小鼠细菌性支气管肺炎模型的建立

将氢化可的松和环磷酰胺注入小鼠腹腔以使其处于免疫抑制状态。然后以病原体肺炎克雷伯菌攻击小鼠肺脏造成肺部感染，从而成功地建立了小鼠实验性支气管肺炎模型。该实验动物模型具有典型的病理改变和很好的重复性，可用于药效学研究工作。     

Analysis of Drug Resistance Spectra and Conjugative Plasmid Carrying Rates of P.aeruginosa and Acinetobacter

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培氟沙星体外抗菌活性观察

用肉汤试管稀释法,测定了新药培氟沙星对370株临床分离株的最小抑菌浓度。根据药代动力学的研究结果确定培氟沙星的敏感限为MHC≤2mg/L,耐药限为MIC≥8mg/L。由于全部实验菌的MIC_(90)均落在敏感范围内。说明培氟沙星是一个十分有效的抗菌剂。与其他一些药物的药敏结果相比,培氟沙星的抗菌活性亦明显为高,。     

对苯唑青霉素处于边缘敏感的金黄色葡萄球菌调查分析

对甲氧西林处于边缘敏感的金黄色葡萄球菌(borderline methicillin-susceptible sta phylococcus aureus:BSSA)国外已进行广泛的研究[1],国内未见报道.本文报道23株BSSA临床情况.     

流式细胞术快速鉴定ABO血型亚型

目的 建立流式细胞术快速鉴定ABO血型亚型的实验方法。方法 用荧光素(FITC)标记多人份人源抗-A、抗-B,与受检RBC上的相应抗原结合,利用流式细胞仪快速、特异地分辨每个细胞(生物颗粒)获得细胞的散点图,以RBC设定“门”,用Cell quest verl 2.2软件分析,对照管作“mark”,得测定管阳性细胞的百分率。结果 A型RBC其抗A-FITC百分率为97.40％±0.62％,抗B-FITC百分率为0.40％±0.15％;B型RBC其抗A-FITC百分率为0.42％±0.14％,抗B-FITC百分率为98.36％±0.55％。阴性细胞的x±s=0.43％±0.13％,阳性界值>0.85％(>x±3s)。11例ABO亚型FCM测定结果与血清学方法确认的结果完全一致。结论 流式细胞术鉴定ABO亚型的方法,较之常规的血清学方法,具有简便、快速、结果客观、重复性好之优点。     

结核分枝杆菌mRNA在利福平快速药敏试验中的初步应用

目的　建立一种Mycobacteriumtuberculosis(结核分枝杆菌 ,MTB)mRNA快速敏感的检测方法并初步探讨其在利福平快速药敏试验中的应用。方法　用超声粉碎和Tripure试剂提取MTB总RNA ,针对α抗原 85B的特定编码序列建立MTBmRNA的RT PCR检测方法 ;观察MTB在含 1、2、4 μg/ml利福平的液体培养基中生长时 ,85BmRNA的动态改变 ,确定快速检测利福平耐药菌株的最佳药物浓度和时间点 ,比较RT PCR和快速培养法对 2 0株临床分离菌株利福平耐药性检测的差异性。结果　 85BmRNA的RT PCR最低检测下限为 10 0 0个细菌。 85BmRNA的动态结果表明 ,在 4 μg/ml利福平中培养 2 4h为最佳药物浓度和时间点。RT PCR和快速培养法对 2 0株临床菌株利福平药敏试验检测结果无显著差异 (χ2 =0 .5 ,P >0 .0 5 ) ,但前者能显著缩短药敏检测周期。结论　检测结核分枝杆菌mRNA的RT PCR方法可望应用于利福平快速药敏试验     

南京地区鲍曼不动杆菌喹诺酮类药物耐药基因突变的研究

目的 调查南京地区鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药情况,并研究其耐药机制。方法 在南京地区的医院随机收集了73株鲍曼不动杆菌,历时9个月。定量肉汤稀释法测定菌株对左氧氟沙星、环丙沙星和加替沙星3种喹诺酮类药物的MIC,PCR扩增gyrA基因和parC基因并进行酶切分析,选取部分PCR扩增产物进行测序。结果 鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星耐药率为39．7％（29／73）;对环丙沙星耐药率为76.7％（56／73）;对加替沙星耐药率为32．9％（24／73）。对3种喹诺酮类药物均耐药的有16株,占21．9％。PCR—RFLP显示,对gyrA基因,耐药株有80．4％（45／56）不能被Hinf Ⅰ酶切,敏感株100％（17／17）被Hinf Ⅰ酶切;对parC基因,耐药株73．2％（41／56）不能被Hinf Ⅰ酶切,敏感株有88.2％（15／17）被Hinf Ⅰ酶切。测序结果：耐药株中的gyrA和parC基因存在突变,敏感株中则不存在突变,并在耐药株中发现gyrA和parC基因新的点突变,Genbank号分别为DQ270238和DQ270239。结论 南京地区鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物耐药情况严重,其耐药与gyrA和parC基因突变有关。     

下呼吸道感染产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

目的了解引起下呼吸道感染产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLS和AmpC基因型，指导临床合理用药。方法收集产ESBLs肺炎克雷伯菌36株，用纸片扩散法进行药敏性试验，表型筛选法检测出同时产AmpC酶的菌株，PCR法检测ESBLs和AmpC酶的基因型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南全部敏感，对所测试的其他药物最小同程度耐约。36株产ESBLs肺炎克雷伯菌中，20株扩增出CTX—M—Ⅲ群基因，15株扩增出TEM基因，SHV和OXA基因各1株，ACT-1（MIR-1）和DHA-1（DHA-2）各4株，12株细菌同时携带2种以上的基因型。结论本院下呼吸道感染患营中分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌主要携带CTXM和TEM基因型，少数携带ACT、DHA、SHV和OXA基因型，可介导对口内酰胺类药物的耐药。本研究未对TEM和SHV基因型作进一步分析。     

荧光定量PCR检测鼻咽部脱落细胞内EBV-DNA

目的 建立荧光定量PCR（FQ－PCR）检测鼻咽部脱落细胞中EBV－DNA的方法。方法 以患者鼻咽部脱落细胞内DNA作为样本，以EB病毒基因序列中EBNA1（核抗原1）基因片段作为扩增的靶DNA，同时从人β－珠蛋白DNA片段作为内参照，合成了两对引物，并设计了两个特异的荧光探针，优化了FQ－PCR反应体系，同时对这两个片段进行扩增，每一标本得到两个Ct值；CtE和Ctβ，得到单位细胞EB病毒的相对量。结果 临床标本29例中，阳性22例，阴性7例，临床资料证实阳性者全部为鼻咽癌（NPC），阴性者全部为非鼻咽癌。结论 建立的FQ－PCR检测鼻咽部脱落细胞中EBV－DNA的方法，能反映单位细胞病毒的复制情况，可用于NPC的筛查，并可能应用于该病的风险评估和疗效观察。     

对尿流式有形成分用于尿路感染诊断的思考

编辑同志: 对贵刊2009年第6期齐杰的<尿流式有形成分及干化学分析在尿路感染诊断中的应用评价>~([1])一文所得出的"联合UF1000i流式尿有形成分分析及尿干化学分析可在早期尿路感染筛查诊断中发挥重要作用;同时对尿细菌培养为阴性的UTI患者的明确诊断具有重要价值"的结论我们有不同的看法,阐述如下.