蜱抗凝血肽与RGDS肽重组基因的酵母表达载体构建

目的构建蜱抗凝血肽与RGDS肽重组基因,将其克隆到甲醇酵母,建立分泌表达载体pPIC9K。方法设计、合成蜱抗凝血肽与RGDS肽的双功能分子的重组基因,对人工合成的目的基因片段进行酶切、测序鉴定。运用PCR技术,扩增目的基因,PCR产物经胶回收后克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K,用双酶切和DNA测序鉴定重组质粒。结果PCR、酶切鉴定和DNA测序证明双功能基因重组质粒构建成功。结论该方法能方便、高效地获得所需的多拷贝基因,为下一步在毕赤酵母中表达双功能分子蛋白建立了基础。     

蜱抗凝血肽与RGDS肽重组基因在毕赤酵母中的表达及活性分析

目的利用毕赤酵母表达系统进行蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子重组基因的真核表达研究。方法首先将蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子的重组基因的表达质粒pPIC9K/TAP经限制性内切酶SalⅠ酶切线性化后,电转化酵母菌株GS115感受态细胞,并经MD平板与MM平板、G418抗性筛选,PCR鉴定,得到重组酵母工程菌GS115/pPIC9K-TAP,经甲醇诱导分泌表达并对表达产物进行初步鉴定。结果蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子重组基因在毕赤酵母中获得成功表达,表达产物有抗凝血因子活性和抗血小板的作用。结论蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子重组基因在毕赤酵母中获得分泌性表达,表达产物显示抗凝血因子活性和抗血小板的作用。     

动态监测骨科围术期患者血浆F1+2、D-二聚体、AT-3的临床意义

目的通过对骨科围术期患者凝血酶原片段1+2(F1+2)、D-二聚体及血浆抗凝血活酶Ⅲ(AT-3)的动态监测,探讨深静脉血栓前动态监测的可行方法。方法选择182例骨科股骨骨折行内固定手术治疗的患者作为研究对象,其中血栓发生组13例,无血栓发生组169例。对所有患者术前晨、术后1d晨、术后3d晨和术后5d晨、术后7d晨5个时点空腹血浆中的F1+2、D-二聚体、血浆AT-3活性参数进行监测,并进行对比研究。结果血栓发生组的血浆F1+2水平和D-二聚体水平较无血栓发生组高,AT-3活性较无血栓发生组低,差异有统计学意义(P0.05)。F1+2及D-二聚体水平均从术后3d开始明显上升,血浆F1+2水平上升持续时间较短,手术7d后血浆F1+2水平与术前相比,差异无统计学意义(P0.05);而D-二聚体水平在术后7d与术前相比,其上升水平差异有统计学意义(P0.05);AT-3水平在术前及术后水平改变,差异无统计学意义(P0.05)。结论术后发生DVT患者中,血浆F1+2及D-二聚体水平与深静脉血栓形成的危险呈正相关关系,AT-3变化呈负相关关系,三者联合可作为预测术后深静脉血栓的指标。     

溴敌隆杀鼠剂对小家鼠杀灭效果观察

<正> 临沭县鼠类以小家鼠为主,该县近几年来一直使用传统灭鼠药——敌鼠钠盐进行灭鼠,但该药物存在很多缺点、用量大,投放次数多,时间长,耗工多等。为了寻求更科学更可靠更低毒有效的的灭鼠药物,以适应巩固和发展无鼠害县的工作需要,自1994年开始使用高效低毒广谱抗鼠药——溴敌隆,取得一定效果,现将结果报告如下:1 材料与方法1.1 观察现场 实验现场选择在本县具有代表性的后杨楼村(农村),居民住房多为砖     

基于病例报告文献对草药和膳食补充剂降低华法林抗凝作用的分析与评价

目的对病例报告报道的草药和膳食补充剂(HDS)的降低华法林抗凝作用进行分析和评价。方法检索国内外相关数据库(截至2023年6月24日), 选择草药、HDS与华法林相互作用致抗凝作用降低的病例报告, 根据患者国际标准化比值降低程度和血栓事件发生情况评价HDS与华法林相互作用程度;根据HDS与华法林相互作用的因果关系、病例报告数量和其他证据(国家相关机构发布警告、临床研究、药代动力学/药效动力学研究、动物实验研究等), 建立HDS与华法林相互作用可靠性评分标准。≥9分为高度可靠, 6～8分为较可靠, 3～5分为可能可靠, ≤2分为可疑可靠。结果共收集到17篇文献, 涉及25例患者、11种HDS。降低华法林抗凝作用程度为重度的HDS有2种, 包括人参(西洋参, 红参等)和没药;中度者5种, 包括贯叶连翘、茶(绿茶、红茶)、薄荷、辅酶Q10和壳聚糖;轻度者4种, 包括黄芪、牛油果、海藻和黄豆。降低华法林抗凝作用可靠性评价结果为高度可靠者仅1种, 为贯叶连翘(评分为10分);较可靠者2种, 为人参和茶(评分分别为8和6分);可能可靠者7种, 包括没药、薄荷、辅酶Q10、壳聚糖、黄芪、牛油果和海藻...     

美批准抗凝血药Effient（prasugrel）

Daiichi Sankyo公司与礼来公司表示美国FDA已批准新型血栓预防药物Effient（prasugrel，普拉格雷）用于预防接受经皮冠状动脉介入（PCI）治疗后的冠脉综合证患者的血栓形成。Effient帮助预防血小板凝聚成块，在接受PCI手术后使用阿司匹林与Effient已证明可降低冠脉综合证患者发生心血管事件的风险。     

杏仁与桃仁理化鉴别及对家兔抗凝血作用比较

目的:考察杏仁与桃仁的鉴别方法及对家兔凝血作用的影响.方法:采用石蜡切片法,比较了其显微组织结构;以苦杏仁苷为对照品,进行了薄层鉴别;采用毛细血管法比较其对家兔凝血时间的影响.结果:通过种皮的脉纹进行鉴别,既准确又易于操作;薄层鉴别能区分出其成分差异;山桃仁有较好的抗凝血作用.结论:杏仁与桃仁是两类不同的中药,为杏仁与桃仁的鉴别提供了科学依据.     

芩连四物汤化学物质基础及其抗凝血活性研究

目的:研究芩连四物汤的化学物质基础及其抗凝血生物效应。方法:采用水煎醇沉,醇溶液减压回收乙醇,用适量水溶解后,上D101大孔树脂采用不同浓度的乙醇梯度洗脱,各不同洗脱部位采用硅胶柱层析的方法分离,所得单体通过UV,IR,NMR及MS等方法确定其化学结构;将所得成分配成水溶液(100μmol·L^-1),采用体外法测定对血浆凝血酶时间(TT)的影响。结果:从芩连四物汤中分离并鉴定了5个黄酮类成分、1个生物碱、3个芳香酸、1个倍半萜类成分及2个其它类化合物。黄酮苷元、芳香酸、生物碱及倍半萜类化合物均能显著延长血浆凝血酶时间(TT)。结论:首次对芩连四物汤整方进行化学物质分离和结构分析研究,其中9个化合物,包括千层纸素A、汉黄芩素、6-甲氧基汉黄芩素、小檗碱、黄芩素、阿魏酸、香草酸、咖啡酸、地黄苦苷元显示了一定的体外抗凝血活性。