真核双表达载体pIRES-hVEGF121 cDNA/hBMP-4的构建与鉴定

目的构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达。方法将hVEGF121 cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果真核双表达载体pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础。     

百日咳毒素在携带重组质粒的副百日咳杆菌和支气管败血性杆菌中的表达

百日咳毒素(PT)是百日咳杆菌的一种主要毒力因子,是百日咳无细胞菌苗的成份之一.与其他毒素相比,PT产量很低,难以大量生产.本文报道将含有编码PT的基因(ptx)的质粒引入副百日咳杆菌和支气管败血性杆菌中,两者能表达有生物学活性的PT.试验采用能产生少量生物学活性PT的百日咳杆菌变异株Bp357做受体株,Bp18323为供体株,并用12株带有ptx质粒的Bp357转接体(Transconjugant)作实验,结果没有1     

可表达骨形态发生蛋白-4的真核表达载体的构建与鉴定

目的构建含有骨形态发生蛋白（hBMP）-4的真核表达载体pcDNA3．1（＋）／hBMP-4。方法将质粒pCS2（＋）／hBMP-4用Eco RⅠ单酶双切获得目的基因片段，真核载体pcDNA3．1（＋）用EcoRⅠ酶切线性化，对上述两种酶切产物分别回收纯化后进行连接，筛选出正确的转化子，并进一步转染COS-7细胞，提取总RNA和总蛋白，进行RT—PCR和Western—blot检测。结果获得了含有目的基因片段的真核表达载体，酶切及基因测序提示构建正确，RT—PCR检测到目的基因的转录，Western—blot检测到hBMP-4蛋白表达。结论利用非定向克隆技术将目的基因转移至真核表达载体中，为进一步研究目的基因打下基础。     

GNB3基因C825T多态性与缺血性脑卒中的关系

目的 了解G蛋白β亚基（GNB3）基因C825T多态性与北京地区缺血性脑卒中发病之间的关系。方法 利用PCR和分子杂交技术对北京地区294例缺血性脑卒中患者及280例非脑卒中患者的C825T多态性进行检测和分析。结果 C825T多态性位点在两组人群中的分布均符合Hardy-weinberg遗传平衡定律,缺血性脑卒中患者中CC、CT、TT三种基因型频率分布依次为30.27%、49.98%、20.75％,非脑卒中患者中为33.21%、47.50、19.29％,两组人群中825T等位基因频率分别为0.452和0.430,均无显著性差异。结论 GNB3基因C825T多态性与北京地区缺血性脑卒中发病无关。     

2013～2015年血培养病原菌分布情况及耐药性研究

目的：目的对本院2013～2015年血培养标本中病原菌分布情况以及耐药性的研究。方法选用BDFX-200血培养分析仪对2013～2015年共3323份标本进行检测并对鉴定结果进行回顾性分析。结果3323份血培养标本中检测出阳性标本343株，阳性率为10．32％，革兰阳性菌占40．52％，革兰阴性菌占56．86％，真菌占2．62％；主要分布在新生儿和中老年患者，分别为6．85％和76．48％；病原菌主要分布在普外科（14．58％）、呼吸科（11．66％）、消化科（11．66％）、血液科（10．79％）。肠杆菌科对美洛培南、亚胺培南等较为敏感；非发酵菌对哌拉西林／他唑巴坦较为敏感；葡萄球菌和链球菌对万古霉素较为敏感。结论结合患者病原菌分布及耐药情况，临床医生应合理用药增强菌血症和真菌血症的治愈率。     

静脉药物集中配置对操作人员的危害及防护

静脉药物配置中心对医院药学发展起到了很大的促进作用。但大量静脉药物集中配置也为配置人员带来了很多职业危害,而配置人员的防护意识不够及防护措施的不完善也加剧了这一进程。因此,加强宣教、完善管理制度和防护措施对降低危害、保障配置人员身心健康是非常有必要的。     

血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)异常增殖 ,血管壁细胞外间质组成改变导致的血管重构 ,在高血压、动脉粥样硬化、血管再狭窄等许多心血管疾病的发病中起重要作用 ,血管紧张素Ⅱ (ＡｎｇⅡ )是肾素 -血管紧张素系统的主要因子 ,显著增加ＶＳＭＣ的增殖和肥大 ,但确切分子机制尚未完全明确 ,有报导提示与丝裂素活化蛋白激酶 (ＭＡＰＫ)有关 ,本研究对此作进一步研究。方法 :用贴壁法培养大鼠胸主动脉ＶＳＭＣ ,实验选用第 4～ 1 0代。 [3Ｈ]-胸腺嘧啶掺入法测定ＶＳＭＣＤＮＡ合成 ,逆转录 -ＰＣＲ法测定ｃ-ｆｏｓ表达 ,ｐ42和ｐ44磷酸化抗体…     

高脂蛋白(a)血症遗传模式及其遗传度的探讨

目的：探讨高脂蛋白（ａ）血症的家族聚集性、遗传模式及其遗传度。　　方法：采用遗传流行病学研究方法，对１３ 个高脂蛋白（ａ）血症家系（先证组，１０４ 人）及２６ 个正常对照家系（对照组，１５３人）以二项分布（ｐ＋ ｑ）ｎ 的数学模型及χ２ 检验判定家族聚集性。以Ｐｅｎｒｏｓｅ法和Ｆａｌｃｏｎｅｒ回归法进行遗传模式及其遗传度的估算。　　结果：先证组一级亲属患病率为３１．９４％ ，与对照组８．８２％ 相比，统计学差异具有显著性（Ｐ＜ ０．０１），将其按父母、同胞、子女分组分析，调整其它影响因素，先证组同胞中患病率显著高于对照组。二项分布显示，先证组实际频数大于二项分布的理论频数。　　结论：高脂蛋白（ａ）血症具有明显的遗传易患性，遗传度为９０．６％ ，属于多基因遗传模式