温热疗法增强前药氟胞嘧啶对转基因结肠癌细胞株的杀伤作用

目的 探讨温热疗法能否增强前药5-氟胞嘧啶（5-fluorocytosine，5-FC）对转染组织特异性胞嘧啶脱氨基酶（cytosine deaminase，CD）基因的结肠癌细胞SW480的靶向性杀伤作用及其机制。方法 将转染G1CEACDNa之结肠癌SW480细胞接种到96孔细胞培养板中，同时加入含各种浓度梯度的前药5-FC。实验组以水浴加温法在43℃下热处理30min，对照组不加热。第8d去除培养液，以MTT法测定活细胞比率，分析前药5-FC联合温热疗法对转CD基因结肠癌SW480细胞的杀伤作用，并以流式细胞仪分析热化疗对肿瘤细胞周期的影响，透射电镜观察热化疗前后肿瘤细胞形态学改变。结果 实验组细胞的杀伤率明显高于对照组（P〈0．05，t=2．403，n=9）；流式细胞仪检测显示实验组S期细胞比例明显增高（P〈0．001，t=7．158，n=6）；透射电镜观察下显示实验组细胞膜微绒毛消失，边缘变平直，细胞核皱缩，染色质聚集在核模下。结论 温热疗法能明显提高转CD基因结肠癌SW480细胞对前药5-FC的敏感性；两者联用能使转CD基因结肠癌SW480细胞产生S期阻滞，从而促进细胞凋亡。     

腹腔镜阑尾切除术在小儿外科的应用

一、腹腔镜阑尾切除术的历史及现状 腹腔镜阑尾切除术的发展经历了3个阶段.首先,德国妇产科医生Semn在进行妇科腹腔镜手术时顺便切除了无急性炎症的阑尾,并于1983年报道世界上首例腹腔镜阑尾切除术.后来,外科医生Pier等[1]为治疗急性阑尾炎而进行了大量的腹腔镜阑尾切除术的工作.受当时设备及技术的限制,虽然腹腔镜阑尾切除术的理论优势已经凸现,但其临床优势尚不明显.当时绝大多数的医生认为,阑尾切除术是一个相当成熟的手术,切口小,损伤轻,完全没有必要进行腹腔镜手术.但随着腹腔镜设备和技术突飞猛进的发展,腹腔镜阑尾切除术具有损伤轻、并发症少、恢复快等开腹阑尾切除术无法比拟的优点,腹腔镜阑尾切除术逐渐得到推广应用.     

在外科临床技能培训和考核中引入标准化病人的必要性分析

自20世纪70年代开始,SP作为教学媒介进入医学教学领域,被广泛用于临床技能的教学与考核,SP已经从一项教学革新技术,演变为对学生临床技能进行规范、深入考核的主流方式。本文结合SP项目研究的最新成果,从SP项目引入临床教学的必要性和自身优势两个方面,分析在外科临床技能培训和考核中引入SP的可行性和必要性。     

患者、志愿者、仿真模拟人三结合的临床实践教学模式的应用研究

目的为缓解当前临床教学中存在的教学病例少、床边教学病人不配合、病例教学综合性较差、学员积极性不高等突出问题,我们在临床教学中,试行了患者、志愿者、仿真模拟人三结合的临床实践教学模式。方法对我院2005级本科学员实行患者、志愿者、仿真模拟人三结合的临床实践教学模式,并与接受原临床教学方法的2004级本科学员进行比较,主要通过临床结业考试成绩,临床执业医师技能考试通过率进行前后对照分析。结果2005级学员临床结业考试平均成绩较2004级学员高(P<0.05)。2005级学员执业医师通过率明显高于2004级(P<0.05)。结论患者、志愿者、仿真模拟人三结合的临床实践教学模式明显提高了临床实践教学质量及学生的实际操作能力,这种教学模式是一项非常有潜力的教学方法,需要进一步摸索和完善。     

用导向选择链更替技术建立抗肝癌抗原HAb18G的人源性Fab基因库

目的 :在嵌合HAb18 Fab抗体的基础上 ,利用载体pComb3X ,采用导向选择链更替技术建立全人源性Fab基因库。方法 :用RT PCR自肝癌患者外周血单个核细胞 (PBMC)中 ,扩增全套人抗体Fd基因片段和L链基因。首先 ,将Fd基因克隆入已含嵌合L链基因的展示载体pComb3X/CL中 ,建立人 -鼠杂合的Fab基因库 ,以原核表达的非融合HAb18G的胞外区片段为抗原 ,筛选杂合的Fab基因 ,以得到人Fd基因。然后应用筛选出的Fd基因与人L链基因库配对 ,建立全为人Fab的基因库 ,并筛选全人Fab基因。将IPTG诱导的表达菌裂解 ,取其上清对pⅢ Fab融合蛋白的功能进行分析 ,并对其编码基因进行测序。结果 :建立了库容为 2× 10 7的杂合Fab基因库 ,经 6轮筛选后得到 7株杂合Fab基因。利用筛选的人Fd基因建立了库容为 0 .8× 10 7的全人Fab基因库 ,经 4轮筛选得到 2株亲和力较高、特异性强的人Fab基因。测序结果显示 ,2株Fab基因具有相同的Fd基因序列 ,与亲本抗体同属IgG2亚类 ;L链基因为κ型 ,可变区均属于Vκ3家族。结论 :利用导向选择链更替技术 ,筛选出特异性较强、完全人源化的抗肝癌抗原HAb18G的Fab抗体 ,为进一步的工作打下了基础。     

小儿后腹腔镜在儿童肾上腺肿瘤切除术中的应用

经过10余年的发展，腹腔镜微创手术已逐步成为治疗肾上腺疾病的首选手术方法。我院自2002年8月至2005年12月，应用腹腔镜经腹膜后途径对5例儿童肾上腺肿瘤行微创切除术，取得了满意的临床效果，报告如下。     

HMGB1在大肠癌组织中的表达及其意义

目的：研究大肠癌组织中高迁移率族蛋白1（high mobility group box 1，HMGB1）的表达，并探讨其与癌分化程度、肿瘤大小以及转移的关系。加入不同浓度丁酸钠后，观察SW620细胞中HMGB1的表达情况，以及不同药物浓度对癌细胞增殖活性的影响，从而探讨HMGB1与大肠癌细胞增殖活性的关系。方法：免疫组织化学法检测70例大肠癌组织、70例癌旁组织、70例正常大肠组织HMGB1蛋白表达；培养SW620细胞，MTT法检测SW620细胞增殖情况，计算抑制率，绘制抑制率曲线；免疫细胞化学法检测HMGB1蛋白表达情况。结果：HMGB1在大肠癌中呈强阳性表达（80．0％），在癌旁组织中仅有微弱表达，正常大肠组织无表达；HMGB1的阳性率与癌分化程度无关（P〉0．05）；与肿瘤的大小、浸润、淋巴及血道转移呈正相关（P〈0．01）；加入不同浓度丁酸钠后，对SW620细胞生长均有抑制作用，且丁酸钠的抑制作用与药物浓度和作用时间呈现一定的正相关；同时，随着药物浓度的增加，HMGB1的表达也有所下降。结论：HMGB1在大肠癌中呈强阳性表达，HMGB1与大肠癌的转移与增殖有着密切的联系，可作为大肠癌生长、转移及预后的重要判定指标。     

经腹腔镜与经腹阑尾切除术治疗的对照分析

目的 探讨腹腔镜阑尾切除术治疗小儿化脓性及坏疽阑尾炎的疗效。方法 回顾性分析应用腹腔镜及经腹行阑尾切除术治疗化脓及坏疽阑尾炎病人各380例。每组均含242例化脓性阑尾炎及138例坏疽性阑尾炎。结果 开腹阑尾切除术组术后腹盆腔脓肿、围术期机械性肠梗阻及伤口感染的发病率分别为21／380、19／380和24／380，均显著高于腹腔镜阑尾切除术组的10／380、6／380和2／380，经统计学分析均有显著性差异。结论 经腹腔镜阑尾切除术较经腹阑尾切除术可显著降低化脓性及坏疽性阑尾炎术后并发症的发生率。     

放射性核素显像对肠重复畸形术前诊断的应用价值

近15年来我院共收治肠重复畸形患儿45例,均经手术及病理证实。其中19例行放射性99mTcO4检查,14例有阳性发现,其余26例中仅6例术前基本明确诊断。放射性核素99mTcO4检查对肠重复畸形,特别是对反复间断血便的病例,为最有价值的诊断方法之一[1]。 临床资料 1.一般资料1983年1月～1998年12月我院共收治重复畸形患儿 45例。其中反复血便者 20例占 44. 4%,有急性肠梗阻或腹膜炎表现者19例占42.2%,以腹部肿物就诊者6例,占13.3%。全部患儿均行重复肠管或肿物切除,肠端端吻合,重复肠管开窗,内膜剥脱等相应手术。全部病例经病理检查均支持肠重复畸形…     

新辅助热化疗对乳腺癌微血管密度和血清VEGF的影响

目的:研究新辅助热化疗对乳腺癌患者肿瘤微血管密度(MVD)、血清血管内皮细胞生长凶子(VEGF)的影响.方法:应用免疫组织化学技术及酶联免疫吸附测定法(ELISA),观察新辅助热化疗和新辅助化疗后肿瘤MVD的变化,检测乳腺癌患者接受新辅助热化疗和新辅助化疗前后血清VEGF含量.结果:新辅助化疗组与对照组相比,MVD明显下降[(47.4±13.3)个/HP vs (81.7 ±17.6)个/HP,P<0.05];新辅助热化疗组与新辅助化疗组及对照组相比,MVD下降更明显[(26.8±5.9)个/HP vs (47.4±13.3)个/HP及(81.7±17.6)个/HP,P<0.05].与对照组相比,新辅助化疗和新辅助热化疗后血清VEGF含量均明显降低[(315±154)ng/L vs (156±53)ng/L,P<0.05;(307±156)ng/L vs(140±47)ng/L,P<0.05];新辅助热化疗与新辅助化疗后VEGF含量变化两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:新辅助热化疗和新辅助化疗后乳腺癌患者MVD及血清VEGF水平均明显下降.新辅助热化疗组较新辅助化疗组MVD下降更为明显.