骨肉瘤皮肤转移一例

患者女,68岁,发现口腔、手背及肺部多处肿物20余天,无明显自觉症状。体检：各系统检查无异常。皮肤科检查：上颚可见2个蚕豆大小暗红色结节,左手背可见一鸽蛋大小暗红色结节,表面光滑,质硬,活动度差。正电子发射计算机断层显像（PetCT）：全身多处转移癌（脑、淋巴结、肺、胃肠道、双肾、多处骨及肌肉间转移）。口腔内上颚结节病理结果：肿瘤细胞分化较差,局部区域可见骨样基质、软骨样结构及肿瘤骨,免疫组化角蛋白阴性,S100局灶性阳性,波形蛋白阳性,CD99阳性,P63阳性,Ki67阳性（60%）,考虑右侧上颌骨骨肉瘤。手背皮损组织病理检查：表皮未见明显异常,真皮全层弥漫性中等至较大的组织样细胞浸润,细胞有异形性,局部区域可见红染不规则的骨样基质及肿瘤骨;免疫组化Ki67阳性（60%）,CD3、CD10、CD20、Bcl?2、BCl?6均阴性。诊断：骨肉瘤皮肤转移。患者放弃治疗,发病6个月后死亡。     

骨肉瘤复发性因素的教学研究

目的 探讨在临床医学专业见习生带教过程中结合骨肉瘤复发性因素进行教学的效果。方法 选取陆军军医大学临床医学专业见习生102名,随机分为两组,对照组应用常规教学,研究组联合应用骨肉瘤复发性因素教学。观察比较两组见习生对不同教学模式的自身应用效果评价、满意程度评价情况、理论考核及技能考核评分情况。结果 研究组的自身应用效果评分均高于对照组,满意程度评价情况优于对照组,理论知识及实际操作能力得分均显著高于对照组,上述指标组间比较,差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论 对临床医学专业的见习带教生应用骨肉瘤复发性因素分析模式进行带教,让见习生从根本上了解骨肉瘤复发的影响因素,可显著提高见习生对疾病理论知识及操作技能方面的掌握程度,同时还可显著提高见习生对带教的满意度。     

七氟醚对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、凋亡及化疗敏感性的影响

目的探讨七氟醚对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、凋亡及化疗敏感性的影响。方法选取骨肉瘤MG63细胞,随机分为四组:对照组、1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚组,分别为不给予七氟醚、给予1.7%、3.4%和5.1%七氟醚处理。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell细胞侵袭实验检测细胞迁移;给予各组顺铂处理,检测各组细胞凋亡情况。结果培养24、36和72 h的1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚OD值明显低于对照组(P0.05),培养24、36和72 h的5.1%七氟醚组OD值明显低于1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组(P0.05)。四组细胞凋亡率、细胞迁移数差异无统计学意义。顺铂作用后,1.7%七氟醚组、3.4%七氟醚组和5.1%七氟醚组细胞凋亡率明显低于对照组(P0.05),5.1%七氟醚组细胞凋亡率明显低于1.7%七氟醚组和3.4%七氟醚组(P0.05)。结论七氟醚可抑制骨肉瘤MG63细胞增殖,对细胞迁移、凋亡无明显影响;七氟醚可降低骨肉瘤MG63细胞对顺铂的敏感性。     

中国骨肉瘤综合治疗现状与展望

骨肉瘤尽管是最常见的骨原发恶性肿瘤,但其年发病率仅有百万分之三。在20世纪70年代之前,其预后很差,随着化疗等综合治疗的进步,骨肉瘤的预后有了显著的改善。本文对国际骨肉瘤认识的发展、我国骨肉瘤综合治疗的发展情况、规范化进程以及治疗展望进行述评,期望藉此使读者了解我国骨肉瘤治疗的历史和现状。     

癌相关成纤维细胞来源的外泌体在促骨肉瘤侵袭转移中作用的实验研究

目的 探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法 利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick-TC外泌体提取试剂盒分离外泌体。通过透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测外泌体特异性标记蛋白β-actin、CD63表达情况对外泌体进行鉴定。培养人源骨肉瘤细胞株Saos-2,分为外泌体组和对照组,采用细胞划痕及Transwell小室实验观察外泌体对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响。选取一级5周龄BALB/c-nu雌性裸鼠12只,按编号随机分为外泌体组和对照组,每组6只。两组均采用皮下移植成瘤法在裸鼠右侧背部皮下接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,建立裸鼠骨肉瘤肿瘤模型。造模结束后即刻进行尾静脉注射:外泌体组每只裸鼠通过尾静脉注射浓度为0.1 μg/μL的外泌体悬液30 μL,对照组裸鼠尾静脉注射等量生理盐水,两组均1次/周,共注射6次。第1次注射后每日观察裸鼠成瘤情况,从裸鼠右侧背部皮下可触及肿块开始,测量两组裸鼠肿块的最长径和最长径的最大垂直短径,计算肿瘤体积,此后每周测量1次,共测量6次。完成最后一次测量后腹腔麻醉断椎法处死裸鼠,完整取出肿块并称重。取裸鼠肺组织进行切片HE染色观察两组裸鼠肺转移情况。结果 显微镜下观察CAFs呈长梭形,排列杂乱,无方向性;细胞免疫组织化学染色结果显示:CAFs的α-SMA蛋白表达阳性,提示CAFs提取成功。电镜观察外泌体呈70～100 nm圆形或椭圆形膜性囊泡状结构;Western blot结果显示外泌体中CD63蛋白呈高表达,β-actin蛋白表达较弱,提示成功分离CAFs来源外泌体。细胞划痕实验、侵袭实验结果显示:外泌体组细胞迁移距离、迁移率、侵袭细胞数目分别为(0.19±0.02)mm、0.81%±0.11%、(53.67±5.69) 个,均高于对照组的(0.81±0.11)mm、0.32%±0.11%、(31.67±8.08) 个,差异均有统计学意义(t=6.209、6.209、3.856, P值均＜0.01)。外泌体组和对照组12只裸鼠采用皮下移植成瘤法接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,均造模成功,实验过程中无一例动物死亡。两组裸鼠均于第1次注射肿瘤细胞后1周触及肿块,肿瘤体积均随着时间的延长明显增大,差异均有统计学意义(F=49.428、8.477, P值均＜0.05)。两组间比较,第1、2次测量肿瘤体积,差异均无统计学意义(P值均＞0.05);而第3～6次测量肿瘤体积,外泌体组均大于对照组,差异均有统计学意义(t=4.697、4.825、3.516、2.706, P值均＜0.05)。测量6次后处死裸鼠,剥除肿瘤,外泌体组肿瘤质量(1.62±0.29)g大于对照组(1.00±0.43)g,差异有统计学意义(t=2.929, P＜0.05)。肺组织切片HE染色结果显示,两组裸鼠均发生肺转移,外泌体组肺组织转移灶数量为6.63(3,17)个,多于对照组的1.17(0,3)个,差异有统计学意义(W=36.000, P＜0.01)。结论 CAFs来源的外泌体可增加骨肉瘤细胞株Saos-2的迁移及侵袭能力,同时促进骨肉瘤的生长和肺转移的形成。     

Low-grade central osteosarcoma of distal femur,resembling fibrous dysplasia

We report a case of a 32 year-old male, admitted for a lytic lesion of the distal femur. One month after the first X-ray, clinical and imaging deterioration was evident. Open biopsy revealed fibrous dysplasia. Three months later, the lytic lesion had spread to the whole distal third of the femur reaching the articular cartilage. The malignant clinical and imaging features necessitated excision of the lesion and reconstruction with a custom-made total knee arthroplasty. Intra-operatively, no obvious soft tissue infiltration was evident. Nevertheless, an excision of the distal 15.5 cm of the femur including 3.0 cm of the surrounding muscles was finally performed. The histological examination of the excised specimen revealed central low-grade osteosarcoma. Based on the morphological features of the excised tumor, allied to the clinical findings, the diagnosis of low-grade central osteosarcoma was finally made although characters of a fibrous dysplasia were apparent. Central low-grade osteosarcoma is a rare, well-differentiated sub-type of osteosarcoma, with clinical, imaging, and histological features similar to benign tumours. Thus, initial misdiagnosis is usual with the condition commonly mistaken for fibrous dysplasia. Central low-grade osteosarcoma is usually treated with surgery alone, with rare cases of distal metastases. However, regional recurrence is quite frequent after close margin excision.     

siRNA沉默TAp73对骨肉瘤细胞的增殖和侵袭力的作用研究

目的　探讨通过siRNA沉默细胞TAp73蛋白表达对骨肉瘤Saos-2细胞的增殖、周期以及侵袭力的作用研究。 方法 以骨肉瘤Saos-2细胞系为研究对象,设计合成沉默TAp73的siRNA片段,转染入Saos-2细胞,用Western-blot法检测干扰后TAp73蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,利用流式细胞仪检测细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力。 结果 Western-blot检测显示siRNA对TAp73蛋白表达有显著下调作用;CCK-8检测实验组细胞增殖明显(P<0.05);细胞周期检测显示细胞处于DNA合成期（S期）的细胞比例上升;穿过人工基底膜的细胞数量也明显增加,由（84.17±1.35）增加为（92.67±2.80 ）(P<0.05)。 结论 抗癌基因TAp73在骨肉瘤的增殖、凋亡和侵袭过程中发挥有重要作用,可能成为控制肿瘤增殖和转移的关键性因素。     

白花丹素对骨肉瘤细胞系U2OS的作用及其机制

目的研究白花丹素对骨肉瘤细胞系U2OS的作用,并初步探讨其作用机制。方法用CCK-8法检测白花丹素对骨肉瘤细胞的促凋亡作用;用HOECHST 33342染色研究白花丹素对骨肉瘤细胞作用后的形态学变化;用Western blot法检测白花丹素作用后骨肉瘤细胞MDM2和p53蛋白表达情况。结果CCK-8结果显示白花丹素对骨肉瘤细胞有明显的抑制作用,而且呈浓度依赖性;HOECHST 33342染色结果显示白花丹素对骨肉瘤U2OS 细胞的抑制作用主要是通过促进凋亡来实现;Western blot结果显示白花丹素能够改变p53/MDM2基因表达比例。结论白花丹素通过细胞凋亡途径抑制骨肉瘤细胞系U2OS细胞的生长。     

Parafibromin蛋白在人颌骨骨肉瘤中的表达

目的：检测parafibromin蛋白在人颌骨骨肉瘤（osteosarcoma of the jaws, JOS）中的表达情况,探讨其在JOS的发生、发展中的作用。方法：采用免疫组织化学的方法检测parafibromin蛋白在47例JOS和11例颌骨骨化纤维瘤（ossifying fibroma of the jaws, JOF）中的表达情况。结果：JOS中,parafibromin高表达、中等表达、低表达患者分别占48.9%(23/47) 、40.4%(19/47)和10.7%(5/47);JOF中,三者所占的百分率分别为90.9%(10/11)、9.1%(1/11)和0.0%(0),与JOS相比,差异有统计学意义（U=147.5,P=0.012）;parafibromin在高分化型JOS中的表达水平高于传统型JOS（U=71.0,P=0.021）;parafibromin的表达情况与临床病理参数间无相关性（P>0.05）。结论：parafibromin蛋白在JOS中表达下调,这种表达的减少可能与JOS的分化和恶性程度有关。