针刺配合冰刺激对脑卒中后吞咽困难的疗效观察

目的观察针刺配合冰刺激对脑卒中后吞咽障碍的疗效。方法将60例脑卒中并发吞咽困难患者随机分为治疗组30例和对照组30例,治疗组采用针刺配合冰刺激治疗,对照组仅采用针刺治疗。治疗4周。结果治疗组治愈23例,好转6例,无效1例,总有效率96.67%;对照组治愈17例,好转5例,无效8例,总有效率73.33%。治疗组优于对照组(P<0.05)。结论针刺配合冰刺激治疗脑卒中后吞咽困难,方法简单、疗效确切。     

hBMP-7修饰的骨髓间充质干细胞对肾脏BMP-7的影响

目的观察人骨形态发生蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)肾脏内源和外源BMP-7表达的影响,探讨其对IRI肾脏的保护作用。方法 45只兔采用随机数字表的方法分为对照组(Ⅰ组)、单纯BM-MSCs移植组(Ⅱ组)和基因修饰的BM-MSCs移植组(Ⅲ组)(n=15)。构建hBMP-7重组腺病毒并转染兔BM-MSCs,建立肾脏IRI模型后,移植组于肾血流恢复后经肾动脉推注单纯和基因修饰的自体BM-MSCs,对照组同法推注等量生理盐水。3组分别于术后3、7、14 d采用随机数字表的方法取5只兔经耳缘静脉采血,检测血清肌酐(Crea)和尿素(Urea),观察肾功能情况;同时取肾组织进行HE染色行肾小管损伤评分,ELISA和RT-PCR法分别检测肾脏hBMP-7和BMP-7的蛋白浓度和mRNA表达。结果肾脏IRI后3、7、14 d,Ⅲ组Crea和Urea明显低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ组肾小管损伤评分均低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ组检测到第3、7、14天hBMP-7蛋白[(81.8±25.5)、(107.8±33.4)、(49.6±17.8)pg/mg]和mRNA(0.82±0.12、0.69±0.13、0.42±0.10)的表达并维持至少2周;Ⅲ组第3、7、14天BMP-7 mRNA(1.08±0.33、1.36±0.17、1.64±0.21)和BMP-7蛋白(95.9±21.3、137.0±14.9、192.1±18.0)的表达均高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。结论 hBMP-7基因修饰的BM-MSCs移植既能携带外源性hBMP-7在缺血再灌注损伤肾脏中表达,又能提高内源性BMP-7的表达,减轻肾脏损伤,促进肾脏修复,改善肾脏功能。     

逐瘀通脉胶囊对急性脑梗死患者临床及血脂水平的影响

目的观察逐瘀通脉胶囊对脑梗死患者临床及血脂水平的影响。方法将浙江中医药大学附属第三医院住院的急性脑梗死患者60例随机分为治疗组(n=30)和对照组(n=30),对照组服用洛伐他汀片20mg,1次/d;治疗组在对照组治疗的基础上加服逐瘀通脉胶囊0.4g,3次/d。两组疗程均为30d。观察两组治疗前后临床疗效及血脂水平的变化。结果治疗组总有效率高于对照组(P<0.05),在血脂水平与对照组比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论逐瘀通脉胶囊能明显改善急性脑梗死患者临床症状和血脂水平。     

共刺激阻断剂与雷帕霉素联合应用对移植肾存活的影响

目的:探讨共刺激阻断剂CTLA4Ig与雷帕霉素(Rapamycin,RPM)联合应用对大鼠移植肾存活的影响.方法:肾移植大鼠分为对照组、CTLA4Ig组、RPM组和CTLA4Ig RPM组,观察术后血肌酐和移植肾病理改变、移植肾存活时间.结果:与对照组相比,CTLA4Ig组、RPM组、CTLA4Ig RPM组移植肾存活时间均显著延长(P＜0.01),其中,CTLA4Ig RPM组移植肾存活时间最长(76.5±17.1d),术后15天、30天该组血肌酐浓度最低;术后30天,仍然存活的CTLA4Ig组移植肾显示较多淋巴细胞浸润,CTLA4Ig RPM组移植肾显示很少淋巴细胞浸润.结论:共刺激阻断剂与雷帕霉素联合应用可有效抑制排斥反应,显著延长大鼠移植肾存活时间.     

ABCG2在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的 探讨干细胞标志物ABCG2在膀胱移行细胞癌中的表达及意义.方法 对40例膀胱移行细胞癌组织(其中Ⅰ级12例,Ⅱ级18例,Ⅲ级10例)和15例正常膀胱组织采用免疫组织化学法检测,对人膀胱癌细胞株BIU-87采用免疫荧光法检测ABCG2蛋白的表达,显微镜观察并对相关图片进行光密度分析.结果 ABCG2阳性表达定位于癌细胞的胞浆和胞膜,在膀胱移行细胞癌组织和人膀胱癌细胞株BIU-87中均检测到ABCG2蛋白的表达,而在15例正常膀胱组织中表达全为阴性,光密度分析提示其表达强度与肿瘤病理分级呈正相关(P<0.05). 结论膀胱移行细胞癌中干细胞标志物ABCG2的表达提示,肿瘤的恶性程度与膀胱移行细胞癌的发生、发展可能存在关联.     

基于抗原表位预测的MUC1模拟肽表位筛选

目的:预测粘蛋白1(Mucin1,MUC1)抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位.方法:对MUC1的二级结构及免疫原性进行分析,预测MUC1的抗原表位.利用纯化获得的Ma695抗体筛选噬菌体随机12肽库,夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列,竞争性抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆.结果:MUC1存在有17个潜在的抗原表位区域.经3轮筛选,获得了14个阳性克隆,DNA序列分析并推导出其氨基酸序列:KHYDPFHHRMPQ,QADTARS VALAG,VPSKPDLHVRSI及MTPIHYWNHNRV;4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上.结论:预测MUC1抗原B细胞表位,为进一步研究MUC1结构和功能奠定了基础.所得序列KHYDPFHHRMPQ,QADTARSVALAG,VPSKPDLHVRSI及MTPIH YWN HNRV能模拟MUC1抗原表位.     

Foxp3转染对大鼠CD4~+T淋巴细胞体外增殖能力的影响

目的 探讨Foxp3基凶转染对大鼠CD4+CD25-T淋巴细胞体外增殖能力的影响.方法 以逆转录病毒载体介导roxp3基凶进入大鼠CD4+CD25-T淋巴细胞,以TGFβ诱导Foxp3基因表达.通过观察报告基因的表达水平及流式细胞仪检测评价转染效率,将转染Foxp3基因的大鼠CD4+CD25-T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞、大鼠脾脏单个核细胞分别与同系大鼠单个核细胞混合培养,液体闪烁法测定各组细胞增殖水平.结果 Foxp3组增殖水平(3 354.18±203.73)略高于调节性T细胞组(2 919.25 ±137.91),但明显低于空白对照组(12 706.06±967.47).结论 经逆转录病毒介导Foxp3基因可在CD4+CD25-T淋巴细胞高表达,并使该细胞获得与CD4+CD25+T淋巴细胞相似的免疫无能及免疫抑制特性.     

调和阴阳针刺法治疗急性脑梗死临床观察

目的观察调和阴阳针刺法治疗急性脑梗死的临床疗效。方法采用随机抽样法，将符合要求的患者分为治疗组和对照组，每组30例。在常规用药的基础上，分别采用调和阴阳针刺法和常规针刺法，治疗3星期后评价其疗效及安全性。结果治疗后，两组的神经功能缺损积分改善程度无显著性差异（P〉0．05）：治疗组中达到正常肌张力的比例更高，而高肌张力比例则明显更低，两者之间差异有统计学意义（P〈0．05）：两组的针刺不良反应发生率较低。结论研究初步显示，针灸治疗急性脑梗死是安全可行的：调和阴阳针刺法能较好地调节患者的肌张力。     

霉酚酸对致耐受性树突状细胞延长移植肾存活效应的影响

目的探讨霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)对致耐受性树突状细胞(dendritic cells,DC)延长移植肾存活效应的影响。方法以BN、Lewis大鼠为肾移植供、受体;在供体DC培养过程中加入3种浓度MPA,以CTLA-4Ig基因转染DC使之成为表达CTLA-4Ig的致耐受DC;观察DC形态变化并检测受体脾细胞对上述DC的刺激反应。将未处理的致耐受DC以及0.05μmol/L MPA处理DC于肾移植前72h分别注入受体(组1、组2),注入供体DC的受体为组3,未注入DC的受体为对照(组4),观察受体血肌酐变化和移植肾存活时间。结果MPA组DC形态老化延缓,脾细胞对3种浓度MPA处理的DC刺激反应均显著低于对未经MPA处理致耐受DC的刺激反应;与对照相比,组1、组2移植肾存活时间显著延长,差异有统计学意义(P<0.01),其中组2延长更为明显〔(81.1±14.6)d vs(8.9±0.8)d,P<0.001〕,组3存活时间显著缩短(5.3±0.6d,P<0.05)。术后45d后组2血肌酐水平明显低于组1。结论MPA预处理可降低致耐受DC的抗原提呈能力,提高其延长移植肾存活的效能。     

一种避孕免疫原的设计、合成及免疫原性研究

目的探讨如何将人滋养层细胞促融合表位模拟肽构建成有效的避孕免疫原。方法选择人滋养层细胞促融合表位模拟肽与一种通用辅助T细胞表位（PADRE）作为骨架，设计、合成多抗原肽（MAP）多肽和线性嵌合肽两种结构免疫原，并分别与等量弗氏佐剂混悬后免疫雌性C57BL／6小鼠，观察体液免疫反应的特点。结果在小鼠的血清和子宫黏膜冲洗液中，MAP多肽均比线性嵌合肽诱发出更高的抗体滴度；同时，经免疫组化法特异性抗体可以特异识别滋养层细胞相关抗原表位。结论辅助T细胞表位引入及增加多肽免疫原结构复杂性可提高其免疫原性，显著增强免疫反应强度。在以模拟表位肽为基础肽苗设计中，MAP结构是一种较好的结构。