阿霉素修饰纳米银的制备及其体外抗肿瘤活性研究

摘要： 目的 设计合成一类新型的具有pH响应性的阿霉素-纳米银 （DOX-Ag NPs） 联合抗肿瘤药物, 对其理化性质进行表征, 并研究其体外响应性释药行为和抗肿瘤活性。方法 通过硫辛酰肼 （LA-NHNH2 ） 连接纳米银 （Ag NPs） 和阿霉素 （DOX）, 得到DOX-Ag NPs。利用核磁氢谱 （1 H NMR） 和高分辨质谱 （HRMS） 对硫辛酰肼-阿霉素 （LA- NHN=DOX） 进行结构确证; 通过动态光散射 （DLS） 和透射电镜 （TEM） 分析纳米粒的粒径和形貌; 通过紫外-可见吸收光谱和荧光光谱表征纳米粒的光学性质; 通过透析法结合荧光光谱检测DOX-Ag NPs在不同pH下的DOX释放行为; 采用噻唑蓝比色法研究DOX-Ag NPs对HepG2肿瘤细胞的增殖抑制效果。结果 LA-NHN=DOX的1 H NMR数据及HRMS检测到746.275 6处的分子离子峰均证明LA-NHN=DOX成功合成。DOX-Ag NPs为粒径 （40.4±3.8） nm的球形纳米粒; 在弱酸性条件下DOX-Ag NPs能够快速响应性释放DOX; DOX-Ag NPs对HepG2肿瘤细胞增殖抑制呈现浓度依赖性, 当DOX浓度为0.5~20 mg/L （Ag浓度为0.45~18 mg/L） 时, DOX-Ag NPs组细胞生存率均明显低于DOX 组和Ag NPs组 （均P＜0.05）。结论 DOX-Ag NPs是一种具有pH响应性的联合抗肿瘤纳米制剂, 能在肿瘤组织快速释放DOX, 并通过与Ag NPs的协同治疗, 发挥良好的体外抗肿瘤作用。     

上段食管癌联合喉切除术16例围术期护理体会

近年来，我们对16例患者行上段食管癌联合喉切除术，经精心护理，效果满意。现将围术期护理体会报告如下。     

指纹图谱结合化学计量法研究广陈皮对黄芪-葛根药对化学成分的影响

目的比较广陈皮对黄芪-葛根药对化学成分的影响,从化学角度探讨广陈皮配伍黄芪-葛根药对的协同增效作用。方法制备6种配比的黄芪-葛根-广陈皮药液,建立广陈皮与黄芪-葛根药对不同配比水煎液指纹图谱,对特征峰面积进行主成分分析,确定变量投影重要度(VIP)>1的差异变量(特征峰),并采用高效液相色谱(HPLC)法对其进行含量测定。结果黄芪-葛根药对(30∶10)与黄芪、葛根、广陈皮(30∶10∶5)配比的OPLS-DA分析结果显示,VIP>1的差异变量由大到小排序:芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮、3-OH葛根素、染料木苷、葛根素,其中芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮在两组药液中有明显差异(P<0.01,VIP>1.2)。含量测定结果显示,随着广陈皮的比例增加,芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮含量呈现先增加后减少的趋势,其中以黄芪、葛根、广陈皮比例为30∶10∶5时含量最高。黄芪、葛根、广陈皮(30∶10∶5)配比和黄芪-葛根药对(30∶10)的药液中芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮含量比分别为1.55∶1、1.39∶1、1.53∶1。结论广陈皮配伍黄芪-葛根药对有协同增效作用,黄芪、葛根、广陈皮的最佳配比为30∶10∶5。     

延髓背外侧综合征35例临床与影像学分析

目的:总结延髓背外侧综合征的临床表现与影像学改变,并探讨头部CT及磁共振检查对其的诊断价值。方法:对35例延髓背外侧综合征患者的临床资料与影像学改变进行分析。结果:延髓背外侧综合征的主要表现为眩晕或头晕,共32例(91%),软腭麻痹、咽反射消失26例(74%),恶心、呕吐22例(63%),交叉性感觉障碍28例(80%),同侧霍纳综合征24例(69%),同侧肢体共济失调22例(63%)。且有病例出现锥体束受累体征,如6例有对侧轻度偏瘫,10例巴宾斯基征阳性。35例头颅CT检查均未发现延髓病变;30例头部磁共振显示右侧延髓梗死16例(53%),左侧延髓梗死10例(33%),合并同侧桥脑梗死2例(7%)、合并同侧小脑梗死3例(8%)。结论:延髓背外侧综合征主要表现为眩晕或头晕、软腭麻痹、咽反射消失、恶心、呕吐、交叉性感觉障碍等,且有锥体束受累体征,提示不典型的延髓背外侧综合征可累及锥体束,磁共振有助于其诊断,但在病灶检出上仍有局限性。     

食管癌术后早期肠内营养应用调查

目的:探讨食管癌术后进行早期肠内营养的可行性。方法:采用经鼻十二指肠营养管进行早期肠内营养,对60例食管癌术后早期肠内营养应用病人进行调查分析。结果:60例食管癌术后病人均能很好地接受早期肠内营养应用。结论:食管癌术后病人进行早期肠内营养应用,维持了病人每日的营养需要量,减轻了病人的经济负担,使病人乐于接受。     

脑干出血的综合救治

目的提高脑干出血的救治成功率。方法积极实施气管切开术、亚低温疗法以降低脑细胞代谢、晶体与胶体脱水剂联用并兼顾肾脏保护、抗氧化脑保护剂的早期大量应用、较早投用活血化瘀药物，多学科协作及完善的护理与康复训练。结果18例病人中12例好转出院；2例闭锁状态；2例经积极救治病情稳定，因经济拮据放弃治疗出院；2例死亡，救治成功率77.8%(14/18）。结论脑干出血综合救治的成功率高，收效显著，值得向同仁推荐。     

急性脑梗死患者血清白介素 18动态改变的临床研究

[目的]了解急性脑梗死患者血清白介素 18(IL-18)动态改变的临床意义.[方法]采用 ELISA方法动态测定了 46例急性脑梗死患者和 30例健康对照者的血清 IL-18含量.[结果]急性脑梗死患者的血清 IL-18水平在发病后的第 1天为 (178± 41)ng/L、第 7天为 (104± 34)ng/L,均明显高于健康对照组 (65± 14) ng/L,P均 < 0.01,而发病后的第 14天 [(88± 36)ng/L]和第 21天 [(72± 33)ng/L]则与健康对照组之间均无统计学上的差异 (P均 >0.05);患者第 1天的血清 IL-18水平明显高于第 7、 14、 21天的血清 IL-18水平 (P分别 < 0.05,0.01和 0.01);患者第 7天的血清 IL-18水平高于第 21天的 IL-18含量 (P< 0.05);而其他各组之间的比较则无明显的统计学意义.[结论]结果提示 IL-18可能参与了急性脑梗死急性期的发病过程,动态观察患者的 IL 18含量变化可能有助于监测急性脑梗死的病情变化.     

肝豆状核变性基因表达蛋白的多克隆抗体制备和纯化

目的　制备并纯化肝豆状核变性（WD）基因表达蛋白的多克隆抗体,为进一步研究WD蛋白的结构和功能打下基础。方法　应用RT-PCR扩增目的基因,GST基因融合载体表达并纯化融合蛋白,Thrombin酶切并收集目的蛋白,免疫家兔,凝胶过滤层析纯化抗体血清中的lgG,ELISA检测抗体滴度和western blot检测抗体特异性。结果　本方法生产的抗体滴度达到了1:12500,特异性好。结论　我们应用该方法成功制备了Wilson病蛋白的多克隆抗体,为我们进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。     

应用USE定点诱变技术制备Wilson病突变体

[目的]克隆Wilson病(WD)基因的全长cDNA，制备WD的突变体，为进一步研究突变蛋白的功能奠定基础。[方法]采用RT-PCR和。FOPO-TA克隆技术，克隆了全长WD cDNA，并以此为膜板应用USE定点诱变技术(特异性位点抹除技术)构建了778位(CGG→CTG)、1069位(GTG→GTC)两个突变体。[结果]成功克隆了WD cDNA，并经过全长测序没有发现突变的存在。以此为模板制备了WD基因8号外显子第778位密码子由CGG突变为CTG、14号外显子1069位GTG→GTC的突变体，从而构建了含中国人和欧美WD基因的高频突变点。[结论]USE定点诱变技术是寡核苷酸引物诱变技术的一个重大的改进，该技术采用双位点同时突变的方法，经两次酶切，两次转化，选择效率很高。     

急性有机磷农药中毒患者血清白细胞介素-18的动态变化

急性有机磷农药中毒(AOPP)患者发病急,病情重,如救治不及时可以迅速发生多器官功能衰竭而死亡。本研究中动态检测了AOPP患者血清白细胞介素-18(IL-18)的含量,观察其与血清C反应蛋白(CRP)含量、病情严重程度之间的关系,旨在探讨IL-18在AOPP发病中的意义。报告如下。