实时荧光定量RT-PCR检测肝癌组织中miR-122a及miR-224的表达

目的 运用实时荧光定量RT-PCR方法分析miR-122与miR-224两种miRNAs在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨以miRNAs为靶点在早期肝癌中的临床诊断意义.方法 采用基于2(-△△ACT)的实时荧光定量RT-PCR法对35例肝癌组织及癌旁组织的miR-122a及miR-224进行了定量分析,结果经由Noahernblot验证.结果 与正常组织相比,在所有的被检肝癌组织中,均发现了miR-122a有不同程度的表达下调(P<0.01),而上述肝癌组织中的miR-224的定量结果显示该miRNA表达显著增加(P<0.001).结论 HCC组织中存在上述两种miRNAs表达水平的改变.实时荧光定量RT-PCR法为早期、准确的在临床上检测肝组织癌变提供了新的思路.     

姜黄素抗黑色素瘤分子机制研究进展

黑色素瘤是源于皮肤,粘膜,眼和中枢神经系统色素沉着区域的黑色素细胞的恶性肿瘤,虽然其发病率不高,但恶性程度极高,并且瘤细胞很早就能发生侵袭与转移,从而使患者预后很差。目前黑色素瘤的治疗方式仍以外科手术治疗为主,联合放疗、化疗、中药的综合治疗方案,然而有关黑色素瘤的中医中药治疗方面的研究尚处于起步阶段。最新研究表明,姜科植物属姜黄、郁金、莪术等的活性成分之一姜黄素具有广泛的抗癌、抗炎、抗氧化等药理特性,特别是姜黄素在黑色瘤的预防和治疗中起到不容忽视的作用,姜黄素主要通过抑制黑色素瘤细胞的增殖,促进其凋亡等途径参与黑色素瘤细胞的消亡。本文主要针对姜黄素抗黑色素瘤及其分子机制研究进展作一综述。     

结肠癌组织和癌旁组织miRNA表达谱研究

目的探讨结肠癌癌组织和癌旁组织中miRNA的表达差异,寻找潜在的结肠癌特异表达谱。方法miRNA表达芯片检测手术切除未发生转移的原位结肠癌组织和癌旁组织标本中miRNA表达水平,并采用Real-time PCR对差异表达的miRNA进行验证。结果miRNA表达芯片分析发现肿瘤细胞中24种miRNA表达下调,27种表达上调。miR-145、miR-143在癌组织中表达显著下调,miR-451在癌组织中表达显著上调,并被Real-time PCR方法进一步证实。结论结肠癌癌组织和癌旁组织中miRNA的表达存在差异,miR-145、miR-143在结肠癌组织中表达下调,miR-451表达上调,结肠癌组织具有特异miRNA表达谱,可作为结肠癌潜在诊断芯片进行开发。     

重症监护病房病原菌分布及耐药性分析

目的 了解医院近2年重症监护病房(ICU)病原菌分布及其耐药情况.方法 收集2007～2008年ICU送检的1013份标本,采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验.结果 共分离出562株病原菌,阳性率55.5%,革兰阴性菌构成比明显高于革兰阳性菌,最常见的革兰阴性菌分别是铜绿假单胞菌(21.0%)、鲍氏不动杆菌(16.7%)、大肠埃希菌(8.2%)、产酸克雷伯菌(7.1%)、肺炎克雷伯菌(6.0 0A)、嗜麦芽寡养单胞菌(5.2%)与阴沟肠杆菌(4.6%);在革兰阳性菌中以葡萄球菌属和肠球菌属为主;主要革兰阴性杆菌对头孢哌酮/舒巴坦均敏感,而对其他多数常用抗菌药物耐药,肠杆菌科中产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物耐药率明显高于非产ESBLs菌株,葡萄球菌属对万古霉素、替考拉宁等敏感;耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)对常用抗菌药物耐药性均高于对甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS),肠球菌属对多数常用抗菌药物耐药,仅对万古霉素与喹奴普汀/达福普汀敏感.结论 调查结果表明,ICU病原菌以革兰阴性菌为主,检出菌均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要.     

增殖的胰腺β细胞可上调肿瘤干细胞标志物ALDH

目的：探讨肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶（ALDH）在小鼠胰腺β细胞增殖模型中的表达情况。方法通过胰腺部分切除术构建小鼠胰腺β细胞增殖的模型，采用流式细胞术和免疫荧光检测其胰腺β细胞中ALDH的表达，采用Western blot检测细胞周期相关蛋白CyclinD1、CDK2及CDK4的表达。结果胰腺部分切除术后2周的胰岛细胞中aldefluor＋细胞明显增多，Ki-67＋β细胞比例明显升高，且aldefluor＋细胞CyclinD1、CyclinD2和CDK4蛋白表达水平均明显高于aldefluor－细胞。胰腺部分切除术后小鼠胰腺中的ALDH＋细胞绝大部分均为β细胞。结论胰腺部分切除术诱导的增殖胰岛β细胞具有较高的ALDH活性，aldefluor荧光标记可能作为筛选增殖β细胞的标记物。     

湖南衡阳地区鲍曼不动杆菌的分布和耐药性分析

目的 了解某院近4年鲍曼不动杆菌的感染分布及其耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 收集该院2007年1月～2010年12月住院患者送检标本,采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验,用WHONET 5.4分析试验结果.结果 该院鲍曼不动杆菌主要分离自痰标本,以重症监护病房(ICU)最多见.鲍曼不动杆菌除对亚胺培南和美罗培南耐药率较低外,对其他抗菌药物耐药率均较高.在ICU分离的鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率明显高于普通病房.结论 鲍曼不动杆菌感染主要引起ICU和神经外科病房患者的呼吸道感染,且耐药性十分严重.     

S-腺苷甲硫氨酸合成酶参与肺炎支原体生物被膜形成

目的 了解S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶在肺炎支原体(Mp)生物被膜(BF)形成中的作用,初步探讨MpBF的形成机制。方法 在24孔细胞培养板中培养Mp,结晶紫染色后半定量分析Mp M129标准菌株和22株临床分离株的BF形成能力。荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)分析编码SAM合成酶的基因(metX)在BF形成能力强和形成能力弱的Mp菌株中的转录水平。分别用西奈芬净和迷迭香酸处理Mp,qRT-PCR检测metX的mRNA相对表达水平,结晶紫染色半定量分析MpBF的形成量。结果 13株Mp菌株(56.5%,13/23)可在细胞培养板中显著形成BF。3株形成MpBF菌株的metX mRNA转录水平均高于3株不能形成BF的Mp菌株(P<0.05)。西奈芬净可抑制MpBF的产生和metX mRNA的转录水平;迷迭香酸可促进MpBF形成及metX mRNA的表达。结论 metX mRNA的转录水平与MpBF的形成相关,SAM合成酶可能参与MpBF的形成。     

临床研究3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的比较

目的 比较3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV) DNA的灵敏度和特异度,初步探讨其用于HBV DNA检测的临床价值.方法 用3种免核酸提取PCR试剂盒分别检测30例慢性乙型肝炎患者及30例阴性参比血清标本中的HBV DNA,以荧光定量PCR结果为标准,比较3种试剂检测灵敏度和特异度.结果 3种试剂盒的HBV DNA阳性检出率分别为93.3%(28/30)、96.7%(29/30)、100%(30/30);3种试剂检测HBV阴性的特异度均为100%;3种试剂检测灵敏度A公司为103 IU/mL,B、C公司均为102 IU/mL.结论 使用免核酸提取PCR试剂检测HBV快速、简便、高效,可用于临床HBV DNA快速检测.     

雷帕霉素抑制人肝癌细胞HepG-2侵袭能力的实验研究

目的 观察雷帕霉素(Rapamycin)体外对肝癌HepG-2细胞侵袭能力的影响.方法 用不同浓度的雷帕霉素作用于体外培养的HepG-2细胞,应用Matrigel胶模拟基质检测细胞侵袭能力.结果 雷帕霉素能显著降低肿瘤细胞的侵袭能力,随剂量增高降低越明显.各药物处理组与阴性对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)....     

Neu-P11对急性高血压大鼠血压的影响

为探讨褪黑素受体激动剂Neu-P11(Piromelatine)对急性高血压大鼠血压的影响及其相关机制,本实验采用Trendelenburg(头低脚高80°位置)卧位法建立急性高血压SD大鼠模型。将40只SD大鼠分为正常对照组10例和模型组30例,30只模型组大鼠建模成功后又分为高血压组,Mel治疗组,Neu-P11治疗组(n=10)。实验末心脏取血检测大鼠血清氧化应激水平。结果显示,与高血压组相比,Neu-P11治疗后能显著降低急性高血压大鼠血压和血清过氧化物丙二醛(MDA)水平,升高抗氧化物酶超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)血清水平(P＜0.05)。提示Neu-P11可能通过抑制氧化应激降低急性高血压大鼠血压。