基质金属蛋白酶-9基因单核苷酸多态性与冠状动脉粥样硬化程度的关联研究

目的:基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在动脉粥样硬化斑块的进展及破裂中发挥重要的作用。本研究探讨MMP-9基因单核苷酸多态性(SNP)与冠心病患者冠状动脉粥样硬化程度间的相关性。方法:入选经冠状动脉造影证实的汉族冠心病患者1371例,如患者前降支、回旋支及右冠状动脉中仅一支冠状动脉直径狭窄≥50定义为单支病变者(单支病变组,n=332);如患者上述三支冠状动脉中有两支直径狭窄≥50定义为双支病变者(双支病变组,n=445);如上述三支冠状动脉直径狭窄均≥50,则定义为三支病变者(三支病变组,n=594)。选择MMP-9-1562C/T、R279Q等SNPs位点,采用聚合酶链式反应—限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)方法确定基因型。χ2检验用于单因素分析时检验SNP位点与冠状动脉粥样硬化程度间的关联。Logistic回归模型分析用以校正混杂因素。结果:-1562C/T多态性位点在冠心病患者单支病变组、双支病变组和三支病变组中-1562T等位基因频率分别是11.3,11.6和9.9;R279Q多态性位点在冠心病患者单支病变组、双支病变组和三支病变组中279Q等位基因频率分别是31.3,32.1和30....     

猪急性心肌梗死再灌注后微血管内皮细胞损伤及通心络的保护作用

目的评价猪急性心肌梗死（AM I）再灌注后微血管内皮细胞结构和功能损伤,以及中药通心络的保护作用和机制。方法 30只中华小型猪随机分成假手术组、模型组、小剂量、中剂量和大剂量通心络治疗组,每组6只。建立AM I再灌注模型,观察不同区域心肌组织内细胞黏附分子和内皮细胞间连接蛋白的含量和变化。结果与正常区比较,模型组再灌注区和无再流区P-选择素（P-selectin）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1蛋白及mRNA水平升高,再灌注区内皮钙黏素（VE-cadherin）、无再流区VE-cadherin和β连环蛋白含量降低。与模型组比较,中剂量组再灌注区和无再流区P-selectin和ICAM-1蛋白降低;大剂量组再灌注区P-selectin、ICAM-1蛋白和mRNA含量降低,无再流区P-selectin蛋白和mRNA及ICAM-1蛋白含量降低。大剂量组再灌注区和无再流区VE-cadherin表达升高。结论中药通心络通过抑制细胞黏附分子的表达,减少中性粒细胞浸润和炎症反应,保护AM I再灌注过程内皮细胞屏障功能完整性。     

IC53基因多态性与脑卒中的关系

目的：研究我们实验室从人主动脉cDNA文库克隆的新基因IC53单核苷酸多态与脑卒中的关系。方法：利用序列测定方法对IC53基因在基因组水平对96例正常人及96例脑卒中病人进行小规模SNP筛选的结果为基础，确定IC53基因Exon14终止密码子下游第213个碱基的10586位点作为大规模筛查的对象，应用PCR，RFLP方法对1461例脑卒中患者（脑卒中患者按照CT诊断标准又分为血栓性脑梗塞、腔隙性脑梗塞和高血压性脑出血三组）和1056例非脑卒中患者（即对照组，入选标准为年龄差别不超过5岁未患脑卒中的健康人或医院内其他与脑血管疾病无关的其他病人）进行比较。结果：统计分析结果显示，脑卒中组三组病人中仅血栓性脑梗塞组与对照组之问基因型频率有显著性差异（P〈0．05见表），TT基因型比CT基因型、CC基因型具有更高的致病危险，CT基因型的OR值为1．361（95％CI 1．029．1．800）、TT型为1．553（95％CI 1.056．2．085）。同时，血栓性脑梗塞组分别与腔隙性脑梗塞，高血压性脑出血组基因型频率有显著性差异（P〈0．05）。结论：提示IC53基因10586位点多态性可能与血栓性脑梗塞病有关，TT基因型增加了血栓性脑梗塞的发生。     

腺病毒过表达TNNI3K基因对成年大鼠心肌细胞肌丝钙敏感度的影响

目的检测TNNI3K基因过表达对成年大鼠心肌细胞肌丝钙敏感度变化的影响,为进一步研究TNNI3K基因在心肌收缩功能、心肌肥厚、心衰及其它心脏疾病中的作用提供了可靠有效的研究模型。方法恒压Langedoff灌流装置逆向灌流法分离成年大鼠心肌细胞,之后对该心肌细胞进行逐级复钙。然后,将心肌细胞接种于改良的M199培养基中。分别感染Ad.GFP病毒和Ad.TNNI3K病毒,24小时后,以IonOptix单细胞可视化动缘系统检测心肌细胞肌丝钙敏感度。结果成功分离培养了成年大鼠心肌细胞,并在该细胞中成功过表达了TNNI3K基因。钙敏感度测定结果表明,TNNI3K基因能够增强心肌细胞肌丝钙敏感度。结论在本实验成功分离培养的成年大鼠心肌细胞中以腺病毒载体过表达TNNI3K基因,可增强心肌细胞肌丝的钙敏感度,该模型为进一步研究TNNI3K基因在心肌收缩功能中的作用及机制奠定了基础。     

血浆中高级糖化终产物的水平与糖尿病并发症的关系研究

目的 探讨高级糖化终产物与糖尿病并发症的关系。方法 采用本实验室自行研制的竞争性酶联免疫吸附分析方法，测定了糖尿病有并发症组病人血浆95例，糖尿病无并发症组人血浆65例，正常对照65例。结果：在糖尿病有并发症组中，高级糖化终产物（AGEs）浓度[（6．625（1．691）U／mL，n=95]明显高于糖尿病无并发症组[（5．904（2．071）U／mL，n=65，P=0．017]，也明显高于正常人组[（5．337（1．138，n=65，p〈0．005]。以有无并发症为应变量进行多元logistic回归分析显示，血浆AGEs浓度〉6．085U／ml者，糖尿病并发症发生的危险性增加（OR值为2．989，95％可信限为1．407—6．350）。多元逐步线性回归显示：糖尿病病程、冠心病史与血浆AGEs浓度之间有线性关系。结论血浆AGEs浓度是糖尿病发生并发症的独立危险因素。     

采用(CAG)n多态性分析进行亨廷顿病鉴别诊断和症状前诊断(论著摘要)

亨廷顿病（Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎｄｉｓｅａｓｅ，ＨＤ）是一种迟发性常染色体显性遗传病，以神经系统退行性改变为主要特征，其相关基因为ＩＴ１５，基因中多态性的三核苷酸重复序列（ＣＡＧ）的过度扩展导致基因功能异常。在正常人群中，重复序列的拷贝数为１１～３４，...     

采用(CAG)n多态性分析进行亨廷顿病鉴别诊断和症状前诊断

亨廷顿病(Huntington disease,HD)是一种迟发性常染色体显性遗传病,以神经系统退行性改变为主要特征,其相关基因为IT15,基因中多态性的三核苷酸重复序列(CAG)的过度扩展导致基因功能异常.在正常人群中,重复序列的拷贝数为11～34,而HD患者的拷贝数大于37.通过PCR检测CAG的拷贝数可从基因水平对HD进行临床诊断.     

15个成人型多囊肾病家系的基因诊断

成人型多囊肾病(adult polycystic kidney disease,APKD)属常染色体显性遗传病,发病率高达1‰。笔者1990年首先在国内开展该病的基因诊断研究。几年来应用3'HVR探针和APKD致病基因(PKD_1)两侧的4种探针(3'HVR、PGGG_1、218EP_6和24-1)分别对15个APKD家系进行了连续分析,从基因水平上为112个个体进行基因诊断,检测出52例APKD基因携带者,其中15例属症状前诊     

The role of sexual related Y gene detection in the diagnosis of patients with gonadal dysgenesis

Objective To clarify the role of sexual related Y (SRY) gene detection in the diagnosis of gonadal dysgenesis.Methods Sixteen cases of gonadal dysgenesis were included in this study: 5 with androgen insensitivity syndrome, 1 with 17-α-hydroxylase deficiency, 4 with true herm aphrodite, 2 with 45,X/46,XY gonadal dysgenesis, 1 with 45,X gonadal dysgenesis, 1 with XY pure gonadal dysgenesis, 1 with testicular regression, and 1 XY fema le who gave birth to a normal baby. SRY gene was detected by using polymerase c hain reaction (PCR) in blood and gonad samples and by direct sequencing of the S RY motif. Results Among the 16 cases, 15 were blood SRY positive, among which 13 (86.7%) showed t he presence of testicular tissue, and 2 showed ovaries without testicular tissue . One SRY negative case showed the presence of testicular tissue. In 3 cases, SRY detection in gonadal tissue correlated with pathological findings but not wi th blood karyotype. The correlation between peripheral blood SRY and the pathol ogy of the gonads was 81.25% and the correlation between the presence of periph eral blood Y chromosome and pathology of the gonads was 68.75%. Sequencing of the SRY motif in an XY female who gave birth to a normal baby showed no mutatio n.Conclusions SRY detection is more sensitive and specific than blood karyotype in the predic tion of the presence of testicular tissue. Peripheral blood karyotype does not necessarily reflect gonadal type. There may be testicular related factors other than the SRY gene.     

血管紧张素转化酶基因多态性与内皮功能的研究

目的 :探讨血管紧张素转化酶 （ACE）基因多态性与冠心病血管内皮功能的关系。方法 :采用多聚酶链反应（PCR）技术对 2 4例心肌梗死、5 6例心绞痛患者、6 5例正常人的 ACE基因型及血浆内皮素 （ET）、内皮源性舒张因子 （EDRF）进行了检测 ,以 ET/ NO作为内皮功能指标。结果 :心肌梗死组 D等位基因频率显著高于正常对照组 ,DD型患者中的 ET/ NO比值较 型明显升高 （P<0 .0 5 ）。结论 :DD型心肌梗死患者内皮功能受损较重。