血红素加氧酶-1对TNF-α引起内皮细胞炎症损伤的保护作用

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)导致肺微血管内皮细胞损伤中的保护作用。方法采用TNF-α刺激人肺微血管内皮细胞(HPMECs)模拟重症急性胰腺炎肺损伤的体外模型,锌原卟啉-IX(ZNPP-IX)作为HO-1抑制剂预处理细胞。试验分为对照组、TNF-α组、ZNPP-IX组。CCK8比色法检测细胞活性,采用Western blotting法及RT-PCR法检测HO-1、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,黏附试验检测HPMECs对多形核细胞(PMN)的黏附力。结果 1与对照组相比,TNF-α组(78.69%±5.54%)、ZNPP-IX组(62.00%±4.27%)细胞活性明显降低(P0.01);2与对照组相比,TNF-α组(1.59±0.19)HO-1表达增高(P0.05),ZNPP-IX组(0.01±0.01)比TNF-α组显著降低(P0.01);3与对照组相比,TNF-α组(32.72±0.95)、ZNPP-IX组(85.33±2.37)ICAM-1表达明显升高(P0.01),且ZNPP-IX组比TNF-α组更显著(P0.01);4TNF-α引起HPMECs对PMN黏附力增高,抑制HO-1表达后,黏附作用增强。结论 HO-1可能通过下调ICAM-1的表达降低炎症时HPMECs对PMN的黏附,从而改善重症急性胰腺炎引起的肺损伤。     

政府购买社区养老服务城乡供需现状比较分析

目的探讨政府购买社区养老服务在城镇和农村的供需特点,为制定养老服务政策、提供以需求为导向的养老服务提供参考。方法通过便利抽样选取温州市享有政府购买社区养老服务的老年人为调查对象,采用自制问卷对养老服务的供给和需求情况进行调查,分析城乡差异。结果分别调查城镇老年人439人,农村老年人397人。城镇老年人对生活照料、精神慰藉服务的需求高于农村老年人,对医疗保健服务的需求低于农村老年人(均P<0.01);城镇老年人医疗保健、精神慰藉服务供给率高于农村老年人,每月获得的服务次数、每次服务时长、服务项目数量多于农村老年人(均P<0.01)。结论政府购买社区养老服务在供需方面均存在城乡差异,应从城乡视角把握老年人的需求特点,综合考虑照护资源供给可达性的制约因素,满足城乡老年人的不同养老服务需求。     

发热门诊基于Kaiser模型的灾害脆弱性分析及干预

目的 分析发热门诊可能存在的灾害脆弱性事件,并采取针对性防控策略,减少安全隐患。 方法 基于Kaiser模型制订发热门诊可能存在的35个灾害事件风险评估指标,对20名医护人员进行调查,针对风险值排在前10位的指标进行针对性干预。 结果 风险值排名前10位的是患者突发心脏骤停（0.407）、医生防护知识不足（0.389）、工勤人员防护知识培训不到位（0.333）、药房药品短缺（0.333）、外来工作人员防护不到位（0.315）、工勤人员手卫生依从性低（0.287）、错误的垃圾收运方式（0.278）、医疗纠纷（0.259）、医务人员手卫生依从性低（0.250）、护理人员配备不足（0.213）。针对上述10项风险进行针对性干预,干预后其中９项风险值显著低于干预前,门诊医生防护知识理论考核成绩显著高于实施前（均P＜0.05）。 结论 发热门诊存在不同程度的管理风险,基于Kaiser模型的灾害脆弱性分析及干预,有利于降低风险值,保障患者安全。     

经椎间孔入路经皮内窥镜下椎间盘切除术中应用可视化骨凿切除部分椎弓根上缘治疗极高度游离型腰椎椎间盘突出症

目的 评估经椎间孔入路经皮内窥镜下椎间盘切除术（PETD）中应用可视化骨凿切除部分椎弓根上缘治疗极高度游离型腰椎椎间盘突出症（LDH）的疗效。方法 2017年1月—2018年6月,采用PETD治疗极高度游离型LDH患者16例,术中应用可视化骨凿直视下切除部分椎弓根上缘以增加套管工作距离。采用疼痛视觉模拟量表（VAS）评分、Oswestry功能障碍指数（ODI）及改良MacNab标准评估手术疗效。术后复查MRI,以明确是否存在髓核残留,通过动力位X线片观察是否发生节段性不稳。结果 所有手术顺利完成,手术时间（54.2±10.7）min,术后所有患者随访（13.5±4.6）个月。术后1 d腰痛VAS评分、下肢痛VAS评分及ODI均较术前明显改善,且术后3个月较术后1 d改善更为明显,差异均有统计学意义（P < 0.05）。改良MacNab标准评定的术后1年疗效：优9例,良5例,可2例。所有患者术后无髓核残留、节段性不稳发生。结论 PETD术中应用可视化骨凿切除部分椎弓根上缘治疗极高度游离型LDH安全、有效,且髓核摘除彻底,功能恢复满意。     

肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠模型的表型研究

目的 探讨肝细胞特异性敲除HuR基因对小鼠肝脏功能的影响。方法 从美国Jackson实验室引进LoxP标记的人抗原R（human antigen R,HuR）基因小鼠（HuR^fl/fl）和Alb-Cre转基因小鼠。杂交后,经数代选育配种,建立肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠（HuR^LKO）模型。PCR技术鉴别小鼠基因型,蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检验小鼠肝脏的HuR表达水平,同时HE染色观察肝脏结构变化。高脂喂养HuR^fl/fl/Alb-Cre和HuR^fl/fl两组小鼠,观察小鼠体重、肝重和肝体比变化,提取血清检测肝脏损伤和脂肪代谢相关指标。结果 PCR成功检测筛选子代小鼠基因型,包括HuR^fl/fl/Alb-Cre和HuR^fl/fl小鼠。蛋白免疫印迹实验和免疫荧光实验证明小鼠肝细胞特异性HuR基因敲除成功。HE染色结果提示HuR^LKO小鼠的肝细胞出现变性水肿、局部坏死。高脂喂养实验提示两组小鼠在肝重、肝体比、AST、ALT、HDL-C、血糖上的差异具有统计学意义（P＜0.05）,但在体重、TG、LDL-C的差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论 HuR基因是维持小鼠肝细胞功能的必要基因,Cre-LoxP技术可成功构建HuR^LKO小鼠模型,且特异性高,表型明显,为研究HuR在肝脏各项疾病的发生发展中所扮演的角色,提供了一个很好的疾病模型。     

甲乙归藏汤加味治疗围绝经期失眠症临床观察

目的:观察甲乙归藏汤加味治疗围绝经期失眠症的临床疗效。方法:将60例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组30例予甲乙归藏汤加味(仙茅15 g、淫羊藿15 g、珍珠母30 g、龙骨30 g、生地黄12 g、当归10 g、柴胡10 g、薄荷8 g、炒白芍15 g、丹参30 g、合欢花30 g、夜交藤30 g、柏子仁15 g、沉香6 g、大枣15 g)治疗,对照组予思诺思片10 mg口服。治疗14 d为1个疗程,2个疗程后评价疗效,并比较两组治疗前后的匹兹堡睡眠质量量表(PSQI)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分。结果:治疗组治疗后PSQI评分改善,且与对照组相当(P0.05);治疗组治疗后HAMA、HAMD评分降低,与对照组比较差异显著(P0.05)。结论:甲乙归藏汤加味能改善围绝经期患者失眠,且能在一定程度上调节焦虑、抑郁情绪。     

垂盆草提取物改善重症急性胰腺炎肺损伤的实验研究

目的探讨垂盆草提取物(SSBE)对重症急性胰腺炎(SAP)模型大鼠急性肺损伤(ALI)及过度炎症反应的影响。方法将42只健康成年SD大鼠随机分成3组:假手术组(C)、胰腺炎模型组(SAP)及SSBE治疗组,每组14只。逆行胰胆管穿刺注射5%牛磺胆酸钠(1 m L/kg)制备SAP肺损伤大鼠模型,SSBE组在此基础上即刻皮下注射SSBE(100 mg/kg),12 h后同等剂量再注射1次,C组及SAP组给予等量生理盐水注射。造模成功后分别于12、24 h取标本并处死大鼠,光镜下观察胰腺及肺脏病理损伤进行评分,检测各组大鼠腹水及血清淀粉酶(AMS)、肺脏组织湿干比重(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性及炎性因子(IL-1、IL-6、TNF-α)含量。结果与C组比较,SAP组腹水及血清AMS明显升高(P0.05);肺组织MPO、IL-1、IL-6、TNF-α含量及W/D比值亦明显升高(P0.05)。与SAP组比较,SSBE组大鼠12、24 h腹水及血清AMS、肺组织MPO、IL-1、IL-6及TNF-α、W/D比值等指标明显降低(P0.05,P0.01)。光镜下观察SSBE组大鼠胰腺组织及肺组织病理损害减轻,其损伤程度介于C组和SAP组之间。结论 SSBE对SAP模型大鼠肺损伤有缓解作用,可能通过减轻SAP大鼠的炎症反应而改善其ALI。     

1例复合杂合突变所致的凝血因子Ⅻ缺乏症家系分析

目的分析1个遗传性凝血因子Ⅻ缺乏症家系表型及基因突变情况,探讨其分子致病机制。方法对先证者及其家系进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅻ活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ:Ag)测定。用DNA直接测序法进行FⅫ基因突变检测。采用ClustalX-2.1-win软件分析突变氨基酸的保守性,用4个生物信息学评分软件分析突变对蛋白质功能的影响。结果先证者APTT结果明显延长,达179.2 s,先证者父亲、长子及女儿APTT略延长。先证者FⅫ:C及FⅫ:Ag明显减低,均为1%;其父亲、长子、女儿及次子FⅫ:C及FⅫ:Ag减低,约为50%。基因测序发现先证者FⅫ基因存在复合杂合突变,包括第1外显子启动子区为46T/T型,第9外显子存在c.797G>A(Cys247Tyr)及第14外显子存在c.1681G>A(Gly542Ser)。先证者父亲及长子表现为c.797G>A杂合突变,女儿及次子表现为c.1681G>A杂合突变。ClustalX-2.1-win软件保守性分析表明Cys247和Gly542在同源物种间高度保守。生物信息学评分软件分析结果表明突变可能影响蛋白质的功能。结论先证者FⅫ基因46T/T,c.797G>A和c.1681 G>A复合杂合变异导致其凝血因子Ⅻ水平极度减低。c.797G>A为首次报道,丰富了人类基因突变数据库(HGMD)。     

感染性休克患者40例的综合护理

目的探讨综合护理干预对重症监护病房感染性休克患者治疗效果的影响。方法对2013年6月至2014年11月在重症监护病房治疗的40例感染性休克患者进行积极治疗的同时予以综合护理干预。结果 38例患者经治疗及精心护理后好转出院,其中1例患者并发脑水肿、1例患者并发心功能衰竭,予以治疗及护理后均好转;2例患者因并发肾功能衰竭抢救无效而死亡。结论对重症监护病房感染性休克患者实行综合性护理干预,有助于改善患者的预后。     

microRNA-494对大鼠肾间质成纤维细胞分泌细胞外基质的调控作用

目的:探讨microRNA-494(miR-494)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)细胞外基质分泌的调控作用。方法:体外培养NRK-49F细胞株,并分为以下6组:TGF-β1(3ng/m L)组、miR-494模拟物(50ng/m L)组、miR-494抑制物(50ng/mL)组、miR-494模拟物(50ng/m L)+TGF-β1(3ng/m L)组、miR-494抑制物(50ng/m L)+TGF-β1(3ng/m L)组、空白对照组。茎环实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测细胞miR-494、胶原蛋白I(ColI)、纤维连接蛋白(FN)mRNA;WesternBlot法检测细胞ColI蛋白。结果:与空白对照组比较,TGF-β1组miR-494(P<0.01)、ColI mRNA(P<0.05)及FN(P<0.01)mRNA表达显著升高;miR-494模拟物组ColI、FN mRNA表达显著升高(P<0.05);miR-494抑制物组ColI(P<0.05)、FN(P<0.01)mRNA表达显著降低。与TGF-β1组比较,miR-494模拟物+TGF-β1组ColI、FN mRNA表达显著升高(P<0.05);mi R-494抑制物+TGF-β1组ColI、FN mRNA表达显著降低(P<0.05)。各组间ColI蛋白与ColI mRNA的表达水平相一致。结论:miR-494可能参与调控并促进TGF-β1诱导肾间质成纤维细胞的细胞外基质分泌。