果胶钙胶囊结肠定位释放介质的确定

目的：确定以果胶钙为代表的多糖类结肠定位制剂的结肠释放介质。方法：采用蕉胶法制备5－Fu果胶钙胶囊；测定不同温度、pH值时的国产复合果胶酶（FLW型）、进口果胶酶Pectinex Ultra SP-L的活性，考察5－Fu果胶钙胶囊在含大鼠盲肠内容物和不同浓度的果胶酶的结肠介质中的情况。结果：国产复合果胶酶（FLW型）随pH值的升高而活性下降；在pH6.0以上失活，进口果胶酶Fectinex Ultra SP-L的活性在pH5．0最强，在pH 7．0以上失活；在37℃时Pectinex Ultra SP-L3mL(pH6.0)与复合果胶酶（FLW型）6g/L（pH5.0）的活性比较接近；溶出试验表明，果胶酶对果胶钙胶囊确有降解作用，且随酶量增加释放加快，并且Pectinex Ultra SP-L 3ml/L (pH6.0）与复合果胶酶（FLW型）6g/L（pH5．0）的释放情况比较接近，大鼠盲肠内容物也可有效降解果胶钙。结论：试验初步确定以含Pectinex Ultra SP-L3ml/L(pH6.0）或复合果胶酶（FLW型）6g/L（pH5．0）的溶液为果胶钙结肠释放介质。     

蛛网膜下腔出血再出血的病理与临床(附10例分析)

分析10例蛛网膜下腔出血再发的临床病理资料,多见于首次出血后1个月内,以排便为常见诱因,临床表现较重、定位征较多、生存时间较短、病理上均有脑疝。认为出血急性期应绝对安静卧床,远期避免较重体力劳动,对动脉瘤破裂或血管畸型伴脑出血者应早期手术。     

PSI诱导PC12细胞帕金森病模型中ERp29蛋白表达

目的：探讨泛素-蛋白酶体系统（UPS）功能障碍诱发帕金森病（PD）细胞模型的作用机制，为深入研究PD的发病机制提供理论依据。方法：建立PSI诱导的PC12细胞模型，实验组、对照组分别加入PSI和DMSO（终浓度为10 μmol•L^-1）孵育 36 h后提取蛋白，应用荧光差异凝胶电泳（DIGE）系统获得差异蛋白点，运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF Pro MS）鉴定出差异蛋白。结果：实验组与对照组比较，在36 h可见细胞内嗜酸性类Lewy小体形成及细胞凋亡（细胞核呈固缩状或碎裂状），凋亡百分率为25.53%。实验组内质网蛋白ERp29与对照组比较表达量显著降低，差异有显著性（P<0.01）。结论：内质网应激（ERS）在UPS功能障碍引起PD的病理变化过程中起重要作用。     

体外诱导SH-SY5Y细胞凋亡的氧糖剥离再灌注模型的建立及评价

目的：通过体外模拟缺血-再灌注损伤（I/R）诱导细胞凋亡的氧糖剥离再灌注(OGD/R)模型的建立与评价,探讨成功诱导神经元凋亡发生的可靠时间窗,为进一步阐明神经元凋亡机制奠定基础。方法：选用人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞分为对照组和实验组,实验组给予不同的OGD/R时间,通过MTT法计算细胞存活率,选定再灌注24 h存活率接近50％的OGD10h/R组和对照组细胞,通过光镜、荧光显微镜及电镜观察细胞形态学改变,采用试剂盒检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）水平、胞浆内丙二醛（MDA）含量及细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果：MTT法结果显示,细胞存活率随OGD时间延长显著降低,OGD10h/R24h组为对照组的（44.91±1.21）%,不同OGD/R时间组间细胞存活率比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。倒置显微镜及HE染色显示,OGD10h/R组细胞密度减低,形态多样性,核固缩;AO/EB荧光染色可见凋亡小体形成,电镜显示核内异染色质凝集、趋边等凋亡的改变。实验组培养液内LDH水平及胞浆内MDA含量随再灌注时间延长而增加,LDH水平于再灌注24 h达峰值,MDA含量于再灌注24 h接近平台期,胞浆内SOD活性随再灌注时间延长呈现先降低后回升的趋势,与相同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞术检测细胞周期显示,随再灌注时间延长,OGD10h/R组G0/G1期细胞比例逐渐增加,24 h达峰值（74.09±2.62）%,其后有所降低,G2/M期细胞比例再灌注0 h时最高达（26.85±1.35）%,此后逐渐降低,24 h前均显著高于同时间对照组细胞,S期细胞比例逐渐降低,24 h最低达（19.2±1.58）%,此后逐渐升高,与同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论：体外模拟I/R模型的OGD10h/R组能够成功诱导SH-SY5
Y细胞凋亡的发生,可进一步应用于凋亡机制的研究。     

鱼藤酮诱导PC12细胞损伤作用途径

目的探讨鱼藤酮诱导PC12细胞损伤作用的可能途径，为神经防护药物的研发提供理论基础。方法将培养的PC12细胞分为正常对照组和0．5μmol&#183;L^-1鱼藤酮实验组，持续作用72h后MTT法检测细胞存活率、Hoechst 33342观测细胞凋亡、提取实验组和对照组细胞的总蛋白，应用荧光差异凝胶电泳系统（Differential Gel Electrophoresis，DIGE）获得差异蛋白点的表达信息，通过MALDI-TOF质谱鉴定差异蛋白点。结果MTT法显示鱼藤酮实验组较正常对照组细胞存活率明显降低（P〈0．01）；Hoechst33342荧光染色显示鱼藤酮实验组凋亡率明显高于对照组（P〈0．01）.DIGE分析软件提示实验组与对照组相比发现三个有意义的差异蛋白。通过质谱分析和数据库检索，鉴定分别为γ-烯醇化酶（γ-enolase）、磷酸丙糖异构酶1（Trpi1）和真核细胞翻译起始因子4A（elF4A）。结论γ-enolase、Tpi1和elF4A参与细胞损伤。可能成为神经防护药物作用的靶点。     

多巴胺诱导SH-SY5Y细胞帕金森病模型中GRP78的表达

目的:探讨神经毒素多巴胺(DA)诱导SH-SY5Y细胞帕金森病(PD)细胞模型中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达,为深入研究PD的发病机制提供理论依据。方法：建立多巴胺诱导SH-SY5Y细胞帕金森病模型,实验组加入DA(溶解于0.2%维生素C,DA终浓度为200 μmol•L^-1),对照组加入等体积的0.2%维生素C,分别孵育24 h,台盼蓝染色检测细胞存活率,Hoechst33342染色检测细胞凋亡。分别提取实验组和对照组细胞总蛋白,应用荧光差异双向凝胶电泳(DIGE)技术获得蛋白点的差异表达,应用基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)鉴定差异蛋白质。结果：实验组细胞存活率为53.2%,与对照组细胞存活率（100%）比较显著下降(P<0.05)。荧光染色,实验组可见细胞核呈固缩状或碎裂状,呈典型的凋亡形态学改变;对照组可见细胞胞核着均匀一致蓝色。DIGE分析,实验组表达增高的一个蛋白质点,经质谱分析鉴定确认为GRP78。结论：多巴胺能够诱导SH-SY5Y细胞凋亡,凋亡过程中GRP78表达增高,提示GRP78增高可能与PD的发病机制有关。     

脑缺血性疾病的蛋白质组学研究进展

脑血管病是导致人类死亡的三大病因之一,而其中缺血性脑血管病约占75％～80％,其发病机制涉及多方面复杂因素;蛋白质组学作为新兴学科从整体角度,系统地研究动态变化的蛋白质组成分构成及其活动规律,为探索该病机制开辟了新途径。本文旨在综述蛋白质组学概念和主要研究技术,以及脑缺血个体体液、脑缺血个体脑组织、体外模拟缺血的细胞模型三方面的脑缺血性疾病蛋白质组学研究现状,为进一步开展该病蛋白质水平研究奠定基础。