高度自动化下血细胞分析实习带教经验总结

现代血细胞分析不但为临床提供准确、可靠的检测参数,还为临床提供有价值的形态学分析指标。在高度自动化、信息化、标准化的今天,如何培养高、精、尖的血细胞分析检验专项复合型人才,值得教育工作者不断去总结、思考、探索、改进。笔者作为血细胞分析实习带教教师,结合多年工作经验,总结出如下经验:掌握标准操作规程,大胆上机实践;融入ISO15189认可体系,学习标准化质量管理;利用多种资源,教学形式多样化;培养科研能力,完成毕业课题;规范实习考核,检验学习效果。     

HBx促进ZO1的泛素化降解增加肝癌细胞迁移与侵袭

目的:研究乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对HepG2细胞ZO1表达水平的影响及闭锁小带蛋白1（ZO-1）对肝癌细胞迁移和侵袭的作用。方法:分别转染HBV全基因质粒（pcDNA3.1-HBV1.1或pcDNA3.1-HBV1.3）、空载质粒（pcDNA3.1）和HBV编码蛋白质粒（pHBc、pHBs、pHBp、pHBx）至...     

重视临床与实验室的沟通

随着基础医学与临床医学的迅猛发展，检验医学发展迅速，全自动、半自动检验设备已普遍地应用。高新技术的临床应用、新方法、新技术、新项目的开展日益增多、循征医学临床论证等，使检验与临床的关系越来越密切，检验医学已成为临床医学的重要组成部分。     

临床生物化学检验自动化下实习生带教工作总结

近20年来,随着科学技术的不断发展,新的方法和技术不断涌现,检验医学在面临新机遇的同时,也面临着新的挑战。为了适应新世纪医学教育发展的要求,培养符合新时代特征的高素质医学检验人才,     

乙型肝炎病毒PreS1基因的原核表达及免疫学性质鉴定

目的 构建含乙型肝炎病毒(HBV)PreS1基因的原核表达载体,获得高纯度、有生物活性的PreS1重组蛋白.方法 采用PCR法扩增PreS1及其N末端和C末端部分基因序列,克隆入原核表达载体pGST-MOLUC.重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测.用谷胱甘肽-Sepharose 4B凝胶亲和层析纯化的重组融合蛋白免疫新西兰家兔,制备GST-PreS1融合蛋白的抗血清.进一步用ELISA分析融合蛋白特异抑制HBV病毒与抗体结合的能力.结果 重组质粒转化宿主菌后成功诱导出Mr39 000、31 000和32 000的GST-PreS1、GST-PreS1N及GST-PreS1C融合蛋白,均与预期相对分子质量相符.Western blot检测获得特异的杂交条带.采用谷胱甘肽-Sepharose 4B凝胶纯化的融合蛋白纯度约为90%左右.融合蛋白免疫家兔后抗体滴度达到10-7.病毒捕获ELISA实验表明,融合蛋白能特异抑制病毒与家兔免疫血清结合.结论 GST-PreS1融合蛋白能够在大肠杆菌中高效表达,其纯化产物是研究PreS1基因在HBV感染过程中作用的有用工具.     

铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA基因分型研究

目的采用随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测铜绿假单胞菌(PA)医院感染.方法以优化的反应体系和扩增条件对临床分离的49株PA进行RAPD基因分型,通过指纹图比较与分析,确证医院感染类别与爆发.结果 49株PA共得RAPD 29型,分型率100%;以周为时限, PA医院感染爆发流行共3起;9例个体连续感染的PA有7例为内源性医院感染,2例为外源性医院感染.结论 RAPD可对PA进行分子流行病学调查.     

丙型肝炎病毒5''非翻译区DNA序列在HepG2细胞中的启动子活性

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)基因组5'非翻译区(5'UTR)DNA序列在HepG2细胞中的启动子活性,以了解HCV的复制调控机制.方法分别构建HCV基因组5'UTR DNA正反向序列驱动虫荧光素酶基因表达的质粒5'UTR- Luc(+)/(-)和5'UTR DNA序列驱动绿色荧光蛋白基因表达的质粒5'UTR -EGFP(+)/(-),分别转染HepG2细胞,用双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶的表达水平,逆转录聚合酶链反应检测虫荧光素酶基因m R N A水平,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白基因的表达水平,并与相应对照作比较,来证实H CV基因组5'UTR DNA序列的启动子活性.结果 5'UTR- LUc(+)有明显的虫荧光素酶表达,但比pGL3 control表达水平低(Luc/R为0.690 ± 0.086,Luc/RL为4.210±0.340),而5'UTR-Luc(-)和pGL3 enhancer无明显虫荧光素酶表达(Luc/RL分别为0.095±0.008和0.044±0.00 5);逆转录聚合酶链反应结果与之相符,5'UTR- Luc(+)检测到虫荧光素酶基因mRNA,而5'UTRLuc(-)则未检测到.5'UTR- EGFP(+)观察到较强绿色荧光,而5'UTR -EGFP(-)无荧光表达.结论 HCV基因组5'UTR DNA序列具有明显的启动子活性,能启动下游基因的表达,在HCV基因组复制过程中有重要作用.     

联合应用HE4和ROMA诊断卵巢癌的研究进展

卵巢癌的早期表现与卵巢良性病变的临床表现相似,导致卵巢癌确诊时,患者有可能已处于卵巢癌晚期。由于卵巢癌患者的治疗时机极易被延误,导致卵巢癌在各种女性肿瘤的病死率中高居第五位。卵巢癌的治疗技术已有一定程度的提高,但仍无法降低其病死率。目前临床主要通过血清 CA125检测和妇科超声检查诊断卵巢癌,但 CA125在灵敏度和特异度方面均存在一定局限性。多种恶性肿瘤（如子宫内膜癌、宫颈癌、肺癌等）及良性疾病（如肾衰、肝功能衰竭、渗出液、卵巢囊肿、子宫肌瘤、子宫内膜异位症等）均可导致血清 CA125水平升高。人附睾蛋白4（HE4）是具有卵巢癌早期诊断性能的血清标志物。本文对 H E4作为卵巢癌的肿瘤标志物的相关研究及进展进行了综述。     

新型邻位诱导熵驱动策略用于幽门螺杆菌DNA的高灵敏检测

目的:构建新型邻位触及诱导熵驱动信号放大策略用于DNA的高灵敏检测。方法:靶DNA诱导邻位连接,与两亲和探针共同形成夹心复合物,从而形成邻位引物。所获得的邻位引物通过介导分支迁移点亮熵驱动放大环路以实现DNA的检测。结果:在最优实验条件下,本工作所制备的DNA传感策略显示出非常高的灵敏度和选择性,动态范围从0.01～100 nmol/L,检测限低至6.7 pmol/L。结论:这种快速、高性价比和高效率的信号放大策略为DNA检测提供了一个简单且灵敏的平台。     

多重耐药鲍曼不动杆菌感染危险因素分析

目的：了解本地区多重耐药鲍曼不动杆菌感染的危险因素及耐药状况。方法回顾性分析80例多重耐药鲍曼不动杆菌患者与48例非多重耐药鲍曼不动杆菌感染患者的基本资料,以及菌株药敏试验检测结果;采用Logistic回归分析方法分析多重耐药菌株感染的独立危险因素。结果多重耐药鲍曼不动杆菌感染的独立危险因素包括入住重症监护病房（IC U ）、侵入性操作、两种及其以上抗菌药物序贯使用或联合使用。多重耐药鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、替卡西林/克拉维酸的耐药率均大于60％,对除上述4种药物以外抗菌药物的耐药率均超过90％。结论多重耐药鲍曼不动杆菌感染的独立危险因素包括入住IC U、侵入性操作、两种及其以上抗菌药物序贯使用或联合使用。严格进行医院环境的消毒和医院感染的监测,合理使用抗菌药物,是控制多重耐药鲍曼不动杆菌感染的重要手段。