人肝细胞癌组织中叶酸受体和Delta样配体4的表达及分布

目的 探讨叶酸受体(FR)和Delta样配体4(Dll4)在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和正常肝组织中的表达及分布特点,评价其作为HCC治疗靶点的可行性。方法 收集2013年1—10月切除的24例HCC组织标本,收集同期9例肝血管瘤旁切除的正常肝组织。应用HE染色观察两组标本组织学结构;免疫组化、Western blot检测FR及Dll4的表达及分布情况。结果 免疫组化结果显示HCC组织中FR、Dll4阳性率均高于正常肝组织(P<0.05),Western blot检测HCC组织中FR和Dll4相对表达量均高于正常肝组织(P<0.05)。结论 FR和Dll4在HCC组织中高表达,可视为HCC基因治疗新的潜在靶点。     

当你使用新处方时,需询问这些问题

正为了获得最好的结果以及为了自己的安全,应了解新药丸有什么作用,应如何使用。药物在帮助我们好转或管理慢性疾病中起着关键作用。但是,当你的医生开具新的药物时,不要坐着默不出声。询问关于药物的问题,并询问药师未解决的问题。医生可能没有时间解释所有重要的事情,比如是否空腹服用药物。下一次医生建议你服用新药丸时,粗略记下以下问题的答案。你需要询问你的药物如何起作用?如何正确服用?为什么需要服用?     

一例霍乱带菌者携带两株霍乱弧菌的生物学特性研究

目的:对同一霍乱带菌者中分离的2种血清型霍乱弧菌开展生物学特征研究。方法:应用噬菌体生物分型方法、药敏纸片法、PCR方法和脉冲场凝胶电泳试验对两株菌开展研究。结果:两株菌的血清型、噬菌体生物型均不同,耐药性、毒力基因结果相同,脉冲场凝胶电泳分型结果显示带型高度相似。结论:两株菌虽然存在一定差异,但差异非常小,应为同源菌株。     

多重实时荧光定量PCR检测肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的 利用多重荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的定量方法.方法 选取肠出血性大肠杆菌O157:H7编码脂多糖基因(rfbE)和编码鞭毛抗原基因(fliC)作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan-MGB探针,探针的5'端分别用FAM和HEX进行荧光标记,3'端标记MGB.优化PCR扩增体系,对多重实时荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度、重复性评价,同时进行一定数量临床样本鉴定,与常规方法进行比较.结果 本研究所建立的多重实时荧光定量PCR方法可准确、特异地检测和鉴定肠出血性大肠杆菌O157:H7,能够有效甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7与非H7菌株,其他菌株均无阳性结果;该方法的灵敏度可达到10 CFU/ml;定量检测的批间和批内变异系数均小于5%;对66例临床样本进行评价,结果显示15例肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性,2例为肠出血性大肠杆菌O157:非H7阳性,其中16例与常规培养法结果符合,符合率达到98.49%.结论 本研究建立的检测肠出血性大肠杆菌O157:H7多重实时荧光定量PCR方法快速,结果准确、可靠,操作简便,为肠出血性大肠杆菌O157:H7的临床诊断、现场流行病学调查和食品安全监测提供了新的鉴定方法.     

转染SV40永生化基因对正常成人肝细胞生长特性的影响

背景：生物型人工肝采用猪肝细胞或肝癌细胞作为移植物来源存在动物源性疾病和致瘤性的担心,而正常成人肝细胞也具有一定的局限性。 目的：通过检测转染前、后正常成人肝细胞的活率、生长曲线和细胞周期的变化,了解转染SV40永生化基因对正常成人肝细胞生长特性的影响。 方法：培养不同时间的正常人肝细胞和永生化正常成人肝细胞,采用胎盘蓝染色和AO-PI染色,于培养后1~8 d采用MTT染色法计数细胞活率;用MTT比色法测定细胞的A值并绘制生长曲线;采用流式细胞术检测细胞的生长周期。 结果与结论：3种染色法检测显示两种细胞的活率为95%~99%,存活率无明显差异。转染前、后的两种正常成人肝细胞的生长曲线无明显差异,均在培养 3~5 d时呈指数型生长,但转染后正常成人肝细胞较转染前增殖略快。采用流式细胞术测得的两种肝细胞的细胞周期：转染后肝细胞S期细胞占65.64%,G0~G1期细胞占34.36%,G2期细胞占0%;转染前肝细胞S期占21.27%,G0~G1期细胞占62.64%,G2期细胞占12.09%,提示转染后肝细胞的S期细胞明显增多,增殖能力增强。转染SV40永生化基因的正常成人肝细胞较转染前细胞的增殖活力增高,存活率无明显差异,提示转染后细胞增殖能力更强。     

骨形态发生蛋白4体内外诱导脑神经干细胞向胆碱能细胞的分化

目的：了解骨形态发生蛋白－4 (BMP4) 是否具有诱导原代分离培养的大鼠脑神经干细胞（NSCs）向胆碱能细胞分化的效应。方法：将从两月龄大鼠脑海马、纹状体等区域分离的细胞培养于含EGF、bFGF的DMEM/F12培养液中,在光镜下观察细胞的形态特征,并行Nestin细胞化学染色。24h后换成含有BMP4的培养液,培养7d、8d时,行胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase, ChAT）和神经巢蛋白Nestin双标免疫细胞化学染色及ChAT间接免疫荧光染色,在光镜下观察细胞形态的变化。结果：分离出的大鼠脑海马、纹状体等区的细胞约48%为nestin阳性的NSCs。培养7d、8d时,光镜下见加BMP4组约34%的细胞呈神经元形态特征;免疫双标细胞化学染色见ChAT阳性细胞与Nestin阳性细胞共存,其中ChAT阳性细胞占28%,Nestin阳性细胞占38%;间接免疫荧光染色见呈较强绿色荧光的ChAT阳性细胞较多;FITC标记流式细胞术检测到16％的细胞呈ChAT阳性。而未加BMP4组呈ChAT阳性的细胞约7％,明显少于加BMP4组,且荧光较弱。结论：BMP4可在体外培养条件下诱导大鼠脑神经干细胞向胆碱能细胞分化。     

Notehl对人脐带问充质干细胞增殖、黏附及迁移影响的体外研究

目的探讨Notchl基因的重组腺病毒转染对人脐带间充质干细胞（humanumbilicalcordmesenchymalstemcells,hUCMSCs）增殖、黏附及迁移能力的影响。方法按照不同腺病毒感染hUCMSCs分为实验组（Ad-Notchl）、阴性对照组（Ad—GFP）与空白对照组。以最佳MOI转染hUCMSCs,观察细胞形态变化以及GFP蛋白的表达。比较3组细胞增殖能力、细胞周期、黏附能力及迁移能力。WesternBolt检测3组细胞Notchl蛋白的表达水平。结果荧光下观察腺病毒成功感染细胞,阴性对照组和实验组均出现了GFP的表达,且随培养时间的延长表达量增高,可见光下观察实验组细胞增殖速度较快。实验组细胞的增殖能力（48、72、96h）、黏附能力（12、16、20h）及迁移能力均较阴性对照组及空白对照组增强（P〈0．05）。WesternBolt检测实验组细胞Notchl蛋白的表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05）。结论Notchl能明显促进hUCMSCs的增殖、黏附和迁移。     

氯吡格雷羧酸代谢物SR26334对人脐静脉内皮细胞全基因表达谱的影响

本研究探讨氯吡格雷无抗血小板活性的羧酸代谢成分SR26334对体外培养人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)基因表达谱的影响及其对内皮细胞作用的分子机制。SR26334 10μmol/L与人脐静脉内皮细胞共培养48h;运用Affymetrix HU133 plus2.0全基因组表达芯片检测氯吡格雷羧酸代谢物对人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响,用分子注释系统MAS3.0软件进行聚类分析。用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证基因表达谱。结果表明:氯吡格雷羧酸代谢物SR26334 10μmol/L作用内皮细胞48 h后,基因芯片分析筛选出差异表达大于1.5倍的基因235个,其中上调基因176个,下调基因59个,包括DNA依赖的转录调节、转录、从RNA聚合酶Ⅱ启动子开始转录的正调节、细胞周期、细胞分割、蛋白氨基酸去磷酸化等相关基因,RT-PCR检测结果与基因芯片结果一致。结论:氯吡格雷羧酸代谢物SR26334在基因水平通过多条通路调节内皮功能。     

浅谈现浇钢筋砼板在设计中应注意的问题

结合工程设计实际情况，分析了钢筋砼现浇板裂缝产生的原因，提出了现浇板在设计中注意的问题。