输尿管镜在急性梗阻性无尿中的应用

目的:探讨输尿管镜在急性梗阻性无尿的临床应用价值。方法:回顾性分析46例急性梗阻性无尿患者输尿管镜治疗的临床资料。结果:本组46例输尿管镜碎石取石术或输尿管镜检,术中留置单侧或双侧输尿管双J管,成功42例,失败4例,成功率91%。术后39例肾功能恢复正常,7例无好转,其中2例需要定期血液透析治疗。结论:输尿管镜在处理急性梗阻性无尿中具有重要作用,可迅速解除梗阻,保护肾功能。     

经尿道电切治疗小体积前列腺增生并膀胱颈挛缩疗效观察

目的探讨经尿道电切治疗小体积前列腺增生并膀胱颈挛缩的疗效和安全性。方法对86例下尿路梗阻临床症状明确的小体积前列腺增生患者及膀胱颈挛缩的患者进行经尿道前列腺切除术（TURP）及经尿道前列腺＋膀胱颈电切术（TURBN）,术后随访对比其手术前后国际前列腺症状评分（IPSS）、残余尿量（RU）、最大尿流率（Qmax）等指标,评价TuRP和TURBN在治疗小体积前列腺增生和膀胱颈挛缩中的作用。结果手术时间20—55min,平均（35±9．5）min。切除腺体重4—30g,平均（12．5±7．2）g。出血30—150ml,平均（60±21．2）ml。随访6～62个月,平均33个月后,IPSS评分由术前（27．5±3．0）分降至术后（8．9±2．9）分（P〈0．05）,残余尿量由（280±30）ml降至（28±10）ml（P〈0．05）,最大尿流率由术前的（9．0±3．5）ml／s升至术后（21．2±3．7）mL／s（P〈0．05）,术后2例患者出现尿道狭窄,2例出现瘢痕狭窄,需要再次手术治疗。结论TuRP＋TURBN治疗小体积前列腺增生及膀胱颈挛缩所致膀胱出口梗阻,疗效较满意,是较理想的治疗方法。     

原发性精囊腺癌的腹腔镜治疗

目的探讨经腹入路腹腔镜治疗原发性精囊腺癌的方法和疗效。方法本组3例,术前判断早期未侵犯前列腺2例,肿瘤侵犯前列腺1例,手术采用经腹入路腹腔镜单纯精囊腺切除术或精囊腺加前列腺切除术并行膀胱尿道吻合术。结果3例手术均在腹腔镜下顺利完成,无中转开放,手术时间120～200min,出血量50～300ml,术中无直肠损伤等并发症,术后恢复良好,术后病理为精囊腺癌,2例侵犯前列腺,切缘无阳性。随访8～25月无肿瘤复发。结论腹腔镜经腹入路行精囊腺恶性肿瘤手术切除创伤小,可根据肿瘤的范围、周围器官受累情况,选择单纯精囊及肿瘤切除、前列腺精囊及肿瘤切除或盆腔其他受侵犯脏器切除,术中应注意直肠损伤等并发症。     

骨髓间充质干细胞在膀胱脱细胞基质上的生长及分化***★

背景：传统方法多采用平滑肌细胞和移行上皮细胞构建组织工程膀胱，并进行支架材料的双面种植，但由于平滑肌细胞取材培养困难，且体外传代有限，双面种植较为困难。 目的：实验拟验证以骨髓间充质干细胞及膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱的可行性。 设计：基础实验研究。 单位：中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心。 材料：实验于2006-03/2007-05在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。实验室级别为卫生部部属医院开放实验室。1月龄SD大鼠，雌雄不限，体质量80~ 100g，由中山大学实验动物中心提供。新鲜猪膀胱取自南方医科大学动物实验中心。 方法：采用全骨髓培养连续贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，并应用流式细胞仪检测其表面抗原。采用去污剂洗涤法制备猪膀胱脱细胞基质，并测定其纯度及特性。将第3代骨髓间充质干细胞接种到膀胱脱细胞基质上，以添加25 ng/L血管内皮生长因子（VEGF165）的培养液进行体外、体内复合培养，检测其相容性。体内实验以细胞单独培养为对照，体外实验以未植入细胞的材料为对照，并模拟合适的微环境诱导骨髓间充质干细胞生长分化，分别在4，8周后取出动物体内的复合材料行组织切片检查，并进行免疫组织化学角蛋白染色，检测上皮细胞再生情况。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质的生物相容性。 结果：①采用全骨髓法成功培养出骨髓间充质干细胞，行流式细胞仪检测细胞表面抗原显示，传代第3代细胞CD29阳性细胞为99.43%。②制备的膀胱脱细胞基质具有良好的生物特性，镜下见均质状态的基质和细丝状的胶原纤维。体内外相容性实验表明骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的相容性，细胞生长状态良好。③4周后组织切片检查可见组织中较多炎症细胞浸润，胶原及弹性纤维排列紧密，免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、不连续的单层上皮生长，8周后可见组织中已无明显炎症细胞浸润反应，胶原及弹性纤维排列紧密，免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、连续的多层上皮生长。 结论：骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的生物相容性，并且在体内与周围组织有良好的生物相容性，可以作为构建组织工程膀胱的材料。     

DNA甲基转移酶1、3b基因在膀胱癌的表达及意义

肿瘤的发生与抑癌基因的失活有关[1],目前研究结果显示,抑癌基因甲基化是其失活的重要机制之一.我们采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PcR)检测Dnmtl、3b mRNA在膀胱癌组织及正常膀胱黏膜组织中的表达,并探讨其表达的意义.     

靶向于前列腺癌特异性膜抗原shRNA的筛选与鉴定

目的 获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)表达的shRNA序列.方法 根据PSMA基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对PSMA基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列,组建与之对应的4对互补的单链DNA序列,包括siRNA的正义链和反义链;正义链序列按5'向3'顺序依次为:酶切位点(BamH Ⅰ)、干扰序列(19 bp)、loop环(TrCAAGAGA)、干扰序列的反向互补序列(19 bp)、中止信号(TTTTT)、酶切位点(EcoR Ⅰ).将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real-time PCR检测不同序列片段对PSMA的mRNA抑制效果并通过Western blot检测对目的 蛋白PSMA的抑制效果.结果 设计的3条针对PSMA的序列中第2条的抑制效果最好,目的 序列位于PSMA(NM_004476)的1207到1226,茎环序列为5'-GATCC GTCTCAAAGTGCCCTACAATrcAAGAGA TTGTAGGGCACTTTGAGAC TTTTT G-3'.其对前列腺癌细胞株中PSMA的mRNA的抑制率为60.0%,对其蛋白表达的抑制率为86%.转染细胞后,细胞可以稳定低表达PSMA.结论 成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中PSMA表达的shRNA序列.     

高效抑制核因子κ—B的茎环RNA基因序列的获得

目的获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列。方法根据核因子kappa—B基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对核因子kappa-B基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列,组建与之对应的4对互补的单链DNA序列,包括siRNA的正义链和反义链：正义链序列按5’向3’顺序依次为：酶切位点（BamH Ⅰ）、干扰序列（19bp）、loop环（TFCAAGAGA）、干扰序列的反向互补序列（19bp）、中止信号（TTTTT）、酶切位点（EcoR Ⅰ）。将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real—timePCR检测不同序列片断对核因子kappa—B的mRNA抑制效果。结果设计的3条针对核因子kappa—B的序列中第3条的抑制效果最好,目的序列位于核因子KAPPA—B（NM_021975）的1096到1113,茎环序列为5＇-GATCC GCCCTATCCCTITACGTCA TTCAAGAGA TGACGTAAAGGGATAGGGC TTITT G-3’。其对前列腺癌细胞株中核因子kappa—B的mRNA的干扰效率为59％,对其蛋白表达的抑制率为81％。转染细胞后,细胞可以稳定低表达核因子kappa—B。结论成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列,为后期研究核因子kappa-B在前列腺癌发病中的作用机理等研究提供了基础。     

保留前列腺包膜的膀胱全切除-原位回肠新膀胱术

目的 探讨保留前列腺包膜的膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术的手术方法及疗效.方法 2002年5月至2008年9月,对35例浸润性膀胱癌患者施行了保留前列腺包膜的膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术,其中开放手术22例,腹腔镜手术13例.术中保留患者的前列腺包膜、精囊、输精管、神经血管束.术后对患者进行定期随访,了解患者的生活质量、排尿情况,并检测患者的残余尿量、新膀胱压力及性功能情况等.结果 全部患者均顺利完成保留前列腺包膜和勃起神经的膀胱根治性切除一原位回肠新膀胱术.其中开放手术时间为210～330 min,平均271 min;术中出血200～800 ml,平均460 ml.腹腔镜手术时间为210～420 min,平均343 min;术中出血80～800 ml,平均377 ml.术后3个月IVU及代膀胱造影检查,显示双肾显影良好,无输尿管返流及梗阻,代膀胱充盈良好,容量约250～350 ml.术后6个月随访,所有患者均能自行排尿,2例患者有夜间尿失禁.术后71.4%(20/28)的患者保留了阴茎勃起功能.无患者出现尿道残端或前列腺包膜肿瘤复发,有2例发生盆腔淋巴结转移,1例骨转移.结论 保留前列腺包膜的膀胱根治性切除术与标准的膀胱前列腺根治性切除术相比,具有操作简单、控尿效果好、可保留勃起神经等特点,适用于对性功能要求较强、肿瘤未累及膀胱颈及前列腺的较年轻的患者.然而,其肿瘤控制效果还有待于进一步观察.     

经脐单孔腹腔镜乳头式输尿管膀胱再植术初步体会

 【目的】 探讨采用自制多通道套管和常规器械经脐行腹腔镜下乳头式输尿管膀胱再植术的可行性和疗效｡【方法】 2009年4月至2009年12月对9例输尿管末端狭窄或异位开口的患者行腹腔镜输尿管膀胱再植术｡气管内全麻下经脐部切口置入自制多通道套管(用手套和两个弹性橡胶环制作而成)｡从髂血管分叉处找到并游离异常输尿管至膀胱壁段处切断,末端1 cm纵行切开外翻缝合形成乳头,输尿管内置双J管,从膀胱后顶部切口插入膀胱约1 ~ 1.5 cm,4-0可吸收线间断吻合6针,检查无渗漏后放置盆腔引流｡【结果】 全部手术均在单孔腹腔镜下成功完成,无需术中增加套管或开放手术｡平均手术时间为87 min,平均估计失血量小于30 mL,无术中并发症发生,术后1 d可起床活动,引流管､尿管､双J管分别在2 d､7 d､30 d拔除,内镜下可见输尿管乳头,术后2 ~ 3月静脉尿路造影(IVU)及膀胱尿道造影未见吻合口狭窄和反流,脐部切口美观｡【结论】 经脐单孔腹腔镜下输尿管膀胱再植术具有创伤小､美观经济､恢复快的优点｡输尿管乳头式膀胱再植法狭窄率低､抗反流效果好,镜下操作简便,值得推广应用｡     

经脐单一切口腹腔镜联合2mm trocar治疗腹腔型隐睾

目的探讨经脐单一切口腹腔镜联合2 mm trocar治疗腹腔型隐睾的应用价值。方法 2009年11月～2011年1月,采用经脐单一切口腹腔镜联合2 mm trocar治疗11例腹腔型隐睾。脐下缘1.5 cm弧形切口,置入自制多通道trocar,置入5 mm腹腔镜和操作器械1把,脐与耻骨联合连线中点处直接穿刺置入2 mm trocar,置入2 mm腹腔镜抓钳,进行手术。结果 10例11侧成功将隐睾下降固定于阴囊;1例1侧行隐睾切除术。手术时间30～70 min,平均45 min。无手术并发症发生。10例随访3～14个月,平均8.8月,未发现下降的睾丸萎缩。结论经脐单一切口腹腔镜联合2 mm trocar治疗操作不复杂的腹腔型隐睾可行。