c—erbB—2,ras,p53基因产物在大肠癌及癌前病变中的表达

目的：探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｒａｓ、ｐ５３基因的表达与大肠癌发生发展的关系以及其对大肠癌早期诊断、预后判断的价值。方法：对４５例大肠癌及３６例癌旁非腺瘤型不典型增生、１７例大肠腺瘤，用免疫组化方法检测基因产物的表达。结果：ｐ５３在大肠癌的阳性表达率为５７．８％，ｐ５３蛋白高表达的癌旁非腺瘤型不典型增生及大肠腺瘤均为中度或高度不典型增生。ｐ５３蛋白表达与大肠癌的组织分化程度、淋巴结转移有关（Ｐ〈０．     

食管癌组织的微血管密度及其临床病理意义

目的探讨微血管密度在食管癌中的临床病理学意义。方法应用免疫组织化学SP法,对65例食管鳞状细胞癌患者的手术切除标本,进行血管内皮细胞CD     

荧光标记mRNA差异显示技术在分离食管癌相关基因片段中的应用

目的 :以荧光标记的mRNA差异显示技术分离食管癌及其正常食管粘膜组织相关的差异基因片段。方法 :结合GenomyxLRTM DNA测序 /差异显示系统及GenomyxSCTM 荧光图象扫描系统 ,以及配套的FluoroDD和HI EROGLYPHmRNAProfileKit,采用荧光标记的mRNA差异显示技术进行检测。结果 :从人食管癌及正常食管粘膜组织间 ,同时直接分离出了相关的癌基因或抑癌基因片段 74条。结论 :该技术方便、快捷 ,值得推广应用     

人食管癌相关基因cDNA片段的克隆、筛选与初步鉴定

目的 :筛选和鉴定人原发性食管癌组织的相关基因 ,揭示食管癌的癌变机理。方法 :用高效、灵敏的荧光mRNA差异显示技术 ,以食管癌及相应的正常食管粘膜组织为对照 ,通过对其基因表达的比较 ,找出差异条带 ,利用ReverseNorthernDotBlot、DNA序列分析和NorthernBlot,并结合mRNA原位杂交技术对被筛片段进行鉴定。结果 :①在实验中分离、鉴定了 74条差异片段 ,其中包括正常组织表达而癌组织中不表达的差异片段 5 4个 ,癌组织中表达而正常组织不表达的差异片段 2 0个。②其中 1个片段C5 7(337bp)在GenBank数据库中没有发现同源的已知基因或片段 ,推测其可能为食管癌相关基因。③经NorthernBlot检测C5 7在癌组织中有表达信号。④原位杂交技术检测C5 7在癌组织中具有较高的阳性表达率 (74% )。结论 :食管癌组织中C5 7可能是新的食管癌相关的候选癌基因 ,它与食管癌的发生发展可能有关     

平扫呈高密度肾细胞癌的CT、病理及临床分析

通过对本院 1 995～ 1 997年 48例肾细胞癌患者资料的回顾性分析 ,发现 1 7例ＣＴ平扫呈肉眼高密度 ,这一影像特征与其病理和临床表现有一定相关性 ,现总结如下。1　临床资料1 1　仪器与方法ＣＴ扫描机为ＴＯＳＨＩＢＡ公司的ＴｃＴ 6 0 0ＸＴ和ＧＥ公司的Ｈｉｇｈ ｓｐｅｅｄ螺旋ＣＴ(ＳＣＴ)。均做了平扫和增强扫描 ,ＳＣＴ还做了双期及延迟增强扫描。凡病灶直径 <6ｃｍ时 ,ＣＴ增强均在病变区改为 0 5ｃｍ的薄层扫描。病理描述包括切面颜色 ,有无明显出血、坏死。镜下描述包括肿瘤的细胞特征 ,组织结构和病变与正常肾组织间界面情况…     

食管癌消减cDNA文库的构建

目的：采用消减抑制杂交技术,研究正常食管粘膜和食管癌组织之间的基因表达差异状况,分离食管癌相关基因片段,构建食管癌的消减cDNA文库。方法：以食管癌组织为测试子（tester),以正常食管粘膜组织为驱赶子（driver),用消减抑制杂交方法分离食管癌差异表达片段。将该差异表达片段克隆至T载体,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建食管消减cDNA文库。结果：用消减抑制杂交技术分离食管癌差异表达片段,经蓝白斑筛选,得到220个白色克隆;再用PCR方法快速筛选出100个两分别含连接子Adaptor1及Adaptor2R 的阳性重组质粒100个,从而成功地构建了中国人食管癌特异的消减cDNA文库。结论：构建了中国人食管癌特异的消减cDNA文库。消减抑制杂交技术能快速有效地分离差异表达基因,方法简便、灵敏度高。使用PCR法快速筛选阳性克隆,对于消减文库的构建具有重要意义。     

PCR在消减文库构建中的应用

目的 :消减文库构建过程中 ,用PCR技术快速筛选重组阳性克隆。方法 :将白色单菌落加入氨苄抗性LB培养液中 ,37℃摇振培养过夜 ,取细菌悬液作PCR模板。结果和结论 :以PCR方法筛查重组阳性克隆 ,可以简便快速鉴定重组阳性克隆 ,不需提取质粒。筛选重组阳性克隆可直接用细菌悬液作PCR模板 ,在消减文库构建时 ,能大大提高工作效率。     

逆转录法制备地高辛标记的食管癌cDNA探针

目的 :制备食管癌cDNA探针用于ReverseNorthernBlot筛选差异基因片段。方法 :提取食管癌组织总RNA ,通过逆转录反应 ,用地高辛标记为cDNA探针。结果 :所制备的探针灵敏度高达 0 .0 1ng/L。结论 :用该方法制备cDNA探针快速、经济 ,所需模板RNA量少 ,可用于大规模初筛差异基因片段的研究。     

cAMP类似物对人恶性胶质瘤细胞BT_(325)增殖与分化的影响

目的：观察cAMP类似物8－Br－cAMP对人恶性胶质细胞HT325增殖与分化的影响。方法：在人恶性胶质瘤细胞BT325中加终浓度为10－5mol／L的8－Br－cAMP体外培育24h后，应用酸解DNA及甲绿－派洛宁染色技术在同一标本上鉴别增殖型细胞和分化型细胞。结果：8－Br－cAMP处理组增殖型细胞占67％，分化型细胞占33％；而对照组增殖型细胞占85％，分化型细胞占15％。结论：8－Br－cAMP对BT325细胞有抑制增殖和促进分化效应。     

改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的比较

目的 :比较改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的差别。方法 :应用两种方法分别提取 2 0例兔肝脏的总RNA ,对所提RNA的产率、纯度及完整性进行鉴定。结果 :对比两种方法所提的RNA的产率、纯度及完整性 ,均无显著性差异 ,且RT_PCR产生均扩增出了 β_actin的目的条带。 结论 :采用改良一步热酚法较之Trizol试剂盒更具有简便经济的特点 ,特别适宜大量样品的处理