miR-1269a调控HOXD10基因抑制胆管癌细胞侵袭的作用及其机制

目的 探讨miR-1269a对HOXD10基因的调控作用及对胆管癌细胞侵袭能力的影响。方法 预测并筛选出调控HOXD10基因的miR-1269a作为研究对象;转染miR-1269a模拟物（mimic）及抑制剂（inhibitor）至胆管癌细胞系后检测 HOXD10mRNA及蛋白的表达变化,并观察miR-1269a对胆管癌细胞侵袭能力的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269a与HOXD10之间的靶向作用关系。结果 miR-1269a在胆管癌组织中表达显著高于癌旁组织（P=0.0023）;miR-1269a模拟物可显著降低胆管癌细胞中HOXD10 mRNA（Mz-CHA-1: P=0.0025; RBE: P=0.0038）及蛋白表达水平,且细胞的侵袭能力较对照组显著增强（Mz-CHA-1: P=0.004; RBE: P=0.004）。miR-1269a抑制剂转染则出现相反的结果（QBC939: P=0.16; HCCC9810: P=0.13）。miR-1269a明显抑制野生型HOXD10-3’UTR 的荧光素酶活性,而对突变型质粒转染细胞的荧光素酶活性无影响。结论 miR-1269a靶向负性调控HOXD10基因,在胆管癌细胞侵袭过程中发挥重要作用。     

家兔腓肠肌亚部神经切断对其肌内神经、运动终板和肌梭的影响

目的　切断家兔腓肠肌外侧头肌亚部神经后 ,观察肌内神经、肌梭、运动终板带、肌湿重等的形态学变化。方法　 4 0只家兔随机分成对照组和神经切断组。用Sihler s肌内神经染色法染肌内神经 ;用乙酰胆碱脂酶整肌染色法染肌运动终板 ;用HE染色法染肌梭。结果　 (1)术后 2周亚部肌湿重明显下降 (P <0 0 5 ) ,肌运动终板带模糊不清 ,肌内神经染色变浅 ,三级分支消失 ,但肌梭形态及梭内肌纤维尚无明显改变 ;(2 )术后 4周肌湿重进一步下降 (P <0 0 1) ,运动终板带完全消失 ,肌内二级分支染色无 ,肌梭形态及数量有改变 ;(3)术后 12周肌肉明显萎缩 ,发生纤维化 ,运动终板带无 ,肌内神经染色无 ,仅留有鞘管样结构 ,未见神经再生 ,肌梭形态、数量明显改变 ;(4)术后 16周各参数与 12周相比差异无显著性。邻近正常肌未见有侧支神经支配失神经的亚部。结论　 (1)家兔腓肠肌外侧头各亚部在神经切断术后 4周 ,运动终板、肌梭的数量和形态有改变 ;(2 ) 12周后肌内神经染色仅有神经外膜鞘管样结构残存 ;(3)术后 16周末见原位的神经再生和相邻亚部神经侧支的再支配。     

免疫球蛋白对 Aβ引起的神经细胞毒性的拮抗作用

中枢神经系统退行性疾病，如早老性痴呆症（AD）、帕金氏综合症等在老年人群中发病率逐年升高，目前对此类疾病还没有很好的药物治疗。早老性痴呆症的病理特征是神经细胞间隙有大量的β-淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积，干扰神经细胞功能，使神经系统的信号传导受阻，最后致细胞死亡。大量的实验结果和临床资料表明，Aβ是各种原因诱发AD的共同通路，是AD形成和发展的关键，如果能阻止Aβ产生或清理掉已产生的Aβ，将会阻止AD的发生或减轻AD症状。免疫球蛋白是被抗原激活的B淋巴细胞产生的一类蛋白质，通过血液循环进入各种组织，它既能与抗原结合清理掉病原微生物，也具有蛋白质的共性发挥其他作用。近年有报道，免疫球蛋白可抑制早老性痴呆症。为研究免疫球蛋白在治疗AD中与Aβ的关系，我们用免疫球蛋白和Aβ共处理体外培养的神经细胞，通过形态观察、MTT法活性检测和荧光双染色等方法探究免疫球蛋白对Aβ神经毒性的拮抗作用，为治疗早老性痴呆症等中枢神经系统退行性疾病提供一种新的思路。     

Wnt/β-catenin信号因子在HepG2以及L02细胞中的表达

目的:比较Wnt/β-catenin信号分子在HepG2和L02细胞中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在肝癌发生中的作用机制,为肝癌的防治提供新的思路。方法:选取Wnt/β-catenin信号转导通路中上下游关键因子Wnt1、Wnt4、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等,应用RT-PCR的方法观察他们在正常肝脏L02细胞和肝癌HepG2细胞中的转录水平。用免疫细胞化学染色方法和Western blot检测研究Wnt/β-catenin信号转导通路中最关键的成员β-catenin在上述2个细胞株中的定位和定量表达。结果:在正常的L02肝细胞中,用RT-PCR的方法未检测到Wnt1、Wnt4、cyclin D1以及c-myc的mRNA转录,只有β-catenin的基因被转录表达。同时用免疫细胞化学染色观察到β-catenin在L02细胞膜处存在表达。而在HepG2肿瘤细胞中,不仅检测到β-catenin的基因转录,同时也检测到Wnt1、cyclin D1以及c-myc的mRNA转录,只有Wnt4未转录。用免疫细胞化学的方法观察β-catenin在肿瘤细胞中的表达明显增强,表现为胞膜着色减弱而胞质甚至是胞核的阳性染色。采用Western blot检测也验证了β-catenin蛋白在肿瘤细胞中的表达水平明显高于正常细胞。结论:Wnt/β-catenin信号转导通路在人的肝癌细胞HepG2中存在异常活性,Wnt1可能是导致信号通路激活的始动因素之一。     

我院技术经济责任制是怎样开展起来的

在前几年名噪一时的哈尔滨医科大学附属第一医院推行的技术经济责任制,一个时期似乎不那么行时了,也有人说夭折了。实际上,这种改革就是一种承包方式,它的基本内容概括起来就是:定额管理、质量控制、逐级包干、计分算奖、超节提成。这些办法也是现在医院推行承包责任制的基本要素。但由于当时的大环境不成熟,制度本身也不完善,特别是在分配上,相当保守,“推不开”是自然的。近年来,随看卫生事业改革的深化,技术经济责任制又有复兴的趋势,在哈尔滨市就有相当的“市场”。争议还是有的。请看哈尔滨市第五医院这篇文章,他们进一步完善了技术经济责任制,这是值得一读的。     

中药外用治疗小儿外阴炎

笔者采用中药外用治疗小儿外阴炎，效果满意，介绍如下。 1治疗方法 生地榆、黄柏各30g，蒲公英、野菊花各35g，白及6g。如为药物致敏者加白鲜皮12g，地肤子10g；局部渗水或脓性分泌物多者加萆薢、车前子清热利湿泄毒；有溃疡者加生黄芪托毒排脓生肌；有外阴湿疹者加蛇床子、苦参、地肤子清热燥湿止痒。水煎，冷却后浸湿纱布，局部湿敷，干后再以药液滴湿纱布。     

角膜移植后局部淋巴结内树突状细胞数量及趋化因子CCL19含量的变化

目的研究角膜移植后局部淋巴结内树突状细胞数量及趋化因子CCL19含量的变化。方法应用免疫组织化学技术测定大鼠角膜移植后局部淋巴结内趋化因子CCL19含量及树突状细胞数量。结果自体移植组术后局部淋巴结内CCL19含量升高,持续至术后第3天(P<0.05),以后恢复至正常水平(P>0.05)。同种异体移植组,局部淋巴结内CCL19含量在术后1～3d与自体移植组差异无显著性(P>0.05),以后持续上升,至后期显著高于正常组及自体移植组,于第7天达高峰(P<0.05)。树突状细胞数量与CCL19变化趋势一致。结论角膜移植后局部淋巴结内CCL19表达增高,促进树突状细胞的迁移,这可能是同种异体移植排斥反应启动与进展的重要因素。     

联合检测血浆中GSH-PX、MDA 及肿瘤蛋白对肺癌筛检的Bayes 判别分析

 目的 探讨血浆中GSH—PX、MDA、p21、p53及HSP70蛋白实测值建立的Bayes模型对肺癌的筛检价值。方法 用DTNB法对48例肺癌、34例非肿瘤性肺病病例（简称对照组）血浆中GSH-PX活力进行测定；用TAB法测定其MDA的含量；采用Western斑点印迹法测定血浆中p21、p53及HSPT0蛋白水平，并用其实测值建立的Bayes模型。结果 肺癌组血浆中GSH—PX活力小于对照组，MDA高于对照组，具有显著性意3L（P〈0．05）；与对照组相比，肺癌组p21、p53及HSP70蛋白水平均增高，差异具有显著性意义（P〈0．01）；Bayes模型的敏感性、特异性和准确率分别为83．33％，74．19％和93．33％。联合细胞学检测，其诊断的敏感性可提高至91．67％。结论 GSH—PX、MDA、p21、p53及HSP70蛋白联合检测建立的Bayes模型对肺癌筛检提供了一条新的方法，可补充细胞学的诊断价值。     

输尿管通道鞘状态与鞘内流速变化分析*

目的探讨输尿管通道鞘(UAS)的不同状态与鞘内灌注液流出速度的变化关系,了解限压150 mmHg Wolf泵灌注时肾盂内的压力。方法 18例输尿管软镜手术患者根据UAS(F12/14)的3种状态分成A、B和C 3组,各6例,分别测定URF-P5软镜进入肾盂寻找结石时和置入200μm光纤碎石时UAS鞘内灌注液的流出速度,C组患者采用"鞘内导丝法"提高鞘内流速,对其中1例有肾瘘管的患者进行肾盂内压力测定。结果限压150 mmHg Wolf泵灌注下,URF-P5软镜进入肾盂寻找结石时,3组鞘内流速分别为(54.22±2.14)、(47.32±2.39)和(25.01±2.54)ml/min;置入200μm光纤碎石时,鞘内流速分别为(32.68±2.23)、(30.44±2.58)和(24.15±2.22)ml/min;鞘内放置导丝后,C组的流速为(28.64±2.18)ml/min,与放置导丝前相比,流速增加13.0%～21.0%,平均流速增加18.6%。测压患者静息状态下肾盂内压为11 mmHg;软镜进入肾盂后,肾盂内压28～51 mmHg,中位值38 mmHg;钬激光碎石时肾盂内压55～72 mmHg,中位值68 mmHg;鞘内置入导丝后肾盂内压下降至38～61 mmHg,中位值50 mmHg。结论 UAS的不同状态导致了不同的鞘内灌注液的流出速度,通过观察鞘内流速的变化,可以间接判断肾盂内的压力情况;使用F12/14 UAS、URF-P5软镜和Wolf泵灌注限压150 mmHg是相对安全的;当UAS的状态评估不满意时,术者应控制手术时间,可以采用"鞘内导丝法"增加鞘内流速,降低肾盂内压力。