小鼠静脉注射醒脑静注射液后栀子苷的脑药浓度及药动学研究

目的 建立小鼠iv醒脑静注射液后测定脑内栀子苷浓度的HPLC法,探讨醒脑静注射液中栀子苷在小鼠体内的药动学过程。方法 40只小鼠尾iv醒脑静注射液10.9 mg/kg（以栀子苷计）后,分别于1、3、5、10、30、60、90、120 min摘眼球放血后脱颈椎处死5只小鼠,迅速分离出小鼠全脑,制成脑匀浆,HPLC测定脑匀浆中栀子苷的量,以Kinetica软件拟合药动学参数,拟合方法选择非房室模型。结果 栀子苷脑药浓度在54～1 620 ng/g时线性关系良好,r＝0.999 1;栀子苷脑药浓度在216、864、1 620 ng/g时萃取回收率分别为（102.60±4.28）%、（102.16±4.48）%、（97. 66±3.25）%;日内、日间精密度的相对标准偏差（RSD）均小于4.10%。小鼠iv醒脑静注射液后,主要药动学参数C_max为（1 246.0±520.7）ng/g,t_max为1 min,MRT为（50.5±1.9）min,AUC为（35 780.3±6 148.0）ng/(min?g)。结论 该方法简便、快速、重复性好,适用于小鼠栀子苷脑药浓度测定及药动学研究。     

复方栀子凝胶的处方工艺研究

目的 优化复方栀子凝胶处方组成,确定复方栀子凝胶的最佳处方工艺。方法 采用正交试验方法,通过耐寒耐热实验,对凝胶处方的基质进行优化筛选,以涂展性、光泽性、均匀度、离心稳定性以及体外透皮释放性能为指标,对处方的其他辅料进行优化筛选。结果 最佳的凝胶处方组成为卡波普940 1.5%,丙二醇1.5%,甘油3%,三乙醇胺5%,氮酮5%。结论 优化后的处方更加可靠、稳定,能够满足复方栀子凝胶的生产要求。     

正交试验法优选治郁颗粒提取工艺

目的: 优选治郁颗粒的醇提工艺和水提工艺,为该制剂的工业化生产提供参考. 方法: 采用HPLC测定栀子苷含量,流动相乙腈-水(10:90),检测波长238 nm;以栀子苷提取率为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、加醇量、提取时间及提取次数对醇提工艺的影响.采用UV测定总多糖含量,检测波长490 nm;以总多糖提取率为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间及提取次数对水提工艺的影响. 结果: 最佳提取工艺为加6倍量70%乙醇提取2次,每次1.0 h,药渣加10倍量水煎煮3次,每次2.0 h;栀子苷、总多糖提取率分别为0.013 29,0.030 39 g·g^-1. 结论: 该优选工艺合理可行,有效成分提取率高.     

清开灵口服液生产工艺优化研究*

[目的]优化清开灵口服液提取醇沉工艺条件。[方法]高效液相色谱(HPLC)法监测指标成分栀子苷,采用L(934)正交实验法,考察水提取和醇沉工艺。[结果]清开灵口服液优化工艺条件为:取处方量栀子、板蓝根和金银花,用9倍量水浸泡药材1 h后提取2次,每次2 h,合并2次提取液浓缩至生药量与浓缩液体积比1∶1,加入95%乙醇调节乙醇浓度为70%,调pH值为6进行醇沉;栀子苷的转移率为64.8%。[结论]该优选工艺重现性好,栀子苷转移率高,固形物收率适宜,达到了生产工艺优化的目的。     

关于2010年版《中国药典》栀子药材含量测定指标选择的商榷

目的: 完善栀子药材的HPLC质量控制指标. 方法: 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,6%~16%A;15~22 min,16%~21%A;22~34 min,21%~24%A;34~50 min,24%~42%A),京尼平苷、西红花苷-1的检测波长分别为238,440 nm. 结果: 不同产地栀子中京尼平苷质量分数23.025~53.693 mg·g^-1,均符合2010年版《中国药典》≥1.8%的规定;其中2批栀子的外观颜色为灰棕色、棕黄色,西红花苷-1的含量极低,分别为1.963,3.434 mg·g^-1,应为不合格药材. 结论: 仅以京尼平苷作为栀子药材的质量控制指标不够合理,建议增加西红花苷-1的含量测定,为新版《中国药典》的修订提供参考.     

高效液相色谱法同时测定解郁和肝胶囊中栀子苷和芍药苷的含量

目的:建立解郁和肝胶囊中栀子苷和芍药苷的HPLC含量测定方法。方法:用Diamonsil-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)为流动相;检测波长为238 nm;柱温为25℃;流速为1.0 mL·min-1。结果:栀子苷进样量在0.16～2.42μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 7,平均回收率为99.25%(n=6);芍药苷进样量在0.12～1.82μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 5,平均回收率为98.87%(n=6)。结论:本方法操作简便,结果准确,重现性好,可作为该制剂的含量测定方法。     

高效液相色谱法测定利胆排导片中栀子苷含量

目的 建立测定利胆排导片中栀子苷含量的高效液相色谱法.方法 色谱柱为Phenomenex C18柱(250mid×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(12:88),流速为1.0 mL/min,检测波长为238 nm,柱温为40℃.结果 栀子苷质量浓度在15.01～75.02μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9);平均加样回收率为99.30%,RSD=1.85%(n=6).结论 该方法简便易行,结果准确可靠,适用于利胆排导片的质量控制.     

栀子苷抑制高糖诱导的乳鼠心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞的表型转化

目的探讨栀子苷(GE)对高糖诱导过程中体外培养的乳鼠心脏成纤维细胞(CF)表型转化及胶原合成的影响及机制。方法提取新生大鼠原代CF,给予高糖刺激(葡萄糖浓度为33.3 mmol/L)和GE干预,24 h后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定CF细胞内Ⅰ型胶原(ColⅠ)、ColⅢ及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达水平;试剂盒检测氧化应激相关指标,包括超氧化物歧化酶(SOD)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)活性及丙二醛(MDA)的产量;Western blot检测转化生长因子β(TGF-β)、乙酰化的Smad3(ac-Smad3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白质的表达水平。给予SIRT1抑制剂EX-527后,采用免疫荧光共染SIRT1及α-SMA。再次检测氧化应激及ac-Smad3信号通路相关蛋白的表达。采用SPSS 22.0统计软件进行统计学分析。结果不同浓度的GE处理高糖刺激后的大鼠CF 24 h后,ColⅠ、Ⅲ及CTGF mRNA表达有所降低,且随GE浓度的增加,抑制作用增强,在1～100μmol/L之间呈现浓度依赖性。GE可明显降低高糖诱导过程中NADPH的活性及MDA的含量,增强SOD活性。Western blot结果显示,高糖诱导下,TGF-β、ac-Smad3及α-SMA水平明显升高,而GE能明显抑制这3种蛋白的升高。同时,GE明显逆转了高糖条件下SIRT1的下调。免疫荧光结果显示,应用SIRT1抑制剂EX-527后,GE对高糖条件下α-SMA及氧化应激的抑制作用消失。结论 GE能够抑制高糖诱导的大鼠CF表型转化及胶原合成,其机制可能与SIRT1介导的TGF-β/ac-Smad3信号通路及氧化应激有关。     

Box-behnken响应面法优化紫红生肌软膏的醇提工艺

目的优选紫红生肌软膏的醇提工艺参数,为紫红生肌软膏的新药开发提供依据。方法以栀子苷、连翘酯苷A、羟基红花黄色素A为评价指标,在单因素试验的基础上,以乙醇浓度、加醇量、提取时间为考察因素,采用Box-behnken响应面法设计试验,采用层次分析法-熵权法组合赋权确定各指标权重系数并计算综合评分,从而优化紫红生肌软膏醇提工艺参数。结果紫红生肌软膏最佳醇提工艺为采用70%的乙醇为溶剂提取两次,第1次加9倍量乙醇提取150 min,第2次加7倍量乙醇提取120 min。该工艺参数综合评分的模型实测值为100.70,与模型预测值接近。结论优选出的紫红生肌软膏最佳醇提工艺稳定可行,可为紫红生肌软膏进一步开发为新药提供依据。     

一测多评法同时测定蒙药古日古木-13丸中6种成分

目的建立古日古木-13丸中6种成分没食子酸、羟基红花黄色素A、栀子苷、鞣花酸、木香烃内酯、去氢木香内酯的一测多评方法,验证该方法在古日古木-13丸质量分析中应用的科学性与可行性。方法采用HPLC法,以栀子苷为内参物,建立没食子酸、羟基红花黄色素A、鞣花酸、木香烃内酯、去氢木香内酯的相对校正因子(fs/i),并利用fs/i计算古日古木-13样品中该5种成分的含量,同时采用外标法计算各成分的含量,并比较2种方法差异。结果没食子酸、羟基红花黄色素A、鞣花酸、木香烃内酯、去氢木香内酯的fs/i分别为0.481 0、0.906 4、0.170 9、0.971 2、1.261 5。一测多评法与外标法得到的6批古日古木-13丸样品含量测定结果 RSD<2.0%,没有显著差异。结论以栀子苷为内参物建立fs/i准确,易行,一测多评法可以用于古日古木-13丸中多指标成分的质量评价。