高压氧对移植的外源性人神经干细胞体内神经元分化的影响

目的：观察缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠移植人神经干细胞（hNSCs）后高压氧（HBO）对外源性hNSCs体内神经元分化的影响。方法：新生7 d的SD大鼠HIBD模型制作后3 d经脑室移植hNSCs,并分成移植组（n=8）和移植+HBO组（n=8）。移植+HBO组于移植后1 h进行HBO治疗,每日1次,10 d后断头取脑,应用免疫荧光方法检测植入细胞在皮层、海马神经元分化情况。结果：移植后10 d,植入细胞分化形成神经元,分布以海马、皮层为主。统计学结果表明,在皮层,两组分化的神经元计数差异无显著性（P>0.05）;而在海马区,移植+HBO组神经元分化存活的数量较单纯移植组多,差异有显著性（P<0.05）。结论：HIBD新生大鼠移植hNSCs后HBO促进海马区外源性hNSC向神经元的分化。     

骨髓间充质干细胞移植治疗小儿重度脑性瘫痪的疗效观察

目的观察自体骨髓间充质干细胞移植治疗重度脑性瘫痪儿童的临床疗效。方法对50例重症脑性瘫痪患儿进行骨髓间充质干细胞移植,移植前、后6个月进行自身对照,比较患儿粗大运动和综合功能的进步程度,并随访移植后0、1、3、6、12个月患儿一般情况。结果 50例患儿自体骨髓间充质干细胞培养均成功。移植后6个月失访1例,至12个月失访4例,余46例完成观察。移植后6例患儿在手术后3～5 d即出现显著临床改善,大部分患儿在移植后3个月左右运动能力进步,6个月之后进步幅度减缓。移植前6个月综合功能评估进步程度为(19.14±9.82)%,移植后6个月为(28.49±10.52)%,移植后进步显著大于移植前(P=0.001),其中以运动和认知改善明显。粗大运动功能评估总百分比从移植前的(23.80±10.64)%,上升到移植后(27.31±11.72)%,平均每月上升(1.05±0.49)%,显著大于移植前6个月进步幅度(P=0.001)。结论自体骨髓间充质干细胞移植对康复治疗效果不佳的重症脑瘫患儿有明显临床改善作用,能够有效促进患儿各功能区的发育。     

儿童难治性自身免疫性疾病自体外周血干细胞动员采集和分选的临床研究

目的 探讨儿童难治性自身免疫性疾病进行自体外周血干细胞动员采集的安全性和CD34+细胞分选纯化的可行性及其临床意义.方法 8例儿童难治性自身免疫性疾病,包括4例系统性红斑狼疮、2例皮肌炎,1例幼年型类风湿关节炎和1例多发性硬化,予行CD34+细胞纯化的自体外周血干细胞移植.首先采用环磷酰胺(CTX)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)方案动员外周血干细胞,然后采用CS-3000血细胞分离机采集外周血,通过CliniMACS细胞分选仪分选自体外周血CD34+细胞,将其用保养液配置冻存于-80℃冰箱.采用非清髓内去除T的预处理方案,即卡氮芥+足叶乙苷+阿糖胞苷+马法兰+抗胸腺球蛋白(ATG)或CTX+ATG或CTX+马法兰+ATG,于第0天回输自体外周血CD34+细胞.结果 儿童能够耐受自体外周血干细胞动员采集过程,无动员相关死亡,动员后获得的单个核细胞数和CD34+细胞数的平均值分别为8.35×108/kg和7.92×106/kg,纯化后的白体外周血CD34+和CD3+细胞数的平均值分别为6.28×106/kg和0.71×105/kg.回输后中性粒细胞和血小板的植入中位时间分别为+11d和+15 d.结论 经CTX联合G-CSF方案可动员出足量的外周血干细胞,经CS-3000血细胞分离机采集可获得足够的单个核细胞,在动员过程中原发病无明显进展恶化,患儿能耐受动员方案,采集过程顺利安全;经CliniMACS细胞分选仪分选的自体外周血CD34+细胞纯度高,移植后造血恢复;采用CD34+细胞纯化的自体外周血移植治疗是常规治疗无效的儿童难治性自身免疫性疾病的可选择治疗措施之一.     

骨髓间充质干细胞移植治疗重度精神发育迟滞儿童的临床观察

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)自体移植治疗重度精神发育迟滞(MR)儿童的临床疗效.方法 收集解放军海军总医院儿科自2008年5月至2009年12月收治的重度MR患儿50例(年龄2～6岁),对其进行术前6个月及术后6个月自身对照观察,观察2个相同长度时间段内患儿智力、运动的发育状态.同时对移植术后1、3、6个月患儿的发育情况进行追踪随访分析.结果 50例患儿有2例MSCs培养失败,6例失访,余42例完成观察.其中术后有明显进步者25例,有效率为59.5%,此25例患儿在术后1个月逐渐出现不同程度的变化,并持续至术后6个月.术后6个月患儿细动作能、言语能、应人能进步月份值较术前6个月明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 自体MSCs移植安全可靠,能在短时间内改善重度MR患儿智力发育水平,且主要表现在精细运动,语言、应人能的改善.

Abstract：

Objective To observe the clinical efficacy of transplantation with autologous bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) in the treatment of children with severe mental retardation (MR). Methods Fifty children with severe MR (2-6 years old), admitted to our hospital from May 2008 to December 2009, were chosen; self-control observation on the mental and motor developments of these children in the same length of time periods was performed 6 months before and 6 months after the autologous bone marrow MSCs transplantation. Meanwhile, the improvements of each patient were followed up and analyzed 1, 3 and 6 months after the transplantation. Results Two patients failed in the culture of bone marrow MSCs; 6 patients failed in follow-up; the other 42 were observed completely.Significant improvement was noted in 25 patients after the transplantation with an effective rate reaching 59.5%; gradual mental and motor improvements appeared in these 25 patients 1 month after the transplantation, and lasted till the 6th month of transplantation. The average scores of mental improvement were (4.67±4.20) in 6 months before transplantation, and (17.12±13.05) in 6 months after transplantation (t=6.816, P=0.000). The average times having gross motor improvement 6 months before and 6 months after transplantation were (1.019±0.78) and (1.15±0.91), respectively (t=1.610, P＞0.05); the average times having fine motor improvement were (0.89±0.79) and (3.40±3.16) months in 6 months before and 6months after transplantation (t=5.030, P＜0.05); the average times having language improvement were (0.99±0.95) and (3.23±3.30) months in 6 months before and 6 months after transplantation (t=4.000, P＜0.05); the average times having personal-social behavior progress were (1.03±0.81) and (2.95±3.68)months in 6 months before and 6 months after transplantation (t=3.509, P＜0.05); the average times having adaptive behavior progress were (0.88±1.22) and (1.19±1.48) months in 6 months before and 6 months after transplantation (t=1.322, P＞0.05). Conclusion Autologous bone marrow MSCs transplantation can improve the intellectual development in a short time, mainly in the fine motor, language and personal-social behavior, in children with severe MR. Bone marrow MSCs transplantation for severe MR is safe and effective in a short-term.     

人神经前体细胞移植治疗低功能型孤独症初步探讨

目的 观察入神经前体细胞( human neural precursor cells,hNPCs)移植治疗低功能型孤独症的安全性及疗效.方法对9名低功能型儿童孤独症患儿经脑室移植入神经前体细胞.分别于手术前、术后1月、术后6月、术后1年采用孤独症行为评定量表( Autism Behavior Checklist,ABC...     

4例高IgE综合征的临床分析和基因诊断

目的 探讨高IgE综合征(hyper-IgE syndrome,HIES)的临床特征和基因诊断价值.方法 用NIH评分系统对2009年1-7月在重庆医科大学附属儿童医院就诊的4例(男性3例,女性1例)疑似HIES患儿进行评分,总分大于40分为临床诊断标准.用RT-PCR及PCR直接测序法,分析患儿STAT3基因.结果 ...     

新生动物神经干细胞脑内移植的研究进展

神经干细胞移植应用于成人临床已较长时间 ,但总的移植效果欠佳 ,目前尚无神经干细胞移植治疗儿童中枢神经系统疾病的报道。新生动物神经干细胞移植的实验研究发现 ,新生动物的移植效果明显优于成年动物 ,显示了神经干细胞移植在儿科临床应用的可观前景。该文就新生动物优于成年动物的移植特点及新生动物脑损伤后神经干细胞的移植效果作一简要综述 ,为临床神经干细胞的应用提供理论依据     

长效核黄素预防大剂量甲氨喋呤化疗毒副反应疗效观察

目的观察长效核黄素对大剂量甲氨喋吟(HD-MTX)化疗常见毒副反应的预防效果。方法1996年10月至2004年8月期间,26例患儿共接受72个疗程HD-MTX化疗(3.0g/m2,持续静滴12 h),观察组41个疗程同时应用长效核黄素,对照组31个疗程不用。根据WHO抗癌药物毒副反应分度标准,观察比较两组患儿治疗后口腔黏膜损害、肝功能变化及骨髓抑制程度。结果观察组口腔黏膜损害发生率(12.2%,5/41)明显低于对照组(45.2%,14/31),且观察组损害程度较重(P=0.002)。两组间肝功能变化及骨髓抑制程度差异无显著性。结论HD-MTX化疗中应用长效核黄素可有效预防口腔黏膜损害,对肝功能损害及骨髓抑制无明显预防作用。     

神经干细胞移植的临床应用及儿科应用展望

神经干细胞(NSCs)移植治疗中枢神经系统(CNS)疾病在动物实验及临床研究都取得令人鼓舞的进展。国内外NSCs移植治疗CNS疾病在成人临床应用中取得了较好结果。新生动物的实验研究及人NSCs移植治疗缺氧缺血性脑病(HIE)的临床应用,提示NSCs移植在儿科将会有较好治疗前景。