HPLC法同时测定大鼠心脏中清脑宣窍方三种成分栀子苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量

目的建立大鼠心脏中清脑宣窍方有效部位中栀子苷、人参皂苷Rg1、Rb1的HPLC浓度测定方法。方法内脏样品匀浆、甲醇提取、离心后水溶,用C18固相柱萃取,以亥茅酚苷为内标,选用色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),Eclipse XDB-C18保护柱。流动相为乙腈-酸水二元梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm。结果各成分的最低检测浓度(S/N>3)在0.16~1.1 mg/L之间,平均回收率均在90%以上,日内、日间精密度及稳定性的RSD均小于10%。结论该方法简便、准确,可用于心脏组织中清脑宣窍方有效部位栀子苷、人参皂苷Rg1、Rb1三种成分定量分析。     

D301R大孔树脂纯化栀子苷的放大与再生工艺研究

目的考察D301R大孔树脂柱精制纯化栀子苷的放大与再生工艺。方法以精制品中栀子苷的含量和栀子苷的转移率为指标,考察放大后的树脂柱对栀子苷的吸附洗脱情况,并进一步考察了大孔树脂的再生工艺和使用次数。结果大孔树脂柱柱体积放大8倍后,栀子苷的吸附率、栀子苷转移率、制备所得的栀子苷提取物的纯度等重要参数变化不大。再生实验结果表明:可采用酸碱再生工艺再生树脂柱。采用D301R大孔树脂纯化栀子提取液中的栀子苷,可连续使用16次。结论此工艺稳定、经济适用,可较好地精制纯化栀子提取液的栀子苷,可应用于工业化生产。     

多波长RP-HPLC法同时测定导赤丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱

目的建立同时测定导赤丸(黄连、栀子、黄芩、大黄、连翘、木通、玄参、天花粉、赤芍、滑石粉)中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的方法。方法采用多波长RP-HPLC,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱依次为A:15%～20%(0.00～10.00)min,A:20%～25%(10.00～15.00)min,A:25%～35%(15.00～25.00)min;柱温为室温;体积流量为1.0 mL/min;检测波长分别为240 nm(栀子苷)、278 nm(黄芩苷)和340 nm(盐酸小檗碱)。结果栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的进样量分别在0.037 5～0.337 5μg(r=0.999 7),0.0368～0.736μg(r=0.999 9)和0.039～0.351μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为102.95%、102.83%和98.61%;RSD分别为2.63%、1.90%和2.98%。结论方法简便,结果准确,重复性好,适用于同时测定导赤丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱。     

HPLC测定柴芍丸中芍药苷、栀子苷及丹皮酚的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定柴芍丸中芍药苷、栀子苷及丹皮酚含量的方法。方法:色谱柱为InertsilODS-SP(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长230 nm,流速1.0 mL.min-1。结果:芍药苷在0.494 4～12.36μg(r=1)线性关系良好,平均回收率为98.77%,RSD 2.1%;栀子苷在0.492 2～12.305μg(r=0.999 9)线性关系良好,平均回收率101.64%,RSD 1.9%;丹皮酚在0.260 2～6.505μg(,r=0.999 9)线性关系良好,平均回收率100.92%,RSD1.7%。结论:方法简便、快速、重复性好,可用于柴芍丸的质量控制。     

高效液相色谱法测定鼻渊舒颗粒中栀子苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定鼻渊舒颗粒中栀子苷含量的方法。方法:采用Kromasil C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-0.2%磷酸溶液(30∶70),流速1.0 mL.min-1,检测波长238 nm,柱温35℃。结果:栀子苷在0.04～0.51μg(r=0.999 9),线性关系良好。平均回收率100.35%(n=5),RSD 1.31%。结论:方法分离度好,快速、简便,适用于鼻渊舒颗粒中栀子苷的含量测定,可作为产品的质量控制方法。     

HPLC测定清金化痰汤中黄芩苷和栀子苷的含量

目的:建立清金化痰汤剂中黄芩苷和栀子苷的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱Agilent C18(4.6mm×250 mm,5μm),柱温30℃,测定黄芩苷流动相为甲醇-0.4%磷酸(47∶53),检测波长为280 nm,流速:0.8 mL.min-1,检测波长为280 nm;测定栀子苷流动相为甲醇-水(25∶75),检测波长为238 nm,流速1 mL.min-1。结果:传统清金化痰汤剂中黄芩苷含量为221.59 mg/剂,黄芩苷平均回收率为97.97%,栀子苷为335.73 mg/剂,栀子苷的平均回收率为98.36%。结论:此法简便快速,准确稳定,重现性好,成本低。     

京尼平苷调节胰腺β细胞增殖的细胞信号机制研究

目的考察京尼平苷（Gen）对胰腺β细胞增殖的影响及其细胞信号转导机制。方法将INS-1细胞（一种胰腺β细胞）用Gen处理一定时间之后,用MTT方法测定活细胞的数量,用BrdU标记的方法分析细胞增殖的情况,Western印迹分析Gen对于细胞增殖相关的Akt和FoxO1磷酸化的影响。结果Gen处理INS-1细胞可将活细胞数量提高45%（P〈0.01）,并且BrdU标记的阳性细胞数量明显增加（P〈0.01）。另外,Gen还能显著上调INS-1细胞中Akt308丝氨酸位点和叉头转录因子FoxO1的磷酸化（P〈0.01）,而且这种作用可被PI3K的抑制剂LY294002阻断。结论Gen能够促进胰腺β细胞增殖,而且这种作用可能与其激活PI3K激酶途径、增强FoxO1的磷酸化有关。     

栀子苷与人参皂苷Rg1配伍对缺氧诱导损伤小鼠小胶质细胞炎症因子分泌的平衡调节作用

目的通过比较栀子苷、人参皂苷Rg1单独或配伍使用对氧糖剥夺损伤的小鼠小胶质细胞炎症因子分泌平衡的调节作用的差异,明确药物配伍调节缺血损伤小胶质细胞稳态的保护作用。方法利用氧糖剥夺方法复制小鼠小胶质细胞拟缺血损伤模型,栀子苷,人参皂苷Rgl单独使用及配伍使用（通络救脑注射液）分别作用不同时间后,采用GriessReagent法测定一氧化氮（NO）含量,采用细胞计数试剂盒检测细胞活性,采用免疫酶联法及蛋白印迹法检测TNF-α及TGF-β的含量及表达水平。结果配伍使用可在不影响细胞生存活性情况下显著减少NO释放,显著降低缺血损伤小胶质细胞TNF-α水平,升高TGF-β水平,两个有效成分发挥疗效的侧重点不同,配伍使用明显优于两个有效组分单独使用。结论栀子苷,人参皂苷Rgl单独或配伍使用对拟缺血损伤人小鼠小胶质细胞分泌炎症因子具有平衡的调节作用,其机制与升高TGF-β及降低TNF-α表达有关。     

HPLC-DAD法同时测定清肺抑火片中4个成分的含量

目的 建立HPLC法同时测定清肺抑火片中栀子苷、黄芩苷、大黄素和大黄酚的含量.方法 采用Waters C18色谱柱（4.6 mm ×250 mm,5 μm）,以乙睛（A）-0.2％磷酸（B）为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,采用DAD检测器在200～400nm波长处进行检测,柱温30℃.结果 调取不同波长的色谱图分别计算各成分的含量,栀子苷（237 nm）、黄芩苷（277 nm）、大黄素（254 nm）和大黄酚（254 nm）进样量分别在0.2825～5.650μg（r2=1）;0.719～14.383 μg（r2=0.9999）;0.0415～0.83 μg（r2 =0.9998）;0.0440～0.8795 μg（r2=0.9999）范围内呈现良好的线性关系.平均回收率（n=6）分别为97.93％,97.89％,97.91％,98.04％;RSD分别为0.14％,0.47％,0.45％,0.21％.结论 该方法快速简便,结果准确可靠,为清肺抑火片的全而质量控制提供科学的依据.     

茵陈四苓颗粒乙醇提取工艺优选

目的: 优选茵陈四苓颗粒的乙醇提取工艺。 方法: 以栀子苷提取量为指标,通过单因素试验比较乙醇回流法、乙醇超声法和乙醇渗漉法,确定茵陈四苓颗粒中部分药材的提取方法;通过正交试验考察乙醇体积分数、浸泡时间、加醇量、渗漉流速对提取工艺的影响。采用HPLC测定栀子苷含量,色谱条件为Ultimate^TMC₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-水(15:85),流速1 mL·min^-1,柱温40 ℃,检测波长238 nm,进样量10 μL。 结果: 采用乙醇渗漉法提取,最佳提取工艺条件为加10倍量70%乙醇浸泡12 h,渗漉流速5 mL·min^-1,栀子苷提取量达42.524 4 mg·g^-1。 结论: 该工艺客观可行、稳定合理,可为茵陈四苓颗粒的工业生产提供理论依据。