肺岩宁冲剂对肺癌细胞移植瘤组织基因差异表达的影响

 目的 应用基因芯片技术研究肺岩宁冲剂对裸鼠人肺癌细胞移植瘤组织的基因表达谱的影响,初步探讨肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制。 方法 将人肺癌细胞H460皮下移植瘤裸鼠24只随机分为三组：空白对照组：0.9%氯化钠溶液0.4ml灌胃×14天;化疗组：第1、3、5天DDP溶液1ml(含DDP0.1mg)腹腔注射,0.9%氯化钠溶液0.4ml灌胃×14天;肺岩宁冲剂组：肺岩宁冲剂药液0.4ml（含生药0.6g）灌胃×14天。治疗后第15天提取各组移植瘤组织的总RNA并与人全基因组芯片杂交,经激光共聚焦扫描仪扫描及Lux Scan3.0 软件分析后比较各组中的差异表达基因。 结果 与对照组比较,化疗组共筛查出差异表达基因2187条,其中上调基因997条,下调基因1190条,功能未知基因326条。肺岩宁冲剂组共筛查出差异表达基因2093条,其中上调基因968条,下调基因1025条以及未知功能基因145条。按照基因功能可分为细胞周期相关基因、代谢相关基因、细胞信号转导分子、转录调控因子等。 结论 为明确肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制提供重要参考。     

五味子中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究

目的从中药五味子中提取分离α 葡萄糖苷酶抑制剂。方法利用浸提、超滤、柱层析、醋酸铅沉淀等方法进行纯化。结果初步分离得到α 葡萄糖苷酶抑制剂。结论该抑制剂成分为大分子糖苷类物质 ,相对分子量在 5万以上 ,抑制类型为非竞争性抑制。     

焦虑状态下去甲肾上腺素激活Akt信号通路对乳腺癌作用研究

目的探讨去甲肾上腺素在焦虑状态下对乳腺癌的作用及机制。方法将20只C57BL/6小鼠分为对照组及模型组,通过接种肿瘤细胞和实验刺激建立焦虑荷瘤小鼠模型,造模结束后检测血清中去甲肾上腺素水平并测量肿瘤体积。人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞在去甲肾上腺素处理后检测其增殖、迁移、侵袭、细胞周期分布及Akt信号通路的激活状态。结果模型组小鼠肿瘤体积大于对照组（P < 0.05）,血清中去甲肾上腺素含量明显升高（P < 0.01）,且同焦虑程度呈现相关关系（r=0.78）。去甲肾上腺素提高了MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且促进DNA复制以及Akt信号通路的激活。结论去甲肾上腺素在焦虑状态下激活AKt信号通路,促进乳腺癌的发展。     

利用貉心脏提取ATP试验简报

三磷酸腺苷(ATP)是动物生命活动不可缺少的高能物质。目前医药用的ATP大多是利用兔肌肉提取。为了综合利用人工养殖貉的屠体,提高养殖效益,笔者利用屠宰后貉的心脏提取ATP的试验开发。     

电击转染技术在神经干细胞中的应用研究

目的:探讨利用电击转染技术将pEGFP-N2基因导入神经干细胞的条件。方法:取SD胎鼠(14 d)的纹状体,将细胞于37℃,5%CO2的培养箱中培养,N estin免疫荧光染色检测,并将pEGFP-N2基因分别在100 V、80μs,200V、80μs,300V、80μs以及400V、80μs的4种不同电击转染条件下,导入神经干细胞。结果:N estin免疫荧光染色后呈阳性,确定为神经干细胞。在200V、80μs条件下,转染效率达80%以上,是4种条件下的最高转染效率。结论:在200V,80μs的电击转染条件下,基本无细胞死亡,达到80%以上转染效率,实现了4种不同条件中的最高转染效率。     

建立我国突发事件应急状态下的医疗产品紧急使用授权机制探讨

目的： 通过对美国FDA的紧急使用授权（Emergency Use Authorization,EUA）制度进行研究,结合我国国情,探讨在我国建立医疗产品紧急使用授权机制。方法： 文献研究、专题访谈。结果与结论： 紧急使用授权制度有别于我国现有的特别审评程序,对于应对突发事件应急状态下所需药物的评估和使用授权,提高药物使用的安全性、时效性、可及性及合规性具有重要意义。本研究初步提出了在我国建立医疗产品紧急使用授权机制的考虑要点,包括建立紧急使用授权制度的必要性、制度的基本定位、上位法的支持、制度构建的关键要素、配套的技术指南及其他需要关注的问题。     

双灵固本散对肝癌细胞端粒酶及细胞凋亡的研究

目的：观察双灵固本散对肝癌细胞端粒酶的抑制及细胞凋亡的诱导作用。方法：将肝癌细胞接种于培养板及培养皿中，将双灵固本散粉剂稀释成不同的浓度加入，观察细胞增殖情况、其端粒酶的活性情况，通过光镜、扫描电镜和透射电镜观察细胞的凋亡情况。结果：双灵固本散实验组对肝癌细胞增殖有抑制作用，对肝癌细胞有明显的诱导凋亡作用，对肝癌细胞端粒酶活性有明显抑制作用。结论：双灵固本散能明显抑制肝癌细胞端粒酶的活性，抑制其细胞增殖，诱导其细胞凋亡。     

16通道无标记型糖化血红蛋白检测免疫传感器的构建

目的构建1种检测糖化血红蛋白(HbA1c)的无标记电化学免疫传感器。方法通过HbA1c抗体修饰16通道丝网印刷碳电极(16-SPCE),制备特异检测HbA1c的无标记电化学免疫传感器。采用循环伏安法测定16-SPCE电化学免疫传感器检测HbA1c的电信号,优化检测条件(HbA1c抗体最佳包被浓度、HbA1c抗原最佳孵育时间、电极的电化学特性、不同修饰电极的性能),同时进行初步方法学评价。结果 HbA1c抗体最佳包被浓度为50μg/mL,HbA1c抗原最佳孵育时间为60 min。构建的16-SPCE电化学免疫传感器检测HbA1c的线性范围为1～50μg/mL,线性方程为Y=0.199X+10.468(r=0.955),检测限为0.88μg/mL。50μg/mL牛血清白蛋白(BSA)、50μg/m L前列腺特异性抗原(PSA)和50μg/m L葡萄糖对16-SPCE电化学免疫传感器检测Hb A1c无干扰。制备的免疫电极在4℃能稳定放置5 d。采用16-SPCE电化学免疫传感器检测模拟血清样本中的HbA1c,各浓度的电流响应值能明显区分,且检测结果的重复性较好。结论构建的16-SPCE电化学免疫传感器具有良好的电化学响应能力、线性范围、抗干扰能力等。     

MicroRNA-34家族的功能及应用研究进展

MicroRNA-34(miR-34)家族包括miR-34a、miR-34b、miR-34c,与人体正常发育及多个器官功能的维持密切相关。MiR-34的表达受抑癌基因p53和长链非编码RNA(long non-coding RNAs, lncRNAs)的调控,其表达失衡会导致一系列疾病的发生发展。MiR-34与肿瘤发生发展密切相关,主要通过阻碍细胞周期、诱导细胞凋亡与自噬、抑制上皮-间充质转化、阻止细胞迁移与侵袭等机制,发挥抑癌作用。MiR-34在心脏保护中也发挥着重要作用。MiR-34功能的发挥主要涉及NF-κB、Notch等多个信号通路,基于miR-34表达的调控有利于部分疾病的控制和转归,是潜在的临床诊治靶标,具有广阔的临床应用前景。因此,本文就miR-34家族的功能及应用进展进行综述,以期为后续研究提供参考。     

RP—HPLC法同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β，β-二甲基丙烯酰紫草素的含量

目的:建立同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法。方法:采用 RP-HPLC法,Zorbax Eclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的乙腈溶液(A)和含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的水溶液(B),梯度洗脱,洗脱程序为:0 min(67%A),5 min(70%A),15 min(75%A),30 min(75%A);流速1.0 mL·min~(-1);检测波长516 nm,柱温30 ℃。结果:紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素浓度分别在1.2～12.2μg·mL~(-1)(r=0.9999)、2.5～24.8μg·mL~(-1)(r=0.9998)、11.3～112.8μg·mL~(-1)(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好线性关系(n=5)。方法回收率(n=9)分别为100.3%,98.6%,98.4%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定。