锌指蛋白CXXC5通过调节肠上皮细胞的增殖修复以控制肠炎的发生

目的探讨CXXC5在炎症性肠病中的潜在功能。方法利用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎模型检测野生型对照小鼠和CXXC5基因敲除小鼠对DSS的敏感性,利用免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测了肠道上皮细胞增殖、炎症因子表达和细胞增殖相关通路的激活。结果发现CXXC5基因敲除小鼠比野生型对照小鼠更敏感,呈现严重的肠道组织损伤和高致死率。我们进一步发现CXXC5基因敲除小鼠的肠上皮细胞增殖在修复期非常低,而对照小鼠的肠上皮细胞则大量增殖。虽然炎症因子的表达在2组小鼠中相当,但是我们发现c-MYC蛋白在CXXC5基因敲除小鼠的肠上皮细胞中表达量明显偏低,这可能导致了细胞增殖的减少。结论证明CXXC5能够抑制炎症性肠病的发生,促进肠上皮细胞的损伤修复,因此是控制肠炎发生的一个重要调控子。     

HCV NS3/4A蛋白酶抑制剂药物及其耐药信息数据库的建立和应用

目的建立针对HCV NS3/4A蛋白酶的直接抗病毒药物(DAA)及相关耐药突变的数据库,并利用该数据库进行耐药性分析。方法收集、整理已经公开发表的蛋白酶抑制剂类DAA及耐药相关的数据和信息,将病毒突变体的体外耐药数据及临床治疗鉴定的耐药相关突变信息录入数据库,按照药物种类、病毒基因型别、耐药突变位置及突变氨基酸种类等的不同对这些信息进行统计分析,并将部分结果以网站的形式进行在线查询。以HCV难治性基因3型为例,利用该数据库对其进行多数据耐药分析。结果建立了HCV NS3/4A蛋白酶抑制剂类DAA及耐药信息数据库,部分数据已可在线查询,链接为http://www.biosino.org/hcv/。该数据库包括四个部分内容:DAA药物信息;含耐药突变的不同基因型病毒株的体外耐药信息;耐药相关突变的预存流行率以及在治疗失败患者中的检出率;DAA与NS3/4A蛋白酶复合物的三维结构图,共计上万条信息。利用该数据库分析了不同基因型HCV的耐药性,发现蛋白酶抑制剂药物对基因3型HCV治疗效果最差。尽管第三代抑制剂对基因3型野生型HCV具有较好的抗病毒效果,但是病毒极易出现耐药突变。结论该数据库是目前我国首个HCV蛋白酶抑制剂DAA及耐药信息数据库,为HCV耐药性研究及临床治疗用药提供了重要的信息来源和指导。     

温和灸对大鼠肛门括约肌损伤后间充质干细胞移植归巢的影响

目的:观察不同疗程温和灸对大鼠肛门括约肌损伤间充质干细胞移植后括约肌组织趋化因子SDF-1和MCP-3的表达,探讨温和灸对间充质干细胞归巢的影响。方法:将SD大鼠分为手术组、假手术组、空白对照组。每组再细分成温和灸组、干细胞移植组、温和灸联合干细胞移植组和生理盐水组。每项温和灸30 min,疗程分为24 h、3 d、7 d、14 d。治疗后取括约肌组织,运用Real-Time PCR方法检测括约肌组织趋化因子SDF-1和MCP-3的表达。结果:括约肌组织SDF-1与MCP-3表达趋势相近,SDF-1与MCP-3表达均呈现:手术组假手术组空白对照组,温和灸联合干细胞移植组干细胞移植组温和灸组生理盐水组,且治疗后14 d7 d24 h3 d。结论:温和灸可促进肛门括约肌损伤时间充质干细胞移植后的归巢,且具有一定的时效性。     

miRNA-21-3p对小鼠肝细胞系BNL CL.2体积和增殖的影响

目的观察miRNA-21-3p对小鼠肝细胞系（BNL CL.2）体积和增殖的影响。方法小鼠肝细胞系BNL CL.2转染miRNA-21-3p模拟物和抑制物。DiO染膜法和CCK-8法测定miRNA-21-3p对小鼠肝细胞系体积和增殖的影响;荧光定量PCR法检测miRNA-21-3p以及干预该miRNA后与细胞周期相关的基因的表达情况。结果在小鼠肝细胞系,转染miRNA-21-3p的模拟物可以显著增加miRNA-21-3p的表达,转染miRNA-21-3p抑制剂可以显著降低miRNA-21-3p的表达（P〈0.01）。干预miRNA-21-3p不影响细胞的体积。增加miRNA-21-3p的表达显著促进细胞增殖（P〈0.01）,而抑制miRNA-21-3p的表达可以显著降低细胞增殖（P〈0.01）。干预miRNA-21-3p,检测细胞周期相关的基因的表达,发现上调该miRNA可以下调Cyclin E（P〈0.05）,上调Ki67、p15、p16和p18（P〈0.05）,且对于CDKN3、Orc6、MCM4和p57没有影响（P〉0.05）。下调该miRNA对于以上基因均没有影响（P〉0.05）。结论 miRNA-21-3p对于小鼠肝细胞系体积没有影响,但是可以调控增殖,且它对于增殖的调控效应是部分通过影响周期相关的基因实现。     

Ta4C3-PVP纳米片对4T1三阴性乳腺癌小鼠移植瘤的放射增敏作用

目的 研究Ta₄C₃-PVP纳米片对三阴性乳腺癌4T1细胞小鼠移植瘤的放射增敏作用。方法 于雌性BALB/c小鼠右侧腹皮下注射4T1细胞建立4T1荷瘤小鼠模型,按肿瘤体积大小均匀分为空白对照组、单纯Ta₄C₃-PVP组、单纯照射组、Ta₄C₃-PVP联合照射组。尾静脉注射20 mg/kg Ta₄C₃-PVP预处理24 h后给予8 Gy单次肿瘤局部X射线照射,测量移植瘤体积、瘤重,检测肿瘤细胞增殖标志物Ki-67蛋白表达、DNA双链断裂（DSBs）分子标志物γ-H2AX焦点形成,绘制肿瘤生长曲线并计算放射增敏系数（EF）及抑瘤率。结果 与空白对照组相比,单纯照射组、Ta₄C₃-PVP联合照射组于照射后16 d均能明显抑制肿瘤生长（t=5.41、9.59,P<0.05）、降低瘤重（t=2.67、4.40,P<0.05）,其中Ta₄C₃-PVP联合照射组的EF达1.57,抑瘤率约为64%,明显优于单纯照射组（42%）。免疫组织化学结果显示,与空白对照组相比,单纯照射组和Ta₄C₃-PVP联合照射组肿瘤细胞Ki-67蛋白表达受到明显抑制（t=5.73、8.02,P<0.05）、γ-H2AX焦点产额明显增加（t=2.97、9.86,P<0.05）,且Ta₄C₃-PVP联合照射组较单纯照射组Ki-67表达抑制更显著（t=4.75,P<0.05）、γ-H2AX焦点产额更多（t=4.42,P<0.05）。结论 Ta₄C₃-PVP纳米片可通过增加射线诱导的DNA DSBs,增强4T1荷瘤小鼠移植瘤的放射敏感性。     

LINC01296/miR-1255b-5p促进非小细胞肺癌进展的研究

目的 探究下调LINC01296的表达对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）进展的影响,以及LINC01296调控miR-1255b-5p在NSCLC发生发展中的分子机制。方法 培养6种NSCLC细胞系;实时荧光定量聚合酶链反应法检测LINC01296在NSCLC细胞系以及在48例患者样本中表达水平的高低;细胞计数试剂盒-8法检测稳转细胞株的细胞增殖情况;克隆形成实验检测细胞的生长以及增殖状况;划痕实验检测细胞的迁移情况;FITC-Annexin-V法检测细胞凋亡;动物实验,包括裸鼠尾静脉和皮下瘤注射,观察癌细胞的转移以及成瘤情况;双荧光素酶报告基因实验验证LINC01296与miR-1255b-5p之间存在靶向结合关系。 结果 LINC01296在NSCLC中高表达;LINC01296基因敲低抑制NSCLC细胞生长、迁移;LINC01296敲低抑制体内瘤体的生长和转移;LINC01296与miR-1255b-5p的之间存在海绵吸附作用;LINC01296与miR-1255b-5p的表达呈负相关。结论 LINC01296作为NSCLC的促癌分子,通过抑制miR-1255b-5p的表达水平,促进了NSCLC的发展。     

进展期贲门癌患者术后早期腹腔32P-胶体灌注治疗20例

目的尝试对进展期贲门癌患者术后进行早期腹腔32P～胶体灌注治疗,并对该方法及其疗效进行评价.方法在手术完成切除吻合程序后,将末端侧壁开有2～3个小孔的软硅胶管置于上腹瘤床部位,另一端经上腹壁戳孔引出,缝合固定.术后1wk消化道功能恢复后,开始对癌患者腹腔灌注32p-胶体进行内照射治疗.共处理患者20例,并以术后常规化疗患者20例作为对照.结果第1,2,3a内,32P-胶体灌注组的生存率分别为85%,75%和60%,均优于对照组(70%,40%,35%).疗后毒副作用的程度也远比后者小.结论对进展期贲门癌患者进行32p-胶体腹腔灌注内照射治疗是一种安全可靠、毒副作用轻微、简单易行的辅助治疗方法.     

Hsp90抑制剂FS-108抑制癌基因依赖肿瘤细胞增殖及运动的机制研究

目的探讨Hsp90抑制剂FS-108抑制癌基因依赖的肿瘤细胞EBC-1和A375的增殖及运动能力的作用机制。方法采用磺酰罗丹明B法检测FS-108对细胞增殖的影响;采用蛋白免疫印迹法检测FS-108对Hsp90客户蛋白、周期调控蛋白及凋亡调控蛋白的变化;采用流式细胞术检测FS-108作用后细胞周期分布及凋亡情况;采用Transwell小室方法检测FS-108对细胞运动能力的影响。结果 FS-108对EBC-1和A375均有明显的增殖抑制作用,IC_(50)分别为25.53 nmol·L~(-1)和30.02 nmol·L~(-1)。FS-108能有效降解肿瘤细胞中的客户蛋白c-Met和B-Raf并进而抑制下游AKT及ERK信号通路。FS-108能诱导细胞产生G_2/M期阻滞及凋亡。同时,FS-108还能明显抑制EBC-1和A375细胞的运动能力。结论 Hsp90抑制剂FS-108主要通过诱导肿瘤细胞产生G_2/M期阻滞和细胞凋亡,发挥其抑制增殖的细胞生物学效应,同时,FS-108也具有一定抗转移潜能。     

培养基成分对乳酸芽孢杆菌Bacillus sp WTFY生长及芽孢形成的影响(英文)

目的　探讨培养基成分对乳酸芽孢杆菌BacillusspWTFY芽孢形成的影响。 方法　分别改变碳源、氮源、无机盐的浓度及种类 ,观察芽孢的形成情况。结果　当碳源 (葡萄糖 )浓度超过 0 .1 %时 ,菌体无芽孢形成 ,其他如氮源、无机盐 (磷、镁 )的浓度及种类也有一定的影响 ,但影响并不十分显著。结论　碳源浓度是影响乳酸芽孢杆菌 BacillusspWTFY芽孢形成的关键因素     

血竭的超临界CO2流体萃取工艺研究

目的研究超临界CO2流体萃取(SFE-CO2)血竭中抑制α-葡萄糖苷酶有效成分的工艺条件。方法采用单因素法，探讨了压力、温度、时间和CO2流量对血竭萃余率和抑制α-葡萄糖苷酶活力提高率的影响。结果最佳工艺条件为萃取压力15MPa，温度45℃，CO2流量为30kg／h，时间2h。优于传统的索氏抽提。结论SFE-CO2工艺用于血竭中有效成分提取，萃余率和抑制α-葡萄糖苷酶活力提高率均有较大程度提高。