NSCLC患者外周血中三种肿瘤标志物mRNA联合检查的意义

目的对NSCLC患者外周血LUNX、CEA和SCC的mRNA进行联合检测,并探讨其意义.方法标本为外周血分3组.肺癌组50例;良性疾病10例;健康志愿者15例.应用Nested PCR对外周血LUNX、CEA和SCC的mRNA进行检测.任意一种或一种以上标志物mRNA定为阳性.分析PCR检测结果与NSCLC各项临床指标之间的关系,行统计分析.结果肺癌组74.0%(37/50)例为阳性;良性疾病和健康对照组均为阴性.肺癌组中,Ⅰ期的患者仍有33.3%(3/9)呈现阳性,阳性率随肿瘤临床分期而升高(P＜0.05),而与患者性别、肿瘤分化程度、病理类型无统计学意义上的相关性.在肺癌组中各标志物的表达率为LUNX52.0%(26/50),高于CEA30.0%(15/50)和SCC16.0%(8/50),差异有显著性(P＜0.05).结论LUNX mRRNA是NSCLC外周血微转移检测的较好标志物.NSCLC微转移发生早,发生率较高.提示即使病理分期较早的患者手术后仍有可能发生远处转移.应用PCR法对NSCLC患者进行有LUNX mRNA组合的联合检测,有利于早期发现微转移,利于制定更优化的治疗策略.     

RNA干扰survivin基因对人食管癌EC109细胞体外增殖和化疗敏感性的影响

目的研究RNA干扰survivin基因对EC109细胞体外增殖和化疗药物敏感性的影响。方法构建siRNA-survivin真核表达载体，转染EC109细胞，筛选得到稳定细胞克隆。同时设空载体和构建非特异siRNA载体转染为对照；MTT法检测各组细胞的体外增殖速度和比较它们对化疗药物顺铂的敏感性；流式细胞仪检测各组细胞的周期变化。结果siRNA-survivin转染的EC109细胞体外增殖受到抑制；不同浓度顺铂对各组细胞的增殖有抑制作用，且呈剂量依赖性。siRNA-survivin转染的EC109细胞的IC50为1．0188μg／mL，低于其他组（P〈0．05）；siRNA-survivin转染的EC109细胞组细胞周期明显阻滞于G0／G1期（P〈0．05），S期比例也低于其他组（P〈0．05）。结论RNA干扰survivin基因具有抑制人食管癌EC109细胞体外增殖和提高细胞对化疗药物顺铂敏感性的作用．将更多细胞阻滞在G0／G1期是其重要的作用机制。     

重组抗原CP4-EPSPS的表达及免疫学活性研究

目的：表达并纯化重组CP4-EPSP合成酶（CP4-EPSPS），研究重组CP4-EPSPS的免疫学活性；为进一步制备单克隆抗体和开发检测CP4-EPSPS的快速诊断试剂奠定基础。方法：诱导表达含转基因大豆CP4-EPSPS的重组载体pET-EPSPS。经Ni-NTA琼脂糖树脂亲和层析纯化，以ELISA、胶体金试条、Western杂交鉴定其免疫活性。结果：重组CP4-EPSPS以包涵体表达为主，上清表达量极低，但胶体金试纸条检测发现上清中CP4-EPSPS抗原活性强；复性包涵体的抗原性与上清的抗原性明显不同。采用扩大培养量、缩小超声破碎重悬体积的方法，从上清中纯化CP4-EPSPS获得成功，ELISA检测此重组抗原免疫小鼠血清抗体滴度可达到1：625，000；Western杂交证实重组抗原免疫血清与CP4-EPSPS标准品有较好的免疫反应性。结论：包涵体的简单复性方法难以恢复其关键的抗原决定簇的免疫原性；运用胶体金试纸条检测重组CP4-EPSPS活性，灵敏度高，简单快捷，对CP4-EPSPS特异检测相关的关键性抗原决定簇的甄别有重要作用，可指导重组抗原的纯化和在免疫学研究、特别是在单克隆抗体开发中的应用。     

特异性SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析

目的：用分段表达纯化的SARS冠状病毒（SARS-CoV）的核衣壳蛋白（nucleocapsid N蛋白）制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体（McAb），初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法：用分段表达纯化的SARS～CoV的N蛋白（分别记为N1蛋白、N2蛋白）分别免疫Balb／c小鼠制备McAb，通过检测其亚类、效价及相对亲和力鉴定McAb的生物学特性，以Western blot鉴定单克隆抗体特异性，并对McAb结合表位进行初步分析。结果：筛选出7株抗SARS-CoV N1蛋白及2株抗SARS-CovN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株，IgG亚类鉴定6株为IgG1，2株为IgG2b，1株为IgG3，腹水效价10^5以上；亲和常数达10^8以上。Western blot证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoVN蛋白发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示2株N1 McAb识别相同的抗原表位，其余均识别不同的抗原表位。结论：通过分段表达纯化的SARS-CoVN蛋白而制备的特异性针对SARS-CoV N蛋白不同区域抗原表位的单克隆抗体中，N1单抗识别N蛋白N端（1-549bp），N2单抗识别N蛋白C端（496～1269bp），可初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。     

甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征一例

临床资料 患者,男性,27岁。发热1周,咳嗽5天,胸闷3天,腹泻2天,于2009年9月10日无锡市疾病控制中心查患者咽拭子甲型H1N1沛感病毒核酸检测（RT—PCR法）阳性,确诊为甲型H1N1流感、两侧肺炎入住令院负压病房。体格检查：体重90瞻,T39．1℃。呼吸20次／分,神志清,唇无发绀,咽部轻度充血,两肺呼吸音低,闻及少量干混罗音。     

改良Ivor-lewis与经左胸一切口手术治疗胸中段食管鳞癌的临床分析

目的比较改良Ivor-lewis和经左胸一切口两种手术方式治疗胸中段食管鳞状细胞癌的疗效,并对两种手术方式进行临床评价。方法回顾性分析本院胸外科2004年3月~2006年8月间进行的273例食管中段鳞癌手术临床资料,改良Ivor-lewis术式(改良Ivor-lewis组)189例,经左胸一切口术式(经左胸组)84例。对两组的3年和5年生存率、3年肿瘤局部复发率、淋巴结清扫数目、切缘阳性率、围术期并发症、手术时间等进行对比研究。结果改良Ivor-lewis组3年生存率为59.5%,经左胸组为60.3%(P=0.312),5年生存率分别为37%和38.1%(P=0.868);改良Ivor-lewis组3年肿瘤局部复发率为33.9%,经左胸组为46.4%(P=0.048);改良Ivor-lewis组和经左胸组平均清扫淋巴结数分别是(16.5±2.5)枚和(11.1±2.5)枚(P<0.001);上切缘阳性率分别为1.1%和7.1%(P=0.018);改良Ivor-lewis组和经左胸组的并发症发生率分别是38.6%和44%(P=0.399),其中改良Ivor-lewis组的胃潴留发生率较高(P=0.015),而经左胸组的吻合口瘘发生率较高(P=0.040);手术时间分别为(3.15±0.5)h和(3.07±0.49)h(P=0.216)。结论改良Ivor-lewis术式和经左胸一切口术式均可作为胸中段食管鳞癌的候选手术方式,但在3年肿瘤局部复发率、平均清扫淋巴结的数目、切缘阳性率及术后吻合口瘘严重并发症发生率方面,改良Ivor-lewis手术有一定优势。     

论哮喘与痰

哮喘是一种发作性的痰鸣气喘疾患。发时喉中有哮鸣音,呼吸气促困难,甚则喘息不能平卧。每因外邪侵袭、饮食不当、情志刺激、体虚劳倦等诱因引动而触发,以致痰壅气道,肺气宣降功能失常。痰为其主要病理因素,是哮喘发病的潜在"夙根",哮喘的分型及其治疗均与痰密切相关,现代医学研究也证明痰液与哮喘的发作有密切的联系,因此,治疗与预防都应以祛痰为主。     

PET - CT联合检测肿瘤标志物对肺癌术后随访的价值

 目的 探讨肿瘤标志物和正电子发射断层/计算机断层扫描( PET - CT)对肺癌术后随访的作用及相互关系.方法 97例肺癌术后患者做全身PET - CT检查,并在l周内检测血癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment 21 -1,CYFRA 21 -1)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE),同时与最终诊断进行比较,分析两种检查之间差异和相互关系.结果 97例中,89例诊断肺癌复发或转移.肿瘤标志物诊断肺癌术后复发或转移的敏感性为68.5％,特异性75.0％,准确性为69.1％;PET - CT诊断肺癌术后复发或转移的敏感性为92.1％,特异性75.0％,准确性为90.7％.两者联合诊断的敏感性为100％,特异性为92.0％,准确性为95.6％.结论 PET - CT诊断肺癌术后的复发或转移敏感性和准确性较肿瘤标志物检测高,肿瘤标志物对PET - CT诊断具有补充作用,两者联合应用对于肺癌术后的随访有重要的临床价值.     

非甾体类抗炎药塞来昔布抑制肺癌细胞血管生成的实验研究

 目的研究非甾体类抗炎药塞来昔布对肺癌细胞血管生成的抑制作用.方法选用肺癌A549细胞系体外培养,在不同塞来昔布浓度作用下,应用MTT法检测肺癌细胞的增殖抑制,RT-PCR法观察肺癌细胞血管内皮生长因子mRNA(VEGF mRNA)的表达水平;裸鼠移植瘤实验检测塞来昔布在体内对肺癌细胞的抑制作用,并用免疫组化法检测移植瘤微血管密度.结果塞来昔布对肺癌细胞增殖有抑制作用,且呈剂量依赖关系,IC50为50 μmol/L;RT-PCR法中,对照组肺癌细胞VEGFmRNA的表达水平高于药物组(P＜0.05),药物组中肺癌细胞VEGFmRNA表达水平与塞来昔布浓度相关;裸鼠移植瘤实验中,对照组瘤重平均(2.1567±0.9750)g,药物组平均(0.9783±0.5423)g,两组有显著性差异(P＜0.05),抑瘤率为54.64%;移植瘤微血管密度药物组低于对照组(P＜0.05).结论塞来昔布在体内及体外均刘肺癌细胞表现出抑制作用,其作用与抑制肺癌细胞血管生成相关.     

1例肺结核合并淋巴瘤误诊分析

患者男性,60岁。因"间断咳嗽、咳痰、发热三月。"于2011年10月22于我院就诊,病初曾于南京胸科医院就诊,查痰浓缩集菌涂片阳性,胸部CT示两肺斑点斑片样密度不均影伴右上肺空洞(图1),诊断为继发型肺结核进展期伴感染,口腔结核性溃疡。予抗炎、抗结核10天后仍有发热,故来我院。入院查体:神志清,精神一般,口腔上颚粘膜见一巨大溃疡,约5 cm×5 cm,其表面可见黄白色絮状坏死物附着,全身浅表淋巴结未触及肿大,两肺呼吸音低,未闻及明显干湿性啰