重组活化凝血因子Ⅶ和抑肽酶在肝移植术中的应用

目的 前瞻性地观察使用重组活化凝血因子Ⅶ（rFⅦa）和抑肽酶对减少肝移植术中出血的有效性和安全性。方法 将中山大学附属第三医院2003—2004年欲行肝移植60例病人术前随机分为3组，第1组为rFⅦa组，第2组为抑肽酶组，第3组为对照组。对3组病人各个时间点的凝血指标、凝血弹性图（TEG）指标进行观察，比较3组术中出血量、输血量、住院时间、住院费用和血管并发症。结果 使用rFⅦa后凝血酶原时间（PT）、TEG中的反应时间（R）和最大幅度（MA）与对照组差异有显著性（P〈0.05）。而部分凝血酶原时间（APTT）、纤维蛋白原水平（FIB）、血小板计数（PLT）和TEG中的血凝块减少速率（LY30）与对照组的差异无显著性（P〉0.05）。抑肽酶组与对照组MA和LY30的差异有显著性（P〈0.05），其他指标无明显改善。rFⅦa组和抑肽酶组术中出血量、输血量均较对照组明显减少（P〈0．05）。结论 rFⅦa能迅速改善外源性凝血系统功能，抑肽酶能改善新肝期的纤溶亢进，未见增加术后血管并发症。     

乙肝患者肝移植术后免疫抑制治疗下拉米夫定耐药的发生和治疗

目的探讨乙肝患者肝移植术后在免疫抑制治疗下拉米夫定耐药的发生、处理及疗效。方法对2003年10月至2005年3月因乙肝相关性终末期肝病在我院接受肝移植并完整随访1年以上的157例患者的临床资料进行回顾性分析,观察并总结肝移植术后,在免疫抑制状态下拉米夫定耐药病例的发生、处理和疗效。结果肝移植术后随访1年以上共发现11例患者出现拉米夫定耐药,其中10例出现在术后1年内,肝移植术后1年的拉米夫定耐药率是6．37％,出现拉米夫定耐药时采用联合新的核苷类似物阿德福韦、恩替卡韦可以有效控制乙肝病毒的复制、改善肝功能;治疗12周、24周和48周时HBV-DNA转阴率分别为27．3％、36．6％、62．5％,下降幅度分别为log DNA (3．85±0．79)、log DNA(3．27±0．84)、log DNA(3．19±0．58),HBeAg阳性血清HBeAg的血清转换率为18．2％、27．3％、50．0％。结论拉米夫定联合小剂量乙肝免疫球蛋白可以有效推迟肝移植术后免疫抑制治疗下拉米夫定耐药出现的时间,联合新的核苷类似物抗病毒药物对肝移植术后出现的拉米夫定耐药的乙肝病毒疗效确切。     

肝移植术后血管并发症的原因与对策

【目的】探讨肝移植术后血管并发症的病因和对策。【方法】回顾性分析180例次原位肝移植临床资料。【结果】血管并发症发生率为ll％；肝动脉并发症发生率为4％，与肝动脉并发症相关的病死率为3％(5／180)；门静脉并发症发生率为3％，与门静脉并发症相关死亡率为0；肝后下腔静脉狭窄并发症发生率为3％。【结论J早期动脉并发症与手术技术和肝动脉病变关系密切，改进吻合技术，术前评估肝动脉病变和避免高凝能降低早期肝动脉并发症发生率；术前有门脉高压症手术治疗史、移植术前门静脉血栓、门静脉手术史以及严重感染病史等是门静脉并发症的高危因素；腔静脉整形的改良背驮式肝移植能避免下腔静脉狭窄的发生。     

原位肝移植术后弥漫性脑病的临床研究

目的观察肝移植术后弥漫性脑病的发生及临床表现,探讨其易发因素及防治方法。方法回顾性分析自2003年10月至2005年9月完成的467例肝移植患者的临床资料,对肝移植术后并发弥漫性脑病的病例进行统汁分析并结合文献进行讨论。结果术后共有72例患者发生弥漫性脑病,发生率为15．41%；平均发生时间在术后(8．4±4．3)d。高龄、术前高胆红素坦率血症、高渗透压、低血小板、肺部严重感染与弥漫性脑病密切相关。68例患者痊愈,3例死于感染．1例死于移植物抗宿主病。结论弥漫性脑病是肝移植术后常见并具有潜在危险性的并发症,产生的原因是多因素的,钙调神经蛋白抑制剂的神经毒性只是一个促进因素。针对病因的综合治疗和免疫抑制剂的及时调整有利于改善预后。     

原位肝移植术后肝脓肿的诊断和治疗

目的 探讨原位肝移植术(OLT)后肝脓肿的病因、诊断、治疗和预防措施。方法自1993年1月至2003年6月，本中心共行OLT274例，术后并发肝脓肿6例(2．2％)。患者主要临床表现有发热、寒战、腹痛、身目黄染、肝功能损害、低蛋白血症、贫血、白细胞及中性粒细胞比例增高等。诊断主要根据临床表现及超声或CT检查。治疗方法主要包括脓肿抽吸引流、清除胆泥．抗炎和支持治疗。结果6例中2例治愈，3例放弃再次肝移植术，2例死于严重全身感染，治愈率为33．3％。结论OLT后肝脓肿病因较复杂，可能与肝动脉血栓或狭窄、甲基强的松龙冲击治疗、胆管炎症和介入治疗等有关。OLT后肝脓肿的预后较差．应加强预防措施防止其发生。     

基因-病毒治疗系统CNHK500-p53的构建和体外初步研究

目的构建一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将目的基因表达盒mCMV启动子 p53基因 SV40polyA插入腺病毒E1A基因受端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控、E1B基因受缺氧反应元件(HRE)启动子调控的增殖病毒载体质粒pSG500的E1A下游,得到腺病毒质粒pSG500-p53;通过pSG500-p53与5型腺病毒右臂的质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-p53;利用Westernblot和ELISA法检测病毒E1A、E1B基因和p53抑癌基因的表达;TCID50方法测定病毒滴度;通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力;应用细胞病理效应(CPE)实验检测病毒抗肿瘤作用。结果CNHK500-p53的病毒滴度为2×1010pfu/ml,增殖实验证实CNHK500-p53可以选择性地在端粒酶阳性和缺氧微环境的肝癌细胞中增殖,CNHK500-p53所携带的p53基因在肝癌细胞株中的表达量388±34.6μg/L明显高于非增殖型腺病毒载体Ad-p53的76.3±13.17μg/L(P<0.005),并显示了较强的抗肿瘤效应。结论CNHK500-p53是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统。     

VEGF mRNA在预测肝癌肝移植术后肿瘤复发和转移中的应用价值

目的 探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）mRNA作为肝癌游离癌细胞标志物在预测肝癌肝移植术后复发和转移中的应用价值。方法 以2002年4月至2003年12月期间的53例原发性肝癌肝移植患者为研究对象（肝癌肝移植组），通过建立稳定可靠的实时荧光定量RT—PCR检测方法来定量检测肝癌患者外周血中VEGFmRNA在整个肝移植术围手术期的动态变化情况，并与术后复发和转移进行相关分析；同时，为了解VEGFmRNA表达的特异性，分别设立了进展期肝癌组（n=8）、良性肝病组（n=26）和正常对照组（n=10）。结果 VEGFmRNA可以作为肝癌游离癌细胞的标志物，具有较好的特异性。进展期肝癌组和肝癌肝移植组VEGFmRNA的表达阳性率明显高于良性肝病组和正常对照组（75．0％、37．7％vs11．5％、10．0％），P〈0．01；术前VEGFmRNA的阳性表达和术后出现2次以上持续性的VEGFmRNA阳性表达与移植术后肝癌复发与转移相关（P〈0．01）。结论 术前检测VEGFmRNA阳性表达和术后持续的VEGFmRNA标志物检测表达阳性可以有效预测肝癌肝移植术后肿瘤复发和转移。     

肝移植术后血管并发症的原因与对策

【目的】探讨肝移植术后血管并发症的病因和对策。【方法】回顾性分析180例次原位肝移植临床资料。【结果】血管并发症发生率为11%;肝动脉并发症发生率为4%,与肝动脉并发症相关的病死率为3%(5/180);门静脉并发症发生率为3%,与门静脉并发症相关死亡率为0;肝后下腔静脉狭窄并发症发生率为3%。【结论】早期动脉并发症与手术技术和肝动脉病变关系密切,改进吻合技术,术前评估肝动脉病变和避免高凝能降低早期肝动脉并发症发生率;术前有门脉高压症手术治疗史、移植术前门静脉血栓、门静脉手术史以及严重感染病史等是门静脉并发症的高危因素;腔静脉整形的改良背驮式肝移植能避免下腔静脉狭窄的发生。     

肝移植术后长期联合应用拉米夫定和小剂量乙肝免疫球蛋白预防乙型肝炎复发的疗效

目的评估肝移植术后长期联合应用拉米夫定(LAM)和小剂量乙肝免疫球蛋白(HBIG)预防乙型肝炎复发的疗效,探讨肝移植术后乙型肝炎病毒(HBV)再感染和乙型肝炎复发的长期联合预防方案。方法通过前瞻性研究中山大学附属第三医院肝脏移植中心1993年10月至2005年8月符合研究标准的190例肝移植,术后应用拉米夫定联合小剂量乙肝免疫球蛋白预防,出现LAM耐药时加用阿德福维(ADV)。依据乙肝病毒标志物、HBVDNA定量、YMDD变异、生化指标和组织病理学检查诊断HBV再感染和乙型肝炎复发。结果190例中出现再感染15例(7.9%),其中肝炎复发7例,加用ADV治疗好转5例,再移植2例;其余HBV再感染8例均加用ADV治疗,血清HBVDNA水平下降5例,转为阴性3例;HBsAg阴转1例。随访时间12～34个月,平均再感染时间8.3月。结论长期联合应用拉米夫定和小剂量乙肝免疫球蛋白可有效预防乙型肝炎复发,加用阿德福维可有效治疗拉米夫定耐药。