CD44v6和E-cadherin对食管鳞状细胞癌浸润转移的影响

目的研究CD44v6和E-cadherin在食管鳞状细胞癌中的表达及其与食管鳞状细胞癌浸润转移的关系。方法选取91例食管鳞状细胞癌组织和10例正常食管组织石蜡标本,应用免疫组化方法检测CD44v6和E-cadherin的表达。结果 （1）CD44v6在食管鳞状细胞癌中阳性表达率高于正常食管组织（P〈0.05）;E-cadherin在食管鳞状细胞癌中阳性表达率低于正常食管组织（P〈0.05）。（2）CD44v6的高表达和E-cad-herin的低表达与食管鳞状细胞癌的浸润程度,淋巴结转移和临床分期呈正相关（P〈0.05）;而与肿瘤的分化程度和肿瘤的长度无明显相关性。（3）CD44v6和E-cadherin在食管鳞状细胞癌中的表达呈负相关（r=-0.545,P〈0.01）。结论 CD44v6和E-cadherin在食管鳞状细胞癌组织中的表达与浸润程度,淋巴转移和临床分期密切相关。     

p65基因序列shRNA慢病毒载体构建及其作用功能的初步研究

Objective To obtain shRNA sequences that can stably block the expression of Nuclear Factor kappa- B (p65) in the prostate cancer cell line LNCaP and construct the lentivirus vector.And validate the gene function of p65 in the cell line. Methods According to p65 genetic information, we design siRNA1, siRNA2, siRNA3 those three siRNA sequences targeting the ods area of p65 gene and then form the corresponding four pairs of complementary single strand DNA of shRNA, including the sense strand and the antisense strand. The synthetic shRNA sequence was inserted into the empty pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector, and after transfecting the prostate cancer cells , the inhibitory effect of p65 mRNA by different sequences was detected through real-time PCR, and the inhibitory effect of p65 protein expression was detected by Western-blotting. Thus we can obtain highly effective shRNA sequences in the inhibition of p65 in prostate cancer cells. MTT, flow cytometry, transwell were chosen to test the cell growth, migration and invasive power in vitro to compare the difference of the experimental group, control group and negative group. Results The third shRNA sequence had the best inhibitory effect and the inhibitory effect of p65 mRNA in prostate cancer cell line was 59 % and the protein was 81%. It's position locates in p65 (NM_021975 ) 1096-1113 and it's stemloop sequence is 5'-GATCCGCCCTATCCCTTTACGTCATTCAAGAGATGACGTAAAGGGATAGGGCTTTTTG-3'. After transfecting, the prostate cancer cell line had the low expression of p65 stably. Through MTT, we got the growth curve, which showed that the growth ability of experimental group was significantly decreased compared with the control group and the Logarithmic growth didn't appear in the first 96 hours. Flow cytometry test displayed that the percentage of G0-G1-phase cells in experimental group was 61.49%, and the control group was 44.89%, idle group was 41.52%, which was increasing oberviously. The S-phase cells in the experimental group was 28.58%, compared with the 47.36% and 46. 10% diminished. The results of transwell showed that the experimental group had 16. 5000±6. 62076 cells and the other two groups had 45. 6333 13. 54159 and 36. 8333±5. 68412 cells, which showed the invasive power of experimental group was significantly declined(P＜0.05).Conclusions It's successful to obtain shRNA sequences that can stably block the expression of p65 in the prostate cancer cell line LNCaP and construct the lentivirus vector. p65 can positively regulates the biological behavior of prostate cancer LNCaP cell line in the cell growth, migration and invasive power.     

稳定阻断前列腺癌细胞中p65的shRNA基因序列的获得及蔓病毒载体的构建

目的 获得稳定阻断前列腺癌细胞株Lncap中核因子[NF-κB(p65)]表达的shRNA序列,并构建蔓病毒载体.方法 根据p65基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3 3条针对p65基因cds区的siRNA序列,组建shRNA对应的4对互补的单链DNA,包括siRNA的正义链和反义链;正义链序列按5'向3'顺序依次为:酶切位点(BamH Ⅰ)、干扰序列(19bp)、loop环(TTCAAGAGA)、干扰序列的反向互补序列(19 bp)、中止信号(TTTTT)、酶切位点(EcoR Ⅰ).将合成的序列插入空载体pSI H1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real-time聚合酶链反应(PCR)检测不同序列片段对p65的mRNA抑制效果,通过Western blot检测对p65蛋白表达的抑制效果.从而获得可以稳定高效抑制前列腺癌细胞中p65表达的shRNA序列.结果 设计的3条针对p65的序列中第3条的抑制效果最好,目的序列位于p65(NM_021975)的1096～1113,茎环序列为5'-GATCC GCCCTATCCCTTTACGTCA TTCAAGAGA TGACGTAAAGGGATAGGGC TTTTT G-3'.其对前列腺癌细胞株中p65的mRNA的干扰效率为59%,对其蛋白表达的抑制率为81%.转染细胞后,细胞可以稳定低表达p65.结论 成功获得稳定阻断前列腺癌细胞株Lncap中p65表达的shRNA序列,并构建蔓病毒载体.     

膀胱癌细胞株T24中侧群细胞的分离和功能鉴定

目的 观察膀胱癌细胞株T24中是否存在侧群(SP)细胞及其比例,并鉴定其功能.方法 利用双波长流氏细胞仪(FACS)检测T24中SP细胞的比例,并证实这些SP细胞是否具有癌干细胞的特点.结果 T24中SP细胞占34.7%;与非侧群(NSP)细胞比较,SP细胞有更强的生长增殖能力和克隆形成能力(P＜0.05),表达更高的ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)和干性基因,对放化疗有更强的抵抗能力,有更多的细胞处于G_0/G_1期(87.4%比63.3%,P＜0.05);分选后的sP和NSP细胞经过约10 d的常规培养,SP细胞中NSP的比例占76.2%,而NSP细胞中SP的比例只占2.6%.结论 膀胱癌细胞株T24中存在很高比例的SP细胞,而且这些SP细胞有癌干细胞的特点.     

化痰祛湿法治疗椎动脉型颈椎病的实验研究

目的:通过对椎动脉血流速度、血液黏度、脑凋亡细胞以及凋亡相关蛋白的检测,为化痰祛湿法治疗椎动脉型颈椎病及作用机制提供实验依据.方法: 60只雄性日本大耳兔,随机分为生理盐水组(A组)、盐酸氟桂利嗪组(B组)、小剂量温胆汤组(C组)、大剂量温胆汤组(D组)、合用组(E组,盐酸氟桂利嗪加大剂量温胆汤)和正常喂养组(F灌胃,生药含量为1 g/ml;D组:温胆汤按20 ml·kg-1d-1灌胃,生药含量为2 g/ml;E组:盐酸氟桂利嗪0.8 mg·kg-1d-1加生药含量为2 g/ml的温胆汤20 ml·kg-1d-1(盐酸氟桂利嗪溶于温胆汤中,保证总量20 ml·kg-1d-1).治疗前后分别测定椎动脉血流速度、血液黏度指标,测定完毕后处死并检测脑凋亡细胞和凋亡相关蛋白.采用SPSS 11.5软件包进行统计学分析.结果: 各组动物模型建立满意,E组对家兔椎动脉血流速度、血液黏度的改善最为理想,且脑细胞凋亡指数及凋亡相关蛋白的表达水平最低.结论:在常规治疗椎动脉型颈椎病的基础上加用化痰祛湿法能更好的改善椎动脉血流速度和血液黏度,其作用机制可能和减少脑细胞凋亡有关.     

异常应力条件下关节软骨的变化*

摘要 背景：关节软骨细胞的正常生理功能与其受到的正常应力刺激密切相关,研究应力在关节软骨退行性变中的作用对临床治疗软骨退行性改变具有重要意义。 目的：观察兔膝关节软骨在异常应力条件下的变化,探讨应力对于关节软骨正常生长代谢以及修复过程的影响。 方法：将42只新西兰大白兔随机分为对照组和制动2,4,6周组。采用兔伸膝制动动物模型,对制动2,4,6周及正常兔的膝关节全层软骨进行苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,比较制动前后软骨组织学、病理积分及Ⅱ型胶原分泌的变化情况。 结果与结论：随着制动时间的延长,关节软骨的退变程度逐渐加深,病理积分结果显示各组间差异具有显著性意义(P < 0.01)。免疫组织化学染色结果显示随着制动时间的延长,软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原先增多,后减少。说明异常应力可影响兔关节软骨细胞正常生理活动及其分泌Ⅱ型胶原的能力。 关键词：异常应力;关节软骨;Ⅱ型胶原;免疫组织化学;制动     

阿托品试验致谵妄一例

患者女,64岁.因咳嗽4 d于2008年7月入院.既往无药物过敏史.体格检查:体温36 ℃,脉搏49次/min,心率18次/min,血压120/70 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),体质量75 kg.神志清晰.双瞳孔等大等圆约3 mm,对光反射存在.颈软,无颈静脉怒张及颈动脉异常波动.双肺呼吸音粗,闻及少许干口罗音,心界不大,心率49次/min,心律规则,心音有力,各瓣膜听诊区未闻及杂音.腹平软,肝脾未触及.     

云南省通海县世行贷款中国结核病控制项目效果评价

目的评价在通海县实施世界银行贷款中国结核病控制项目的成效。方法对通海县结核病报表资料进行统计分析。结果通海县结核病控制项目从2003年开始启动,2007年12月31日截止,5年来累计接诊肺结核病例（含疑似患者）4435例,发现活动性肺结核患者475例,其中涂阳肺结核患者223例,新发涂阳203例,复治涂阳20例。新发涂阳病例平均治愈率93．1％,5年来呈上升趋势,从89．3％上升到100％。结论通海县实施世界银行贷款中国结核病控制项目已取得显著成效。     

心理干预对康复期精神分裂症患者心理健康的影响

目的：了解心理干预对康复期精神分裂症患者心理健康的影响。方法：将70例康复期精神分裂症患者随机分为研究组和对照组,每组各35例,对研究组在常规药物治疗的基础上实施心理干预,对照组只接受常规药物治疗。于入组时、入组1个月和2个月,采用焦虑自评量表（SAS）和抑郁自评量表（SDS）分别评估两组患者的心理状况。结果：心理干预后1个月、2个月,干预组患者SAS、SDS标准分与干预前比较有显著性差异,对照组无明显差异。结论：心理干预能有效改善精神分裂症患者的心理症状。     

2018年湖南省肿瘤登记地区恶性肿瘤发病与死亡分析

摘 要：［目的］ 分析湖南省肿瘤登记地区2018年恶性肿瘤的发病与死亡状况。［方法］ 收集2018年湖南省32个肿瘤登记点上报的恶性肿瘤发病与死亡资料,按照地区和性别分层计算湖南省肿瘤登记地区恶性肿瘤的发病与死亡粗率、中标率、世标率、年龄别率、0~74岁累积率。中标率采用2000年全国人口普查的标准人口构成进行计算,世标率采用Segi’s世界标准人口构成进行计算。［结果］ 2018年湖南省肿瘤登记地区恶性肿瘤粗发病率为248.24/10万,中标率为172.27/10万,世标率为168.54/10万,0～74岁累积率为20.01%,男性粗发病率为272.71/10万,女性粗发病率为222.23/10万;城市地区恶性肿瘤粗发病率为285.51/10万,中标率为192.16/10万,世标率为188.83/10万,0～74岁累积率为22.55%,其中男性粗发病率为319.47/10万,女性粗发病率为251.26/10万;农村地区恶性肿瘤粗发病率为230.87/10万,中标率为162.85/10万,世标率为158.92/10万,0～74岁累积率为18.80%,其中男性粗发病率为251.72/10万,女性粗发病率为208.18/10万。男性恶性肿瘤发病率排列前5位的依次是肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌、口腔癌。女性恶性肿瘤发病率排列前 5位的依次是乳腺癌、肺癌、宫颈癌、结直肠癌、肝癌。2018年湖南省肿瘤登记地区恶性肿瘤粗死亡率为154.50/10万,中标率为99.02/10万,世标率为98.40/10万,0～74岁累积率11.94%,男性粗死亡率为196.83/10万,女性粗死亡率为109.52/10万。城市地区恶性肿瘤死亡率为170.37/10万,中标率为105.52/10万,世标率为105.07/10万,0～74岁累积率为12.23%,其中男性粗死亡率为221.62/10万,女性粗死亡率为118.67/10万;农村地区恶性肿瘤粗死亡率为147.10/10万,中标率为96.03/10万,世标率为95.32/10万,0～74岁累积率为11.81%,男性粗死亡率为185.70/10万,女性粗死亡率为105.09/10万。男性恶性肿瘤死亡率排列前5位的依次是肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌、食管癌;女性恶性肿瘤死亡率排列前5位的依次是肺癌、肝癌、结直肠癌、宫颈癌、乳腺癌。［结论］ 肺癌、女性乳腺癌、结直肠癌、宫颈癌、肝癌、胃癌、食管癌等是湖南省肿瘤登记地区发病率和死亡率位居前列的病种,应作为湖南省重点防控的恶性肿瘤;女性乳腺癌和宫颈癌的发病率、死亡率均排在前5位,应作为女性重点防控的主要恶性肿瘤。口腔癌上升到男性发病率前5位,也应引起相应关注,及早采取措施加以防范。