经脐单一切口腹腔镜联合2mm trocar治疗腹腔型隐睾

目的探讨经脐单一切口腹腔镜联合2 mm trocar治疗腹腔型隐睾的应用价值。方法 2009年11月～2011年1月,采用经脐单一切口腹腔镜联合2 mm trocar治疗11例腹腔型隐睾。脐下缘1.5 cm弧形切口,置入自制多通道trocar,置入5 mm腹腔镜和操作器械1把,脐与耻骨联合连线中点处直接穿刺置入2 mm trocar,置入2 mm腹腔镜抓钳,进行手术。结果 10例11侧成功将隐睾下降固定于阴囊;1例1侧行隐睾切除术。手术时间30～70 min,平均45 min。无手术并发症发生。10例随访3～14个月,平均8.8月,未发现下降的睾丸萎缩。结论经脐单一切口腹腔镜联合2 mm trocar治疗操作不复杂的腹腔型隐睾可行。     

高效抑制核因子κ—B的茎环RNA基因序列的获得

目的获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列。方法根据核因子kappa—B基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对核因子kappa-B基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列,组建与之对应的4对互补的单链DNA序列,包括siRNA的正义链和反义链：正义链序列按5’向3’顺序依次为：酶切位点（BamH Ⅰ）、干扰序列（19bp）、loop环（TFCAAGAGA）、干扰序列的反向互补序列（19bp）、中止信号（TTTTT）、酶切位点（EcoR Ⅰ）。将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real—timePCR检测不同序列片断对核因子kappa—B的mRNA抑制效果。结果设计的3条针对核因子kappa—B的序列中第3条的抑制效果最好,目的序列位于核因子KAPPA—B（NM_021975）的1096到1113,茎环序列为5＇-GATCC GCCCTATCCCTITACGTCA TTCAAGAGA TGACGTAAAGGGATAGGGC TTITT G-3’。其对前列腺癌细胞株中核因子kappa—B的mRNA的干扰效率为59％,对其蛋白表达的抑制率为81％。转染细胞后,细胞可以稳定低表达核因子kappa—B。结论成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列,为后期研究核因子kappa-B在前列腺癌发病中的作用机理等研究提供了基础。     

保留前列腺包膜的膀胱全切除-原位回肠新膀胱术

目的 探讨保留前列腺包膜的膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术的手术方法及疗效.方法 2002年5月至2008年9月,对35例浸润性膀胱癌患者施行了保留前列腺包膜的膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术,其中开放手术22例,腹腔镜手术13例.术中保留患者的前列腺包膜、精囊、输精管、神经血管束.术后对患者进行定期随访,了解患者的生活质量、排尿情况,并检测患者的残余尿量、新膀胱压力及性功能情况等.结果 全部患者均顺利完成保留前列腺包膜和勃起神经的膀胱根治性切除一原位回肠新膀胱术.其中开放手术时间为210～330 min,平均271 min;术中出血200～800 ml,平均460 ml.腹腔镜手术时间为210～420 min,平均343 min;术中出血80～800 ml,平均377 ml.术后3个月IVU及代膀胱造影检查,显示双肾显影良好,无输尿管返流及梗阻,代膀胱充盈良好,容量约250～350 ml.术后6个月随访,所有患者均能自行排尿,2例患者有夜间尿失禁.术后71.4%(20/28)的患者保留了阴茎勃起功能.无患者出现尿道残端或前列腺包膜肿瘤复发,有2例发生盆腔淋巴结转移,1例骨转移.结论 保留前列腺包膜的膀胱根治性切除术与标准的膀胱前列腺根治性切除术相比,具有操作简单、控尿效果好、可保留勃起神经等特点,适用于对性功能要求较强、肿瘤未累及膀胱颈及前列腺的较年轻的患者.然而,其肿瘤控制效果还有待于进一步观察.     

骨髓间充质干细胞在膀胱脱细胞基质上的生长及分化***★

背景：传统方法多采用平滑肌细胞和移行上皮细胞构建组织工程膀胱，并进行支架材料的双面种植，但由于平滑肌细胞取材培养困难，且体外传代有限，双面种植较为困难。 目的：实验拟验证以骨髓间充质干细胞及膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱的可行性。 设计：基础实验研究。 单位：中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心。 材料：实验于2006-03/2007-05在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。实验室级别为卫生部部属医院开放实验室。1月龄SD大鼠，雌雄不限，体质量80~ 100g，由中山大学实验动物中心提供。新鲜猪膀胱取自南方医科大学动物实验中心。 方法：采用全骨髓培养连续贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，并应用流式细胞仪检测其表面抗原。采用去污剂洗涤法制备猪膀胱脱细胞基质，并测定其纯度及特性。将第3代骨髓间充质干细胞接种到膀胱脱细胞基质上，以添加25 ng/L血管内皮生长因子（VEGF165）的培养液进行体外、体内复合培养，检测其相容性。体内实验以细胞单独培养为对照，体外实验以未植入细胞的材料为对照，并模拟合适的微环境诱导骨髓间充质干细胞生长分化，分别在4，8周后取出动物体内的复合材料行组织切片检查，并进行免疫组织化学角蛋白染色，检测上皮细胞再生情况。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质的生物相容性。 结果：①采用全骨髓法成功培养出骨髓间充质干细胞，行流式细胞仪检测细胞表面抗原显示，传代第3代细胞CD29阳性细胞为99.43%。②制备的膀胱脱细胞基质具有良好的生物特性，镜下见均质状态的基质和细丝状的胶原纤维。体内外相容性实验表明骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的相容性，细胞生长状态良好。③4周后组织切片检查可见组织中较多炎症细胞浸润，胶原及弹性纤维排列紧密，免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、不连续的单层上皮生长，8周后可见组织中已无明显炎症细胞浸润反应，胶原及弹性纤维排列紧密，免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、连续的多层上皮生长。 结论：骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的生物相容性，并且在体内与周围组织有良好的生物相容性，可以作为构建组织工程膀胱的材料。     

低分子量肝素钠治疗不稳定型心绞痛的护理体会

我院2000年8月～2004年6月,应用低分子量肝素钠治疗不稳定型心绞痛患者25例,效果满意,现将护理体会报告如下. 1资料与方法     

芳基三氮烯甲氧嘧啶选择性抗小鼠Lewis肺癌转移的作用

本实验对比研究了芳香三氮烯甲氧嘧啶(ATMP)和环磷酰胺(CY)对小鼠Lewis肺癌的作用。ATMP在不影响原发瘤生长的同时,可明显减少自发性转移的发生,而CY对原发瘤及转移瘤都有抑制作用。³H-TdR部分参入实验证明,ATMP对Lewis肺癌的细胞毒作用很弱。ATMP对人工转移无影响;提前给药不影响自发性转移;不改变小鼠腹腔巨噬细胞Fc受体的活力。上述实验提示,ATMP具有选择性的抗转移作用,其作用环节可能是抑制肿瘤细胞从原发部位的脱落以致不能进入血液循环。     

靶向于前列腺癌特异性膜抗原shRNA的筛选与鉴定

目的 获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)表达的shRNA序列.方法 根据PSMA基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对PSMA基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列,组建与之对应的4对互补的单链DNA序列,包括siRNA的正义链和反义链;正义链序列按5'向3'顺序依次为:酶切位点(BamH Ⅰ)、干扰序列(19 bp)、loop环(TrCAAGAGA)、干扰序列的反向互补序列(19 bp)、中止信号(TTTTT)、酶切位点(EcoR Ⅰ).将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real-time PCR检测不同序列片段对PSMA的mRNA抑制效果并通过Western blot检测对目的 蛋白PSMA的抑制效果.结果 设计的3条针对PSMA的序列中第2条的抑制效果最好,目的 序列位于PSMA(NM_004476)的1207到1226,茎环序列为5'-GATCC GTCTCAAAGTGCCCTACAATrcAAGAGA TTGTAGGGCACTTTGAGAC TTTTT G-3'.其对前列腺癌细胞株中PSMA的mRNA的抑制率为60.0%,对其蛋白表达的抑制率为86%.转染细胞后,细胞可以稳定低表达PSMA.结论 成功获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中PSMA表达的shRNA序列.     

氮烯咪胺类似物的抗肿瘤作用

抗癌三氮烯化合物氮烯咪胺(DTIC)由于化学性质不稳定等缺点,使其应用受限制。本所合成了一系列芳基三氮烯化合物,其中3号化合物(T_3)不仅化学性质稳定~[1],而且还有一定的药理活性,我们研究了T_3的抗癌和毒性作用,并与DTIC进行了初步比较。     

同时稳定抑制X连锁凋亡抑制蛋白和生存素表达对胰腺癌细胞上皮-间质转化及侵袭性的影响

目的:探讨同时抑制X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和生存素(survivin)后,对胰腺癌Panc-1细胞上皮-间质转化(EMT)及侵袭性的影响,并初步探讨其机制。方法:在前期实验构建的胰腺癌Panc-1-XS细胞(XIAP和survivin同时稳定抑制)中,运用Transwell小室实验及划痕实验分别检测细胞侵袭和迁移能力;半定量Western印迹分别检测钙黏蛋白-E(E-cadherin,上皮标志物)、锌指转录因子(Slug)蛋白(间质标志物)及第10号染色体同源丢失性磷酸酶——张力蛋白基因(PTEN)和磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)蛋白的表达情况。结果:Panc-1-XS细胞侵袭和迁移能力显著下降,同时伴随E-cadherin蛋白表达显著上调及Slug蛋白显著下调,即出现间质-上皮转化(MET);PTEN蛋白表达上调、P-Akt蛋白表达下调。结论:同时抑制XIAP和survivin表达,能部分逆转胰腺癌Panc-1细胞EMT表型,显著减弱其侵袭和迁移能力;此调控过程可能通过PTEN/PI3K/Akt途径实现。