逆转录法制备地高辛标记的食管癌cDNA探针

目的 :制备食管癌cDNA探针用于ReverseNorthernBlot筛选差异基因片段。方法 :提取食管癌组织总RNA ,通过逆转录反应 ,用地高辛标记为cDNA探针。结果 :所制备的探针灵敏度高达 0 .0 1ng/L。结论 :用该方法制备cDNA探针快速、经济 ,所需模板RNA量少 ,可用于大规模初筛差异基因片段的研究。     

端粒酶催化亚单位蛋白及PCNA在尖锐湿疣组织中的表达及意义

目的探讨尖锐湿疣(CA)组织中端粒酶催化亚单位蛋白(hTERT)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及意义。方法用免疫组化SP法分别检测35例CA组织和18例正常上皮组织中hTERT和PCNA的表达。结果hTERT蛋白在CA组织中阳性29例,阳性率为82.86%,在18例正常上皮中,阳性1例,阳性率为5.56%,二者比较差异有显著性(P<0.01);PCNA在35例CA组织中阳性30例,阳性率85.71%,而18例正常上皮中PCNA阳性率55.56%,PCNA两组阳性率之间差异有显著性(P<0.05);hTERT和PCNA之间的阳性表达呈正相关(r=0.681,P<0.01)。结论hTERT在CA发生、发展中起一定作用,hTERT和PCNA表达呈正相关,表明hTERT与细胞的增殖有关。     

前方牵引矫治不同年龄骨性Ⅲ类错合的临床研究

目的 研究上颌前方牵引矫治不同年龄段安氏骨性Ⅲ类错合临床效果.方法 19例患者按年龄分为两组,均行前方牵引而后对两组治疗前后X线头颅定位侧位片进行头影测量分析.结果 矫治结束后上颌骨前移、长度增加,ANB角增大,下颌骨向后下旋转.上前牙唇倾,下前牙轻度舌倾,上唇位置前移,下唇位置无明显改变,软组织侧貌改善.两组对比证明小年龄组颌骨变化大而大年龄组牙齿的改变更大.结论 上颌前方牵引是矫正因上颌发育不足而导致的安氏骨性Ⅲ类错合的有效方法,既能很好的促进上颌骨生长和前移,同时又可以控制下颌骨的生长,并有效地影响下颌骨的生长方向.矫治时间:乳牙、替牙早期效果好.     

真核起始因子4E反义寡核苷酸对人食管癌EC-1细胞中真核起始因子4E表达的影响

目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核酸(ASODN)对人食管癌EC-1细胞中eIF4E表达的影响.方法:将针对eIF4E不同基因位点的2条反义寡核苷酸(ASODN1、2)和1条无义寡核苷酸(N-ODN)转染EC-1细胞(设5、10、15 μmol/L 3个转染浓度),分别培养24、48、72 h,并设空脂质体转染作为空白对照,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测转染后细胞中eIF4E蛋白和mRNA表达的变化.结果:ASODN 1、2转染EC-1细胞培养24、48、72 h后,各组中eIF4E蛋白和mRNA的表达均降低,2者分别与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05);ASODN1、2组每个时间段内随浓度增加ASODN抑制效应增强,差异具有统计学意义(F=9.423、10.284、10.496、7.621、8.420和9.089,P＜0.05),组间相同时间点、相同浓度的抑制效应比较差异无统计学意义(P＞0.05);N-ODN组和空白对照组对eIF4E的表达均无抑制效应.结论:特异性的ASODN能有效抑制人食管癌EC-1细胞中eIF4E的表达.     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05);不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(X2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

脑星形胶质细胞瘤组织P21~(WAF1/CIP1)mRNA的表达与p53基因突变的关系

目的：探讨脑星形胶质细胞瘤组织Ｐ２１~(WAF1/CIP1) ｍＢＮＡ的表达与p~(53)基因突变的关系及其意义。方法：应用 ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８ 例新鲜脑星形胶质细胞瘤组织中上述两种基因进行研究。结果：p~(53)基因在脑星形胶质细胞瘤组织中的突变率为２８．９％（１１／３８），且在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤突变率显著高于Ⅰ～Ⅱ级者（Ｐ＜０.０５）；Ｐ２１~(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ在Ⅲ，Ⅳ级中的表达显著低于Ⅰ～Ⅱ级肿瘤组织（Ｐ＜０．０１）；１１例p~(53)基因突变组中，Ｐ２１~(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ表达阳性率明显低于２７例p~(53)基因未突变组（Ｐ＜０．０５）。结论：脑星形胶质细胞瘤组织中Ｐ２１~(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ的低表达可能与p~(53)基因突变有关。     

转移性和非转移性食管癌组织中KAI1基因的表达

目的:探讨KAI1基因与食管癌转移的关系.方法:应用原位杂交法分析KAI1基因在有淋巴结转移和无淋巴结转移的食管癌组织中的表达.结果:在有淋巴结转移和无淋巴结转移的食管癌组织中KAI1 mRNA的表达未见显著差异 (P>0.05),且KAI1 mRNA表达与食管癌的分化无关(P>0.05).结论:KAI1基因对食管癌转移的发生无抑制作用;KAI1基因的表达也与食管癌的分化无关.     

改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的比较

目的 :比较改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的差别。方法 :应用两种方法分别提取 2 0例兔肝脏的总RNA ,对所提RNA的产率、纯度及完整性进行鉴定。结果 :对比两种方法所提的RNA的产率、纯度及完整性 ,均无显著性差异 ,且RT_PCR产生均扩增出了 β_actin的目的条带。 结论 :采用改良一步热酚法较之Trizol试剂盒更具有简便经济的特点 ,特别适宜大量样品的处理     

卵巢上皮性肿瘤微血管密度及VEGF表达的病理意义

目的：探讨血管生成与卵巢上皮性肿瘤的发展关系。方法：应用免疫组化法研究了卵巢上皮性肿瘤石蜡包埋的病理组织，其中良性腺瘤17例，交界性腺瘤15例，卵巢癌29例。结果：良性腺瘤、交界性腺瘤、卵巢癌MVD值递增，交界性肿瘤及卵巢癌组织中VEGF表达率均明显高于良性肿瘤，有淋巴结转移的VEGF表达率，MVD值较无淋巴结转移者明显增高，但两者与卵巢癌的病理分级及临床分期无关，VEGF阴性组MVD值低于VEGF阳性组。结论；VEGF表达率，MVD值在卵巢上皮性肿瘤的生长及转移中可能起着重要作用。     

非放射性同位素mRNA差异显示技术

mRNA差异显示技术是基因筛选的重要方法 ,经典的方法皆通过同位素来进行 ,非同位素mR NA差异显示技术近年得到了一定的发展。本文对目前所应用的四种非同位素mRNA差异显示法 ,即荧光标记法、银染法、化学发光检测法和地高辛标记法进行了阐述评价。