梅毒苍白密螺旋体多表位抗原基因的构建、表达及免疫反应性的鉴定

目的为梅毒检测试剂提供特异性强、灵敏度高的新型多表位重组抗原。方法PCR扩增Tp17和Tp0453基因的优势抗原表位,连接后插入pQE32质粒中构建多表位嵌合重组体pQE32/Tp0453-17,IPTG诱导表达,免疫印迹法检测表达产物的免疫反应性。结果成功构建了多表位嵌合重组质粒pQE32/Tp0453-17,经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Tp0453和Tp17基因,片段长约1180 bp,其测序结果与GenBank上登录序列完全一致;SDS-PAGE分析表达产物发现,融合基因表达的重组蛋白Mr约为52×103,表达产物占全菌总蛋白的19.3%,并且在细胞内主要以包涵体形式存在;用Western印迹法检测显示,该重组蛋白能与梅毒患者的阳性血清反应,具有良好的抗原性。结论成功表达了具有良好免疫反应性的多表位嵌合重组抗原,为新型梅毒快速诊断试剂盒的研究奠定了良好的实验基础。     

下呼吸道感染鲍氏不动杆菌耐药性及产β-内酰胺酶分析

目的分析下呼吸道分离出的鲍氏不动杆菌耐药性及产β-内酰胺酶。方法用K—B法进行药物敏感性检测，按表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），按表型筛选法检测高产AmpC酶。结果感染者多为呼吸重症监护病房（RICU）入院者，多有吸氧吸痰史，行气管插管、机械通气者15例，患者年龄大，使用过广谱抗菌药物；对头孢西丁、头孢唑林耐药率〉93．0％，对氧氟沙星、阿米卡星耐药率均〉70．0％，而对阿莫西林／克拉维酸、头孢他啶耐药率较低，〈10．0％，ESBLs、AmpC酶检出率分别为16．oN、29．0％。结论鲍氏不动杆菌耐药率高，应加强药敏检测，指导临床合理应用抗菌药物，防止下呼吸道感染的暴发流行。     

参附注射液对中晚期非小细胞肺癌患者化疗后免疫功能的影响

目的探讨参附注射液对中晚期非小细胞肺癌患者化疗后免疫功能的影响。方法将符合条件的76例中晚期非小细胞肺癌患者随机分为对照组和治疗组。治疗组静脉滴注参附注射液60 ml/d,两组均行4周期的化疗,检测化疗后两组免疫指标的变化情况。结果治疗结束后,治疗组患者的外周血白细胞总数与血小板数量均明显高于对照组,治疗组患者免疫球蛋白水平降低明显小于对照组,治疗组的T淋巴细胞亚群CD3＋和CD4＋的百分率和CD4＋/CD8＋比值明显高于对照组,而CD8＋的百分率明显低于对照组（均P〈0.05）。结论参附注射液可减轻肿瘤化疗药物对骨髓的抑制,有效改善机体的免疫功能。     

衡阳地区HIV阳性妇女宫颈HPV感染情况研究

目的了解本地区人类免疫缺陷病毒（HIV）阳性女性宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染状况,为HIV阳性人群中HPV感染的防治提供依据。方法采用ELISA法和胶体金法检测4576例女性患者血清或血浆中的HIV抗体,两种方法均为阳性标本再送检确认。PCR＋膜杂交法检测病人宫颈脱落细胞及宫颈粘液标本进行HPV病毒基因分型。结果 4576例病例中,HIV感染率为0.83%;HPV感染率为21.02%。HIV阳性组中HPV感染率为60.53%,HIV阴性组中HPV感染率20.69%,差异有统计学意义（χ^2=36.02,P〈0.005）。在962例HPV阳性病例中,HIV阳性组的混合HPV感染率为56.52%;HIV阴性组的混合HPV感染率为20.98%;差异有统计学意义（χ^2=16.62,P〈0.005）。结论 HIV阳性妇女的宫颈HPV感染率高,且高危与多重HPV感染常见,提示HPV感染与HIV感染患者关系密切。     

衡阳地区鲍曼不动杆菌基因分型及医院感染分布情况

目的研究鲍曼不动杆菌医院感染分子流行病学的情况,为控制医院感染提供直接、可靠的参考依据。方法对衡阳地区2011年1月～12月临床送检18 000份标本中分离出的480例鲍曼不动杆菌的药敏试验结果等进行回顾性分析,了解鲍曼不动杆菌医院感染现状;建立随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法对其中140株多重耐药鲍曼不动杆菌进行基因分型。结果 480例鲍曼不动杆菌标本主要来自ICU、呼吸内科、烧伤科等;标本分布以痰标本最高占65.0%,其次为伤口分泌物标本占20.0%,中段尿10.0%,其它类型标本占5.0%;480株鲍曼不动杆菌的多重耐药情况非常严重,对亚胺培南/美罗培南耐药率分别为36.0%和38.0%,对其它大多数抗菌药物的耐药率为80%以上;140株多重耐药鲍曼不动杆菌用RAPD分型方法分为8种类型:A～H,其中A、B、C 3型共占70.0%。结论鲍曼不动杆菌耐药性呈上升趋势,且具有多重耐药性;衡阳地区医院感染多重耐药鲍曼不动杆菌可能存在院内的克隆传播。     

全自动血细胞分析仪XE-5000检测中单核细胞假性增高原因分析

目的分析全自动血细胞分析仪XE-5000检测外周静脉血白细胞分类单核细胞假性增高的原因。方法选择单核细胞分类增高的标本,运用日本生产的SysmexXE-5000全自动血细胞分析仪对外周静脉血白细胞进行细胞分类,并与手工涂片显微镜镜检分类结果进行对比,并分析总结原因。结果外周血如出现核左移、异型淋巴、原始细胞等均可以引起全自动血细胞分析仪单核细胞分类计数假性增高,并且比例越高,影响越大。结论对于全自动血液分析仪检测单核细胞分类比例增高的标本都必须要进行人工涂片镜检复查。     

ghrelin抑制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞粘附分子表达

目的 探讨不同剂量ghrelin预处理对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞粘附分子表达的作用. 方法 人脐静脉内皮细胞经传代培养后随机分配为对照组、ox-LDL组及1 ng/mL、10 ng/mL与100 ng/mL ghreli预处理组,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)与细胞间粘附分子-1( ICAM-1)的RNA水平变化. 结果 与空白对照组相比:ox-LDL组内皮细胞VCAM-1与ICAM-1分子的表达水平明显升高(P＜0.05).与ox-LDL组相比,1ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL ghrelin预处理可使内皮细胞VCAM-1 mRNA含量依次降低33％、52％、63％,内皮细胞ICAM-1 mRNA分子表达水平依次降低18％、46％、57％.结论 ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞中粘附分子VCAM-1及ICAM-1的表达有明显的抑制作用.     

多重耐药鲍曼不动杆菌主动外排系统adeA的分布

目的 探讨主动外排系统adeA与鲍曼不动杆菌多重耐药的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)筛选鲍曼不动杆菌的主动外排基因adeA,应用琼脂稀释法检测主动外排抑制剂碳酰氰间氯苯腙(CCCP)联合抗菌药物对多重耐药鲍曼不动杆菌生长的影响.结果 收集的60株鲍曼不动杆菌临床分离株对亚胺培南、美罗培南耐药率分别80.0%和81.7%,对其它大多数抗菌药物的耐药率为90%以上;60株临床分离株检测出adeA主动外排基因52株,检出率为86.7%;CCCP可减少多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的外排作用,增加抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑制率.结论 鲍曼不动杆菌是医院感染重要的多重耐药病原菌,adeA主动外排作用可能在本地区鲍曼不动杆菌多重耐药中发挥非常重要的作用.     

衡阳地区儿童血培养病原菌的分布及耐药性分析

目的了解医院2007-2009年小儿血培养病原菌菌群分布及其耐药性。方法 3522份小儿血标本经BACTEC 9120全自动血培养仪培养检测,分离出的病原菌用API半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果共分离出212株病原菌,血培养阳性率6.02%,其中革兰阳性菌145株,占68.4%,革兰阴性菌67株,占31.6%,检出前5位的病原菌依次为:凝固酶阴性葡萄球菌、沙门菌属、大肠埃希菌、肠球菌属、克雷伯菌属,分别占49.5%、10.8%、8.0%、7.6%、6.6%;各主要致病革兰阳性菌对万古霉素敏感;葡萄球菌属的耐药情况严重,对苯唑西林、青霉素、红霉素及庆大霉素的耐药率>75.0%,肠球菌属对青霉素与左氧氟沙星耐药率为100.0%,链球菌属对克林霉素和红霉素的耐药率为100.0%;常见革兰阴性菌对头孢呋辛与头孢噻吩均耐药,各主要致病革兰阴性菌对亚胺培南、美罗培南、奈替米星、头孢他啶、阿莫西林/克拉维酸及哌拉西林/他唑巴坦敏感。结论小儿血培养病原菌以革兰阳性菌占优势,凝固酶阴性葡萄球菌居首位,检出菌均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要。