重组人胰高血糖素样肽-1类似物的制备及活性分析

通过重叠PCR的方法获得重组人胰高血糖素样肤-1( GLP-1)类似物PP-h[ Gly8] GLP-1的目的基因片段,将该基因与融合表达载体pED连接,并在融合伴侣的N末端插入6×His标签,转入Ecoli BL21 (DE3),构建出重组GLP-1类似物融合表达菌.PP-h[ Gly8] GLP-1通过Ni离子亲和...     

表面呈现技术及应用

用表面呈现技术构建文库并从中筛选新的生物活性物质，如抗体、受体或疫苗，已成为研究生物新药的捷径之一。文章就原理及相关应用对各种表面呈现技术进行了综述。     

右旋糖苷及PEG—2对大肠杆菌L—天冬酰胺酶的化学修饰

本文综述了活化右旋糖苷和含有两条聚乙二醇链的ＰＥＧ－２对大肠杆菌Ｌ－天冬酰胺酶的化学修饰。修饰酶可保持５０％酶活，并且明显提高了抗胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶水解的能力，降低对特异的天冬酰胺酶抗体的敏感性，体内实验还表明修饰酶在动物体内循环持久性延长，使之更适于作为治疗药物。     

大肠杆菌L—天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达

用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因两侧序列互补的寡核苷酸Ｅ１，Ｅ２６和引物，以大肠杆菌野生株ＣＰＵ２１０００９的染色体ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ扩增得到约１．２ｋｂ的ＣＤＮＡ片段，将此片段插入ＰＫＫ２３３－２的ｔａｃ启动子下游，转化不同的大肠杆菌宿主菌株，结果表明以ＣＰＵ２１０００９为宿主菌时，转化子的酶表达量最高，重组Ｌ－天门冬酶胺酶占菌体总蛋白４８．３％，发酵液酶活力达４００ＩＵ／ｍｌ，比活为４     

促性腺激素释放激素类似物对肿瘤细胞增殖的抑制效应

研究促性腺激素释放激素类似物（GnRH analogue，GnRHa）抑制肿瘤细胞增殖的效应将为治疗癌症提供新方法。1．促性腺激素释放激素受体（GnRH receptor，GnRH—R）在肿瘤组织上的分布：人类的许多恶性肿瘤都表达GnRH—R受体。2．GnRHa对肿瘤细胞增殖的抑制作用：GnRHa不仅能够抑制激素依赖忡肿瘤的大部分细胞系增殖，而日肩B够抑制非激素依赖性肿瘤的一些细胞系增殖。3．GnRHa抑制肿瘤细胞增殖的分子机制：GnRHa的生物效应是通过阻碍生长因子受体介导的促有丝分裂信号传导发挥生物效应。     

用循环式生物反应器酶法生产L—丙氨酸

用固定化德阿昆合假单孢菌体的Ｌ－天门冬氨酸－β脱羧酶，在新设计的生物反应器中转化Ｌ－天门冬氨酸生成Ｌ－丙氨酸。该反应器能不断缓慢溶解固体Ｌ－天门冬氨酸，使反应系统的ｐＨ和底物浓度维持恒定。用８０ｇ固定化菌体为酶源，在６９ｈ内能将４．２ｋｇＬ－门天冬氨酸全部转化成Ｌ－丙氨酸，且仅消耗较少的ＰＬＰ和氨水。     

CpG寡聚脱氧核苷酸在灵长类动物中免疫调节活性的研究进展

包含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(ODN)具有类似于微生物DNA激活内在免疫系统的能力，可提高适应性免疫力而抑制传染性生物的早期传播。CpG ODN在疫苗佐剂的设计以及哮喘、过敏、传染病和癌症的治疗中显示出良好的应用前景。由于CpG识别体系在进化中出现的种间差异，在啮齿类动物中表现出最强活性的CpG ODN却无法有效地刺激灵长类动物产生免疫应答。已有大量证据表明CpG ODN在小鼠中具有治疗活性，而其在灵长类动物中作用的研究仍需继续深入。现就作用于灵长类动物的CpG ODN的分类、作用机制和其作为疫苗佐剂与免疫保护剂以及在癌症、过敏和哮喘等多种疾病治疗上的应用研究进行综述。     

大肠杆菌L—天门冬酰胺酶的提取和纯化

用蔗糖溶液提取菌体细胞周质中的天门冬酰胺酶，所获得的粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维柱层析和羟甲基纤维素柱层析纯化，获得了比活为220IU/mg，SDS-PAGE显示一条带的L-天门冬酰胺酶。     

菊欧氏杆菌产生新抗生素Echcin I的化学结构分析

Ｅｃｈｃｉｎ Ｉ是一种新的广谱抗生素，ＥＩ／ＭＳ谱显示Ｅｃｈｃｉｎ Ｉ的分子离子峰为６５４，ＦＡＢ／ＭＳ和ＳＣＩ／ＭＳ谱均有一强的６５５峰（Ｍ＋Ｈ）＾＋，根据高分辨质谱和元素分析结果显示Ｅｃｈｃｉｎ Ｉ的分子式为Ｃ４０Ｈ８７ＯＮ５，精确分子量为６５３．６８５６。Ｅｃｈｃｉｎ Ｉ的紫外吸收为１８９ｎｍ；主要的红外吸收峰是３３６７，３２８２，１６０５（－ＮＨ２）；２９２０，２８４９（－ＣＨ２－），７２     

人源血管内皮生长因子突变体的克隆、分离纯化及活性研究

目的：为获得大量人源血管内皮生长因子突变体（hVEGF121’）的重组蛋白，本文研究了其发酵条件，分离纯化方法．并初步考察了其生物活性。方法：应用PCR介导的定点突变方法，将hVEGF121中对其活性影响较小的1-8位和115～12l位两个肽段替换成破伤风毒素（TT）的两个强表位肽段618-627位和831-837位，构建高效表达的pET28a／hVEGF121’重组质粒，考察诱导条件对目的蛋白表达量的影响；所得包含体经过DEAE-Cellulose离子交换柱纯化；初步比较了VEGF121和突变体VEGF121’的免疫和杭肿瘤效果。结果：最佳表达条件为：乳糖诱导时间6h，诱导浓度2mmol／L；离子交换纯化后可得到电泳纯的突变体hVEGF121’；初步的动物免疫发现突变体VEGF121’和VEGF121有相近的免疫滴度，但前者杭肿瘤效果更显著。结论：经发酵纯化后得到重组人源血管内皮生长因子突变体（hVEGF121’）的纯品，并初步展现良好的抗肿瘤效果.