杏酸浓度为5.0μg/ml时,对肿瘤细胞生长都有明显的抑制作用,其中对肺癌LTEP-a-2细胞抑制率达到59.1%,而对正常细胞无影响;高浓度银杏酸对正常细胞和肿瘤细胞生长的抑制作用趋于一致.结论:银杏酸对体外培养的肿瘤细胞有较强抑制作用,浓度低于5.0μg/ml时对正常细胞生长无影响.     

西红花酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究西红花酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制.方法 梗死模型,结扎大鼠左前降支冠状动脉45 min,再灌注180 min测定心肌梗死率,并于缺血前和再灌注5、60、180 min测定血清中的肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.顿抑模型,结扎大鼠左前降支冠状动脉15 min,再灌注180 min测定缺血和非缺血心肌组织中Na ,K -ATP酶、Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性、总腺苷酸(TAC)的量、能荷(EC)和血清中丙二醛(MDA)的量.并于缺血前、缺血末.再灌注5、30、90、180 min时测定心率、左心室内收缩压、舒张压、射血分数、最大和最小左心室内压变化速率(±dp/dt)、最大和最小左心室容积变化速率(±dV/dt)以及每搏功.结果 缺血前或者再灌注前给予西红花酸能够显著降低心肌梗死率.呈剂量依赖关系;并且降低血清中CK和LDH的活性.50 mg/kg西红花酸可以改善心脏功能,减轻心肌顿抑的程度,升高心肌组织ATP的量及EC.结论 西红花酸可以有效抑制因心肌缺血和再灌注引发的心肌梗死,缓解心肌顿抑,西红花酸可能是通过改善心肌能量代谢发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用的.     

C端融合RGD三肽的重组L-门冬酰胺酶基因克隆、表达和对血液系统的影响

利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌，获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸，ArgGly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD)，以改进L-门冬酰胺酶的作用。以pUA18为模板，利用pUC18上游普适引物和根据L-门冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)C末端下游序列设计的引物来扩增目标基因。将目标基因连于pMD18-T载体，转化宿主菌JM109，筛选出的阳性克隆通过HindⅢ、NcoⅠ双酶切下目标基因连到含T7启动子的高效表达载体pET28a上，再转化BL21宿主菌。高效表达的工程菌摇瓶发酵，渗透休克法提取AnsB-RGD融合蛋白，12％的SDS-PAGE检测酶蛋白并考察酶的活力、特异性及其对血液系统的影响。2％琼脂糖凝胶电泳、DNA测序鉴定构建的pET28a．ansB．RGD工程菌，奈氏法、SDS-PAGE及免疫学方法检测AnsB-RGD融合蛋白。DNA序列分析证明RGD三肽已经连接在L-门冬酰胺酶的C末端，带有RGD三肽的融合蛋白仍然能与抗L-门冬酰胺酶的抗体结合，初步发现AnsB-RGD融合蛋白有促进血液凝固作用，但酶活力下降。     

西红花酸对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用

目的 研究西红花酸对异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血的保护作用及机制。方法 采用大剂量ISOsc诱导产生大鼠急性心肌缺血模型(1SO30mg／kg，每日一次，连续2d)，实验大鼠随机分为正常组、ISO模型组、阳性对照组和3个西红花酸给药组(25，50，100mg／kg)，测定心脏系数和血清中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)和丙二醛(MDA)含量，观察心肌组织谷肮甘肤过氧化物酶(GSH—Px)、Na^ ，K^ —ATP酶和Ca^2 ，Mg^2 —ATP酶活性及心脏病理改变，观察西红花酸的保护作用。结果 西红花酸能显著降低血清中CK和LDH的释放；也能显著降低血清和心脏匀浆中MDA水平，心脏重量参数显示对心肌水肿有明显的抑制作用；保护心肌GSH—Px；Na^ ，K^ —ATP酶和Ca^2 ，M8^2 -ATP酶活性，心脏病理切片表明西红花酿对心肌坏死有显著的保护作用。结论 西红花酸对ISO所致急性心肌缺血有显著的保护作用。     

西红花酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究西红花酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制.方法 梗死模型,结扎大鼠左前降支冠状动脉45 min,再灌注180 min测定心肌梗死率,并于缺血前和再灌注5、60、180 min测定血清中的肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.顿抑模型,结扎大鼠左前降支冠状动脉15 min,再灌注180 min测定缺血和非缺血心肌组织中Na ,K -ATP酶、Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性、总腺苷酸(TAC)的量、能荷(EC)和血清中丙二醛(MDA)的量.并于缺血前、缺血末.再灌注5、30、90、180 min时测定心率、左心室内收缩压、舒张压、射血分数、最大和最小左心室内压变化速率(±dp/dt)、最大和最小左心室容积变化速率(±dV/dt)以及每搏功.结果 缺血前或者再灌注前给予西红花酸能够显著降低心肌梗死率.呈剂量依赖关系;并且降低血清中CK和LDH的活性.50 mg/kg西红花酸可以改善心脏功能,减轻心肌顿抑的程度,升高心肌组织ATP的量及EC.结论 西红花酸可以有效抑制因心肌缺血和再灌注引发的心肌梗死,缓解心肌顿抑,西红花酸可能是通过改善心肌能量代谢发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用的.     

西红花酸对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究西红花酸对小鼠脑缺血再灌注（CIR）损伤的保护作用。方法：采用CIR模型,观察西红花酸对CIR小鼠脑水肿、脑毛细血管通透性及脑组织中乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱苷肽过氧化酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）、NO含量的影响。结果：与CIR模型组比较,西红花酸（50、100mg／kg）连续5d灌胃能减少CIR小鼠脑组织含水量、伊文思蓝和MDA、NO含量,提高脑组织中LDH、SOD、GSH-PX活性,差异具有统计学意义。结论：西红花酸对小鼠CIR损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与西红花酸抗氧化、降低NO含量有关。     

西红花酸对高脂血症家兔LDL氧化易感性及血清Ox-LDL水平的影响

目的:观察西红花酸对高脂血症家兔低密度脂蛋白(LDL)氧化易感性及血清氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)水平的影响,并探讨其可能机制。方法:采用喂饲高脂饲料方法建立家兔高脂血症模型,ELISA法测定血清Ox-LDL水平;分离LDL,体外测定其氧化易感性;测定血清总抗氧化能力(TAC)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性。结果:西红花酸能显著降低高脂血症家兔LDL氧化易感性和血清Ox-LDL水平;西红花酸30mg·kg^-1能明显降低血清TC,TG,LDL-C水平,而15mg·kg^-1对血脂水平无明显影响,高,低剂量组皆可显著提高血清TAC及SOD,GPX活性。结论:西红花酸能明显降低高脂血症家兔LDL氧化易感性及血清Ox-LDL水平,其机制与提高血清SOD,GPX活性、提高血清TAC有关。     

线粒体Prohibitin蛋白在紫杉醇耐药的CCRF-CEM

目的：研究线粒体prohibitin蛋白在紫杉醇耐药的CCRF-CEM细胞中的表达变化，探讨线粒体prohibitin蛋白在CCRF-CEM肿瘤细胞耐药发生机制中的作用。方法：提取紫杉醇耐药的CCRF-CEM/taxol细胞的线粒体总蛋白，对经双向电泳分离后得到的SDS-PAGE胶用ImageMaster§TM 2D Platinum software进行分析、比对，对胶上的蛋白点进行质谱分析，通过SWISS-PROT和NCBInr数据库鉴定蛋白的归属。结果：紫杉醇耐药的CCRF-CEM/taxol细胞中的线粒体prohibitin Protein15表达升高了68.6%（以蛋白表达的体积计）。结论：紫杉醇耐药的CCRF-CEM/taxol细胞中线粒体prohibitin表达增加。prohibitin可能通过调节线粒体的活动，对抗紫杉醇诱导的细胞凋亡，在耐药机制中发挥重要作用。     

西红花酸对大鼠实验性动脉粥样硬化的影响

目的研究西红花酸对大鼠实验性动脉粥样硬化的影响。方法采用给予大剂量维生素D2(VD2)后饲喂高胆固醇饲料诱发大鼠实验性动脉粥样硬化模型，测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。取主动脉和肝脏做病理切片检查。结果高、低剂量的西红花酸能显著降低动脉粥样硬化大鼠血清TC、LDL-C和MDA含量；显著升高血清HDL-C含量、SOD活性和抗动脉粥样硬化指数(AAI)。病理切片结果表明，西红花酸能明显减轻模型大鼠动脉粥样硬化性损伤。结论西红花酸具有显著的抗大鼠实验性动脉粥样硬化作用。     

拉米夫定对猪呼吸繁殖综合征病毒的体外抑制作用研究

目的 研究拉米夫定体外对猪呼吸繁殖综台征病毒(PRRSV)的抑制作用,并为今后深入研究其作用机理提供分析物。方法 采用体外细胞培养,采用CPE法观察拉米夫定抑制PRRSV对Marc145细胞的致病力,确定其抗病毒作用强度。结果 拉米夫定体外对PRRSV具有较好的抑制作用,其有效浓度范围在5～20μg/ml,且预防性用药效果优于感染后用药。结论拉米夫定对PRRSV病毒有较好的抑制作用。