环烯醚萜苷对大鼠脑梗死后NF-κB与凋亡调节因子Bcl-2/Bax表达变化的影响

目的观察光化学法诱导大鼠脑梗死形成过程中核转录因子(Nuc lear factor-kappa B,NF-κB)与凋亡调节因子Bax和Bc l-2表达的变化,并探讨山茱萸环烯醚萜苷(iridoid gly-coside,IG)对这一过程的影响。方法大鼠预先灌胃给药7d后,制作光化学致脑梗死模型,采用免疫组织化学法检测脑组织中NF-κB表达的变化,W estern b lot技术检测凋亡调节因子Bax和Bc l-2表达的变化。结果模型组与对照组相比,脑皮层内NF-κB和Bax蛋白表达增多,Bc l-2蛋白表达减少。与模型组相比,IG能够明显的减少NF-κB和Bax蛋白表达,增高Bc l-2蛋白的表达。结论IG可通过影响脑内NF-κB和凋亡调节基因的表达而发挥对脑梗死的治疗作用。     

莫诺苷抑制H2O2诱导的神经细胞凋亡

目的：研究莫诺苷对氧化应急诱导的神经细胞凋亡的影响。方法：培养的人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）神经细胞加入莫诺苷（1，10，100μmol·L^-1）预孵育24h，加入H2O2（500μmol·L^-1）作用18h诱导产生氧化损伤，测定对细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响；用Westernblot方法检测caspase-3，caspase-9，Bcl-2和Bax的表达。结果：莫诺苷（10，100μmol·L^-1）抑制氧化损伤，与模型组相比，SOD活性分别增加了14％（P〈0．01）和11％（P〈0．05）；莫诺苷（1，10，100μmol·L^-1）与模型组相比，caspase-3的含量分别减少了31％（P〈0．01），103％（P〈0．001）和95％（P〈0．001），caspase-9的含量分别减少了71％（P〈0．001），132％（P〈0．001）和37％（P〈0．05），Bcl-2分别增加了88％（P〈0．01），121％（P〈0．001）和60％（P〈0．01），对Bax没有影响。结论：莫诺苷可通过抗氧化作用抑制H2O2诱导的神经细胞凋亡，具有神经保护作用。     

多巴胺能系统亢进法建立拟抽动秽语综合征小鼠模型

目的经多巴胺能系统亢进的方法建立并评价拟抽动秽语综合征小鼠模型.方法经硫酸苯丙胺3 mg/kg单次腹腔注射和阿朴吗啡2 mg/kg单次皮下注射建立小鼠模型.经攀爬行为、自主活动次数以及纹状体内单胺类神经递质及其代谢产物含量的测定对两种小鼠模型加以检测和评价.结果苯丙胺模型组小鼠5 min内的自主活动次数为237.07,较对照组增加51.04%,纹状体内多巴胺含量较对照组升高28.33%;阿朴吗啡可引起模型小鼠的特殊攀爬行为,在各测定时段内的握杆时间均较对照组明显延长.结论苯丙胺小鼠模型和阿朴吗啡小鼠模型都能够部分模拟临床抽动秽语综合征病人的神经生化或行为学改变,二者可以作为药物初步筛选的平台.     

D-半乳糖致脑老化小鼠的物体识别能力障碍研究

目的应用物体识别方法研究D 半乳糖长期注射致脑老化小鼠模型的学习记忆能力 ,并比较物体识别方法与Morris水迷宫方法对该模型测试的灵敏性。方法C5 7BL/ 6小鼠 ,随机分成正常对照组、D 半乳糖低剂量组 (5 0mg/kg ,sc)、D 半乳糖高剂量组 (10 0mg/kg ,sc) ,连续造模 8周。以物体识别方法和Morris水迷宫方法测试各组动物的学习记忆能力。结果在物体识别测试中 ,D 半乳糖高剂量组分辨指数 (15 .71± 3 .94)较对照组 (4 5 .89± 7.41)减低具有非常显著性意义 (P <0 .0 0 1) ,低剂量分辨指数(2 4.69± 6.2 5 )与对照组的差异也存在显著性意义 (P <0 .0 5 )。在Morris水迷宫测试中 ,D 半乳糖高剂量组动物逃逸潜伏期比对照组延长有显著性意义 (P <0 .0 1) ;高剂量组在目标象限空间探索所停留时间与游泳距离比均较正常对照组减少有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论D 半乳糖可导致小鼠出现显著的物体识别能力障碍 ,用物体识别测试方法比Morris水迷宫方法更灵敏地反映该模型小鼠的学习记忆障碍。     

东莨菪碱大鼠脑内胆碱乙酰转移酶的改变

目的：观察不同剂量的东莨菪碱对大鼠脑内胆碱乙酰转移酶活性的影响。方法：采用Wistar大鼠随机分为：对照组（Con），东莨菪碱（Sco）0．5、1、2mg／kg共4组，每组6只。Con组每天腹腔注射生理盐水，Sco组腹腔注射不同剂量的东莨菪碱，连续4天，末次给药15分钟后，即断头取脑，冰浴下分脑皮层和海马，立即液氮冻存，-80℃保存，胆碱乙酰转移酶（ChAT）活性测定，采用Fonnum的方法，脑组织按1：10匀浆，每个样品做两个管：空白管，结合管，均各加入50ul的脑匀浆液，空白管沸水浴使酶失活，两管均加入50ul的反应液，然后加入非标记乙酰辅酶和3H标记辅酶CoA，37℃孵浴后，加入终止液4℃停止反应；加入闪烁液，摇匀静止后液闪仪测定比活度值，结合匀浆液的蛋白浓度计算出ChAT活性（nmol／mg）。结果：东莨菪碱腹腔注射组的大鼠脑皮层ChAT活性高于对照组（生理盐水组），东莨菪碱2mg／kg组与对照组比较有显著差异，大鼠海马区实验结果显示：东莨菪碱腹腔注射组海马中ChAT活性均低于对照组，2mg／kg组与对照组有显著差异，结论：东莨菪碱腹腔注射可以降低海马组织中ChAT活性。提示东莨菪碱可能通过降低大鼠脑内M受体密度而导致大脑ChAT活性下降。     

莫诺苷对SH-SY5Y神经细胞生长的影响及对过氧化氢诱导损伤的保护

目的研究从中药山茱萸分离提取的有效成分莫诺苷对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响及对H2O2诱导SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用。方法对培养的SH-SY5Y细胞加入不同浓度的莫诺苷,以MTT代谢率为指标确定无毒范围以及莫诺苷促进神经细胞生长的最佳有效浓度;对培养的SH-SY5Y细胞加入最佳有效浓度的莫诺苷,观察MTT代谢率、细胞轴突长度及胞体面积、细胞计数的改变;H2O2500μmol/L诱导SH-SY5Y细胞损伤,加入不同浓度的莫诺苷及维生素E,以WesternBlotting检测神经生长因子（NGF）的表达。结果莫诺苷在10～100μmol/L浓度范围内均可增加SH-SY5Y细胞的存活率;培养的SH-SY5Y细胞分别加入10μmol/L莫诺苷,与正常对照组相比,莫诺苷组组MTT代谢率升高（P〈0.05）,细胞轴突长度显著增长（P〈0.001）,胞体面积明显增加（P〈0.01）,细胞计数增加（P〈0.05）;H2O2损伤后,莫诺苷组NGF的表达明显高于对照组（P〈0.01）。结论莫诺苷对SH-SY5Y细胞的生长有促进作用,并对H2O2诱导的损伤有神经保护作用。     

金童颗粒治疗抽动秽语综合征模型小鼠的药效学研究

目的观察金童颗粒治疗实验性抽动秽语小鼠模型的药效学作用。方法采用苯丙胺腹腔注射及阿朴吗啡皮下注射方法建立拟抽动小鼠模型，将动物随机分为正常对照组、模型组、金童颗粒大、小剂量组和氟哌啶醇对照组，观察动物的自主活动和攀爬行为，检测动物脑纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量。结果在苯丙胺模型中，金童颗粒组小鼠的自主活动和纹状体内多巴胺含量低于模型组（P〈0．05）；在阿朴吗啡模型中，金童颗粒组小鼠异常攀爬时间较模型组缩短（P〈0．05）。结论金童颗粒能够改善拟抽动模型小鼠异常增高的自主活动，降低其纹状体内多巴胺含量。     

PBL与临床案例结合促进内科教学的思考

PBL教学法与案例教学相结合,发挥两种教学方式的优势,即可以强化基本理论知识的学习,提高学生自主学习的能力;又可以从案例教学中探索疾病发生发展的病理生理学过程,从问题到思考,从理论到临床,达到深化理论强化实践的真正统一。     

拟抽动秽语综合征大鼠模型的复制及再评价

目的复制拟抽动秽语综合征大鼠模型并对其进行较为全面的评价,以建立治疗此征的新型实验平台。方法将45只SD大鼠,用亚氨基二丙腈腹腔注射的方法制备拟抽动秽语综合征模型,观察动物刻板行为,应用旷场分析测定动物空间认知力和中枢兴奋性,应用攀网实验测定大鼠肌力和运动协调性,应用高效液相色谱法测定大鼠纹状体内多巴胺含量,用放射性配基法测定大鼠纹状体内Ⅱ型多巴胺受体亲和力。结果模型组大鼠出现明显刻板行为;中央格时间延长,跨格次数增多;纹状体内多巴胺(dopa-mine,DA)含量无明显改变,但高香草酸(homovanillic acid,HVA)含量显著增加(P0.01),Ⅱ型多巴胺受体亲和力明显升高(P0.05)。结论此大鼠模型能够较好模拟抽动秽语综合征患者的行为学和神经生化改变,可以作为新型实验动物平台。     

莫诺苷对脑缺血再灌注大鼠皮层梗死周边区基质金属蛋白酶表达的影响

目的研究莫诺苷对大鼠脑缺血再灌注3 d皮层梗死周边区基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。方法健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠15只随机分为假手术组(n=3),模型组(n=3),莫诺苷小剂量组(n=3)、中剂量组(n=3)及大剂量组(n=3)。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)30 min再灌注模型。术后3 h,莫诺苷各组予莫诺苷30 mg/kg、90 mg/kg、270mg/kg每天1次灌胃。术后3 d,免疫组化染色观察脑缺血皮层梗死周边区MMP-2、MMP-9表达。结果与假手术组比较,模型组皮层梗死周边区MMP-2、MMP-9表达明显著升高(P0.01)。与模型组比较,莫诺苷各组MMP-2、MMP-9表达明显降低(P0.01)。结论莫诺苷能降低大鼠脑缺血再灌注3 d皮层梗死周边区MMP-2、MMP-9的表达,从而保护血脑屏障功能。